赛默飞酶标仪的使用方法通常包括准备工作、实验设置、操作流程和结果分析四个步骤。以下是酶标仪的标准使用方法和注意事项：

一、准备工作

1. 设备检查

• 确认酶标仪设备处于正常工作状态，无明显物理损坏。

• 检查设备电源和连接线是否接好，设备开机后是否正常启动。

• 如果酶标仪配有温控或震荡模块，确保其功能正常运行。

2. 试剂与样品准备

• 按照实验要求准备好酶联免疫试剂、标准品和样本。

• 配置好工作液（如底物液、终止液等），避免污染。

• 确保使用符合实验要求的微孔板（如96孔板、384孔板），避免孔板底部有划痕或气泡。

3. 实验设置

• 安装所需的光学滤光片（如不同波长的滤光片）或确认已安装正确。

• 检查酶标仪的波长范围是否满足实验要求（通常ELISA检测使用450nm主波长，630nm作为参比波长）。

二、实验设置

1. 软件操作

• 实验名称：根据检测内容命名。

• 检测波长：主波长和参比波长（如450nm和630nm）。

• 检测模式：单波长或双波长模式。

• 读取速度：根据实验要求选择快速或标准读取。

• 震荡选项（如果支持）：设置震荡模式（线性或圆周震荡）及时间。

• 启动配套的软件（如Thermo Multiskan FC配套的软件）或设备触摸屏界面。

• 创建一个新的实验程序，设置以下参数：

2. 孔板布局

• 样品孔（Samples）。

• 标准品孔（Standards）。

• 空白孔（Blanks）。

• 对照孔（Controls）。

• 在软件中设置孔板的布局（Plate Layout），包括：

• 明确各孔的功能，确保操作规范。

3. 数据分析设置

• 配置数据分析方法（如标准曲线拟合方式：线性回归、四参数拟合等）。

• 设置结果输出格式，如吸光度值、浓度值等。

三、操作流程

1. 样本加载

• 按孔板布局，将样品、标准品、空白及对照分别加到对应的孔中。

• 加样时避免气泡产生，确保每孔加样量一致。

• 使用多道移液器可提高效率，同时减少操作误差。

2. 孵育

• 根据实验要求，将孔板在恒温孵育箱内进行孵育（如37°C，1小时）。

• 如果酶标仪配有温控模块，可直接在设备内完成孵育。

3. 酶反应终止

• 按照试剂说明书添加终止液，反应停止后尽快进行读板操作。

4. 读取数据

• 将酶标板放入酶标仪托盘中，并确保孔板方向正确。

• 点击软件中的“Start”或“Run”按钮，开始读取孔板数据。

• 读取结束后，结果会显示在软件界面上，并可选择保存或导出数据。

四、结果分析与保存

1. 数据查看

• 检查实验结果，确保吸光度值（OD值）符合实验要求。

• 空白孔的OD值应接近零，标准品的OD值应有良好的线性梯度。

• 异常值应标记并排查原因（如污染、气泡、样品问题）。

2. 数据分析

• 使用内置软件或导出数据至Excel、GraphPad等软件进行进一步分析。

• 绘制标准曲线，计算样品浓度。

3. 数据保存

• 保存实验结果为电子文件（如Excel、PDF）。

• 如果酶标仪支持云端存储或网络连接，可直接上传数据。

五、注意事项

1. 孔板操作

• 孔板在读取前应保持干净，底部无液体残留。

• 避免直接触摸孔板底部，以免光学读数受到干扰。

2. 设备维护

• 每次实验结束后，用无尘布清洁光学窗口和设备表面。

• 定期更换光学滤光片和震荡模块，确保设备性能。

• 长期不用时应将设备断电并覆盖防尘罩。

3. 实验规范

• 确保使用的试剂与设备兼容，试剂保存和使用符合说明书要求。

• 实验过程中保持环境清洁，避免杂质和污染。

总结

赛默飞酶标仪的操作流程简单，但对细节要求较高，特别是在样品准备、加样以及数据分析方面。按照上述步骤进行操作，可以确保实验数据的准确性和可靠性。如果遇到设备故障或软件问题，请及时联系赛默飞的技术支持团队。