
微量离心机微量样本离心的注意事项?
一、引言
微量离心机(microcentrifuge)因其操作简便、占地小、转速高、转矩大,成为分子生物学、蛋白质化学、细胞学等领域中离心分离微量样本的常用设备。在使用微量离心机对少量样本(通常 ≤ 2 ml)进行离心时,合理掌握操作要点,不仅有助于获得理想的分离效果,也能保障实验室安全,延长仪器寿命。以下从仪器准备、样本制备、参数设置、操作流程、安全及维护等方面,系统阐述微量离心机微量样本离心的注意事项。
二、仪器准备
环境校验
将微量离心机置于平整、牢固、水平的工作台面上,避免在易振动、易倾斜或潮湿的环境中使用;
工作环境温度宜控制在 15 ℃~30 ℃,相对湿度不超过 80%。电源与接地
确保离心机专用电源回路有可靠接地,电压稳定在设备额定值±10% 以内。
避免与高功率电器共用同一路电源,以防电压波动影响离心转速稳定性。机头与转子检查
定期检查转子和转子槽内是否清洁、无腐蚀或异物。
确认转子固定螺纹及密封圈完好,无裂纹、磨损或变形。平衡装置
如仪器配备电子平衡检测功能,应在开机后待自检完成、提醒“Ready”状态后再装载样本。
三、样本制备
离心管选型
根据样本类型和离心条件,选用符合转速需求的离心管:聚丙烯离心管(最高转速一般 ≤ 14 000 rpm);聚苯乙烯管(适合低速);若需要高转速或高 g 值,应使用专用金属合金转子与管套。样本体积
对于常见 1.5 ml 或 2.0 ml 离心管,装样量宜控制在管体容积的 50%~70% 之间,以减少离心时液面张力导致的管盖翘起或样本外溢。样本均一
上样前应充分混匀样本,如为细胞悬液或微粒样本,可轻轻颠倒管体数次或在冰浴中缓慢混匀,避免剧烈振荡导致蛋白变性或细胞破碎。气泡排除
装样后管中气泡应尽量排除,气泡会导致转子失衡,并在高速离心时产生额外气浪冲击管壁,影响离心效率及安全性。
四、参数设置
转速与相对离心力(RCF)
准确设置转速(rpm)或直接输入所需的 g 值(RCF)。不同型号仪器对 g/rpm 的换算关系各异,参考说明书或厂商提供的对照表;若只提供 rpm 参数,则应按公式 RCF ≈ 1.118 × 10⁻⁵ × r(cm) × rpm² 进行计算。时间与温度
a. 时间:根据实验需求设定离心时间,一般 5 000 g 以下多在 5~10 min;5 000 g 以上及粒径 > 1 μm 的沉淀可延长至 15 min;DNA、RNA 等核酸沉淀常用 12 000 g、10 min。
b. 温控:若样本对温度敏感,建议使用带制冷功能的定温离心机,将温度设定在 4 ℃~20 ℃ 之间;对酶学或蛋白质分析,4 ℃ 可最大程度降低热激与蛋白降解。加速/刹车模式
多数微量离心机提供多档加速与刹车模式:
– “快速加速/快速刹车”适用于多数常规分离,但易产生样本扰动;
– “缓慢加速/缓慢刹车”适合对沉淀形态要求严格的蛋白、胞器分离;
– “自然刹车”可让样本平稳停转,避免弱附着的颗粒再分散。
五、操作流程
平衡上样
将装有样本的离心管成对放置于转子上,保证质量平衡。若装不满对数样本,可在对应位置补充等体积缓冲液或平衡管。关盖与上机
a. 对于带锁紧功能的离心机,必须先合上离心腔盖并锁紧至指示灯熄灭。
b. 若为开盖式设备,上机前务必确认管盖已紧贴管体,不能有松动。启动与监控
启动后,密切观察离心机运行状态,确保无异常震动、异响或温度过高报警。若出现不平衡报警,应立即停车检查。停止与取样
待离心程序结束,确认转子完全静止后方可打开盖子,否则有飞溅与安全风险。取出离心管时宜配戴防护手套,避免热表面烫伤或液体溅出。
六、安全防护
个人防护
操作时佩戴实验服、一次性乳胶手套和护目镜;对耐受性差的化学品或病原菌样本,应配合使用面罩或生物安全柜。紧急处理
如出现离心管在运行中破裂或样本泄漏,应立即停止离心并断电,待转子完全停止后小心取出碎片及污染物,先行用 70% 乙醇消毒,再用含氯消毒剂浸泡处理。限制离心物
切勿将易燃、易爆、强酸强碱或放射性物质直接装入微量离心机,如需分离此类样本,应使用专用离心设备。
七、设备维护
日常清洁
每次使用后,用无纺布或棉签蘸取中性洗涤剂清洁转子及离心腔,彻底擦干后再装机运行少量空载程序,以吹干腔内残留水分。定期校准
建议每半年进行一次转速校准和温度校准,可联系厂商技术人员或实验室质控部门执行。转子保养
遇到转子槽内有腐蚀或轻微划痕,可用药棉蘸取稀释的酒精轻擦;如发现深度划痕或裂缝,应立即停止使用并更换新转子,避免运行中断裂飞出造成人身伤害。
八、总结
微量离心机作为实验室常规设备,其微量样本离心操作看似简单,却涉及离心管正确选型、样本预处理、平衡上机、参数设置、安全防护与设备维护等诸多环节。严格按照上述注意事项系统操作,不仅可以获得高质量的分离效果,还能保障实验安全、延长仪器寿命、提高实验室整体运行效率。通过科学的使用与规范的维护,微量离心机将在分子生物学、细胞学及相关研究领域中发挥更为可靠的技术支撑作用。