紫外-可见分光光度计是一类基于光吸收原理,用于对物质进行定性与定量分析的基础实验室仪器。它通过测量样品对特定波长紫外光(UV,190–400 nm)与可见光(Vis,400–800 nm)的吸收情况,计算出样品的吸光度,从而推算出目标成分的浓度或检测其存在。
赛默飞(Thermo Fisher Scientific)作为光谱分析设备的技术推动者,其紫外-可见分光光度计产品线覆盖科研、高教、工业、制药、食品、环境等众多应用领域。其设备以数据稳定性、测量精度、使用便捷性等为核心指标,广泛应用于样品分析的多个层面。
仪器基于比耳-朗伯定律:当一束单色光通过均匀溶液时,溶液对光的吸收与其浓度及光程成正比。表达式为:
A = εlc
其中,
A 为吸光度,
ε 为摩尔吸光系数(m²/mol),
l 为光程(m),
c 为溶液浓度(mol/m³)。
通过比色检测,将吸收光强与标准曲线对照,可完成对溶液中物质的定量分析。
赛默飞紫外-可见光分光光度计整体由以下模块构成:
氘灯:发出190–400 nm范围的紫外光。
钨灯:提供400–1100 nm的可见及近红外光。
光源切换通过软件或自动光路完成,确保波段完整覆盖。
多采用全息光栅与棱镜结合结构,可对宽光谱连续分光,获得所需波长的单色光。
一些型号配备双单色器系统以增强分辨率与杂散光抑制。
可选单光束与双光束结构。双光束结构能有效修正背景噪声、提高数据一致性。
自动波长校准机制提高设备使用稳定性。
支持标准10 mm方形比色皿。
可选配多联比色架、微量池、温控样品池、自动进样模块。
一些型号具备顶部开放结构,便于操作与清洁。
使用硅光电二极管或CCD阵列,负责接收透射光并转换为电信号,输出光谱图与吸光度数值。
配备触控屏、人机界面与软件系统,集成测量控制、数据分析与方法管理功能。
部分型号支持电脑连接,实现外部控制与数据备份。
赛默飞的紫外-可见分光光度计集成多种测量与数据处理模块,适应不同科研与工业分析任务。
快速读取特定波长下样品的吸光度或透光率。
支持一次测多个波长,适合多组分分析。
单点或多点定标曲线法测定目标物质浓度。
可生成线性或非线性拟合曲线,自动计算R²值。
实现完整波段的扫描(如200–800 nm),输出样品的吸收曲线。
可自动寻找λmax、计算斜率、面积等参数。
监测特定波长下吸光度随时间变化,适合酶反应、降解动力学等实验。
设定时间间隔与总时长,自动采样并生成动态曲线。
用于纯度判别,例如核酸A260/A280、A260/A230等参数计算。
可检测样品中蛋白污染、盐干扰等问题。
用户可储存常用测试方法与标准曲线模板,提升重复性和效率。
支持用户权限管理和数据审计功能,方便合规使用。
核酸、蛋白定量与纯度测定
药物成分含量分析与溶出曲线研究
小分子代谢物吸收特征分析
地表水、工业废水中重金属、氮磷等指标测定
挥发性有机物检测(通过衍生化显色)
紫外扫描分析未知污染物
食品添加剂含量控制(如色素、维生素)
农残检测(如有机磷类)
茶叶、蜂蜜、油脂等天然产品中功能成分分析
各类化学反应动力学实验
酶促反应速率分析
电子跃迁与分子结构验证实验
开机自检
系统自动校验波长、光源状态,完成基线校准。
样品准备与加载
取洁净比色皿或使用自动进样系统注入待测溶液,装入样品仓。
选择测试方法
依据实验需求选择光度测量、定量分析或全谱扫描等模式。
数据采集与分析
系统自动完成测量并实时显示结果,输出图谱与数值。
结果保存与导出
数据可保存至本地或导出为CSV、PDF等格式,便于分析与归档。
为了确保设备的长期稳定运行与测量精度,用户应按如下建议进行维护:
定期清洁光路和样品仓:保持透镜和比色皿清洁,防止灰尘或残液影响测量。
光源更换:根据累计使用时间更换氘灯与钨灯,一般建议500–1000小时更换一次。
软件升级与备份:保持仪器操作系统与分析软件为最新版本,定期备份方法与实验数据。
波长与光度校准:使用认证标准物质(如稀释钾重铬酸盐)进行年度性能验证。
环境监控:避免强光、震动、高湿等干扰因素对仪器稳定性的影响。
赛默飞紫外-可见光分光光度计支持多项国际实验室管理与法规认证,便于在制药、生物技术及环境检测等行业中部署:
满足 21 CFR Part 11 要求(电子记录和签名)
可接入 LIMS 系统
支持IQ/OQ/PQ验证
数据完整性控制机制(审计追踪、用户权限、时间戳)
同时,部分型号支持自动化升级,如接入自动取样器、温控单元或条码识别模块,以满足高通量实验或特定研究流程需求。
赛默飞紫外-可见光分光光度计以其稳定的光学系统、灵活的分析功能、广泛的应用适应性,在科学研究与质量控制中发挥着关键作用。设备可覆盖常规定量测定、高通量样品筛查与复杂光谱分析需求,是实验室开展分子、化学、生物及环境样品检测的核心分析平台。
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