
如何正确填充毛细管?
一、毛细管基础知识
1.1 毛细管的结构
毛细管通常为细长透明的玻璃或塑料管,其内径非常小,适合利用毛细作用吸引液体。毛细管通常一端封闭(或预封蜡),另一端开口,长度在75mm左右。部分毛细管内壁会涂有抗凝剂(如肝素),用于防止血液凝固。
1.2 毛细管的种类
常见毛细管分为以下几类:
肝素涂层毛细管:适用于采集全血样本,特别是在血细胞比容分析中使用。
无抗凝剂毛细管:适合采集已抗凝的血液样本。
自封蜡尾毛细管:便于离心时封闭,无需外部封蜡。
二、毛细管填充方法
2.1 准备工作
在填充毛细管前,应完成以下准备步骤:
准备血液样本:通常采集静脉血或指尖血,使用含有EDTA或肝素的抗凝管。
检查毛细管质量:确保无裂痕、堵塞或污染。
选定合适的毛细管类型:根据实验目的选择是否使用肝素涂层毛细管。
2.2 填充步骤
正确填充毛细管是整个实验流程中至关重要的一步。以下是标准填充步骤:
将毛细管开口端接触血样液面,利用毛细作用自动吸入血液。
观察液体上升情况,通常填充至毛细管长度的2/3(约60-75μL),避免过满或过少。
避免产生气泡,气泡会影响离心后分层的清晰度和准确性。
立即封蜡:填充后,用封蜡将一端快速封闭,防止血液在离心过程中外溢。
2.3 注意事项
毛细管的填充必须在5分钟内完成,防止血液凝固。
操作者应戴手套并使用一次性器材,避免生物危害。
若操作环境温度较高,应尽快进行离心,避免血样变化。
三、毛细管离心机使用规范
3.1 离心机设备简介
毛细管离心机是一种专为微量血样离心设计的小型高速离心机。其主要部件包括转子、盖子、毛细管槽及读数盘(部分型号)。
3.2 操作流程
3.2.1 样本加载
将封蜡端朝外,将毛细管放入离心槽。
保持对称平衡,即每一根毛细管都应在转子对面放置另一根重量相当的毛细管。
3.2.2 离心设置
转速建议:一般为10,000–12,000 rpm。
离心时间:5分钟即可完成血细胞分离。
3.2.3 启动离心
检查盖子是否盖紧,防止飞出。
启动机器后,不得移动离心机或打开盖子。
离心结束后,等待转子完全停止再取出毛细管。
3.3 离心后的观察
离心后血样会出现明显分层,从上到下依次为:
血浆层(浅黄色)
白细胞/血小板层(Buffy coat,白色极薄层)
红细胞层(深红色)
通过读取红细胞柱高度与总样本高度的比例,即可计算血细胞比容值(HCT)。
四、实验结果准确性的影响因素
4.1 操作技术
不当填充、混入气泡或毛细管倾斜会造成读数误差。
封蜡未封严可导致血样外泄,影响分层。
4.2 离心条件
离心时间过短无法完全分层,过长可能导致样本变性。
不平衡负载可能损坏仪器或导致样本混合。
4.3 血样因素
未抗凝的血样易凝固,造成操作失败。
溶血或脂血会干扰血浆清晰度。
五、安全与维护
5.1 操作安全
实验人员应穿戴完整防护装备。
血液样本应视为潜在感染源,严格遵守生物安全操作规程。
5.2 离心机维护
每次使用后清洁转子和槽体,防止血液残留。
定期检查转子有无裂纹、松动。
根据厂家建议定期校准转速和时间控制系统。
六、应用扩展与未来发展
毛细管技术已应用于以下领域:
随着微流控技术的发展,未来毛细管系统可能集成更多功能,如自动读取、即时分析等,提高检测效率和精度。
结语
毛细管的正确填充及离心操作是血液分析工作中基础而关键的一环。每一个细节,如填充高度、封蜡方式、离心参数等,都会直接影响实验的准确性与可重复性。通过规范操作、持续学习和严谨态度,实验人员可在临床与科研中获得可靠、精确的检测数据。毛细管和毛细管离心机虽然小巧简单,却是微观世界中通向宏观结论的重要工具。