样品预处理
先对鲜奶、乳清或乳制品悬浊液进行均质处理，以破坏脂肪球包膜结构，提升分离效率。可将样品置于40℃水浴中轻柔摇匀25分钟；若目标为蛋白质沉淀，可在4℃环境中以0.1M盐酸调pH至4.6并静置10分钟，促使乳清蛋白层析析出。对于高黏度样品（如浓缩乳）、建议先用剪切器或超声破碎降低粘度，再以1:11:2的比例用缓冲液稀释，以防堵管和不均匀沉降。

离心管与配件选型
离心管常用材料包括聚丙烯（PP）和聚苯乙烯（PS），PP管耐化学腐蚀、抗冲击，PS管透明度更高便于观察。管壁不得有划痕或应力裂缝，否则在离心时易破裂。单管装载量建议控制在管容积的50%~75%，既能保证分层清晰，又留有气垂空间，避免样品随着加速产生上溢现象。

转子类型与安装
固定角转子适合快速沉降，脂肪球分层清晰；摆动桶转子可保持分离界面水平，便于收集沉淀或上清液。转子安装前需彻底清洁，检查叶片有无腐蚀、裂纹和弯曲，并确认与机型匹配。使用时用扭矩扳手按厂商推荐力矩拧紧转子螺帽，防止松动引起振动。

温度控制
蛋白质与脂肪对温度敏感，建议在4℃~10℃的低温条件下离心，以避免热变性和氧化。操作前预冷转子与离心腔至少半小时，并实时监测制冷系统状态。若设备无冷却功能，可将管子置于冰块或冰水浴中，缩短室温下的预处理和装载时间。

转速与时间设置
以×g（相对离心力）而非rpm作为参数标尺，对分离效果更具可比性。常规脂肪球分层可采用8001,200×g、离心1015分钟；若需析出乳清蛋白，则可提高至1,5002,000×g、离心1530分钟。若样品易分层混合，亦可采用逐步升速方式：先以低速进行预分离，再升至目标速度，以减少液体剪切和紊流。

平衡加载
严格称重平衡是避免振动和管爆的基本操作。配对管重量差值应控制在0.01克以内，且两管在转子上应呈对称位置。对于奇数管的装载，可加入空管或等重平衡块，确保所有位置均匀受力。

添加剂与缓冲体系
为防止样品氧化或蛋白酶降解，可在缓冲液中加入0.02%硫代酒石酸钠、EDTA或蛋白酶抑制剂混合物。注意添加剂浓度需通过预实验验证，以免对后续定量分析（如酶标法、质谱）产生干扰。缓冲体系应根据分析目的选用磷酸盐或Tris缓冲，pH控制在7.0~8.0。

清洗与消毒
每次离心后，必须对离心管、转子及适配器进行彻底清洗。可先用去离子水冲洗，随后用75%乙醇或70%异丙醇擦拭，再用去离子水漂净并自然风干。对于高无菌要求，可将管子与配件高压蒸汽灭菌（121℃，20分钟），使用后应检查O型圈与密封件是否老化，定期更换。

安全防护
离心机运行时潜在危险包括管爆、转子失衡、碎片飞溅等。操作人员必须配戴防护眼镜、隔音耳塞与实验服；禁止在机器运行期间打开机盖。离心机放置需水平稳固，周围保持至少20厘米无阻碍空间。如出现异常振动或报警，立即按下急停按钮，待转子完全停止后再检查。

设备校准与维护
建议每3~6个月对离心机转速进行校准，使用转速计验证显示值与实际值偏差是否在±5%以内；每年对转子、衬套和密封件进行全面检查，并根据厂商建议更换老化部件。制冷系统的过滤器和冷凝管需定期清理，确保制冷效率与温控性能。

数据记录与追溯
实验记录本须详细记录样品编号、预处理条件、添加剂配方、离心参数（×g、时间、温度）、操作人员及异常情况处理。保存电子扫描件并建立数据库，以便后续数据分析、质量审查及结果再现。

故障排查
若分层不清或上清浑浊，可检查预处理pH、添加剂浓度及离心力是否符合规范；振动过大或噪音异常，多因平衡加载不当或转子螺帽松动；制冷不足则需查看过滤器是否堵塞或制冷剂是否泄漏；若管爆需排查管材规格与厂家推荐是否匹配，并确认样品体积未超标。

高脂高粘样品处理
面对奶酪、黄油等高脂高黏样品，建议先用搅拌器或超声破碎器将样品剪切至可流动状态，再以低速长时段（500×g、20~30分钟）预离心，去除大颗粒杂质，最后再按常规参数完成分层。

环境与法规要求
实验室温度应维持在18℃~25℃，相对湿度控制在40%~60%，以免引发微生物繁殖或样品挥发。乳制品检测需遵循相关标准，如ISO 8968蛋白质测定、GB 5413.5脂肪含量测定等，对离心条件、溶剂及试剂要求均有明确规定。废液和废管应分类收集，经脱脂、化学降解后由专业机构回收或安全焚烧。

操作人员培训与质量管理
建议对所有使用者开展离心机操作培训，涵盖标准操作程序、安全规范、故障处理及数据管理；实验室应建立定期审计与能力考核机制，确保所有操作符合GMP或GLP要求，并定期评估实验室环境与设备状态，持续优化流程与品质控制。