第一章 总则
本规程针对在二级及以上生物安全实验室中，利用台式或悬臂式微量离心机对病毒或病毒衍生样本进行快速分离、浓缩和纯化等操作全过程提出系统化要求，旨在有效防范气溶胶和液滴飞散导致的生物危害，确保人员健康、样本安全及环境洁净。标准依据包括《实验室生物安全通用规范》（GB/T 19489-2013）、《病原微生物实验室生物安全管理条例》等，强调全过程风险评估、严格防护、规范记录和持续改进。所有离心病毒样本操作须经实验室安全管理委员会审批，严格执行操作流程，任何未经授权或擅自变更均属违规，需立即停止并报告安全主管部门。

第二章 适用范围
本规范适用于BSL-2及以上等级实验室内，使用各种型号微量离心机对含病毒的体液、细胞裂解液、重组病毒载体及其他病毒样本进行的离心处理。样本类型涵盖冠状病毒、流感病毒、腺病毒、逆转录病毒等病原体及其衍生物。不适用于普通化学实验或非生物安全控制的场所。根据病原体致病性和传播途径，操作环境应相应配备二级或三级生物安全柜、负压系统及气密隔离设施，实验人员配置和防护级别须严格遵循风险评估结果。

第三章 人员资质与培训
所有从事离心病毒样本操作的人员必须具备生物安全培训合格证书，并通过理论与实操考核后方可独立上机。培训内容包括病原体危害特性、个人防护装备（PPE）穿脱规范、气溶胶与液滴防控、应急处置流程及废弃物处理方法等。实验室需定期组织再培训与演练，评估对新仪器、新方法和新病原体的适应能力；对培训不合格或未按程序操作者，实验室安全管理员应限期整改或暂停操作资格。

第四章 设备选型与日常检查
微量离心机应选用带有门锁、自动平衡监测、转子保护和温控功能的型号，转子及密封件须由厂家提供并定期更换。每次使用前，操作人员应目视及手动检查：机体无裂纹，转子槽无变形与腐蚀，密封圈弹性良好，控温系统和门锁指示正常。对新购设备需做空载试运行和动平衡测试；对已服役转子，每季度或达到推荐使用次数的一半时需进行动平衡校准与无负载运行验证，确保偏差在厂商规定范围以内。

第五章 实验前准备
实验开始前，应在二级生物安全柜内完成所有样本解冻、稀释和装管操作。使用耐压、抗裂的离心管，封口后在管壁贴上防水标签并统一编号，同批次管体高度与质量相近。样本体积控制在管容积的2/3以内，并与空管或等体积缓冲液成对平衡。操作台面和柜内摆放一次性消毒垫，准备0.5％次氯酸钠溶液、70％乙醇、生物危害警示标志及吸液纸。实验人员需佩戴符合BSL-2要求的实验服、无粉手套、护目镜或面罩以及N95口罩或PAPR呼吸防护装置。

第六章 装载与平衡
装载时，务必在生物安全柜内完成，将离心管成对置于转子的对称位置；单管样本需配等体积无菌水或缓冲液平衡。可选电子天平精确测量各管质量，平衡误差控制在0.05 g以内。切勿混用不同型号或不同磨损程度的转子与适配器；若采用加厚壁离心管，需考虑壁厚带来的质量变化。安装转子和适配器后，确保各部件正确就位并紧固盖帽，启动自检并观察振动及噪音，任何异常应停止并检查原因。

第七章 离心运行规范
启动程序前应确认离心机门已锁定、风扇与制冷系统正常。运行中切勿靠近听放或触碰设备，以免误触停止键。离心参数（转速、时间、温度、加减速级别）应符合实验方案要求，任何调整必须在转子完全静止后进行。若遇报警或高振动，应立即停止运行，待完全停稳后在生物安全柜内取出转子检查。完成既定程序后，应待门锁指示解除、转子完全静止后方可打开机门。

第八章 取出与初步消毒
离心结束后，先在生物安全柜内解除转子锁定并缓慢打开机盖；佩戴新换一次性手套及面屏，将离心管置于含消毒液的托盘中。对转子和适配器表面先用吸液纸擦拭残留液体，再全面喷洒0.5％次氯酸钠或70％乙醇，作用10 分钟以上后进行二次擦拭，确保彻底灭活残余病毒。一次性用品与吸附材料按病原微生物固体废物流程集中封装；可高压灭菌后外送处置或交由具资质单位处理。

第九章 设备清洁与维护
每次操作完成后，应断开电源并打开机盖，待内腔温度恢复至室温后，按厂家说明用中性清洁剂清洗内腔，随后喷洒消毒剂灭活，最后用去离子水擦拭并自然风干。转子、适配器和密封圈应定期拆卸，浸泡消毒剂并用软刷轻轻擦洗，切勿使用金属刷或有腐蚀性的化学品；更换密封圈周期根据实验强度和使用频率确定，一般每半年或达到推荐寿命后更换。所有维护、校准与清洁记录须及时填写，存档备查。

第十章 废弃物处置
离心过程中产生的液体和固体废物均视为潜在病原性废物。实验结束后，将含样本的离心管、接触过样本的吸附材料等一次性用品投入双层封闭的生物危害袋，袋内喷洒或浸泡0.5％次氯酸钠，密封后送至实验室高压灭菌锅处理。高压灭菌结束后方可按一般医疗废物或危险废物程序移交。废液可在生物安全柜内用化学方法灭活后排入指定废水管网，不得直接倒入普通下水。

第十一章 应急处置
若发生管体破裂、液体外溢或转子脱落等事故，操作人员应第一时间停止离心并保持生物安全柜负压，做好个人防护后用吸液器或吸附材料收集泄漏物，边缘向中心喷洒0.5％次氯酸钠，作用不低于20 分钟。清理完成后，对工作面和相关器具进行二次擦拭消毒，并用无菌水冲洗。事故详情（时间、地点、样本类型、人员接触情况）须在24 小时内上报安全管理部门，并启动健康监测与流行病学调查程序。

第十二章 记录与持续改进
实验室应建立完善的离心操作日志，内容包括操作者、样本信息、离心参数、平衡数据、消毒方式及事故记录等，并由安全管理员定期审查。对操作过程中发现的潜在隐患或事故经验进行评估和改进，将修订意见纳入年度安全评审。通过学习新技术、新设备和新病原体管理实践，不断优化操作流程，提升生物安全防护水平，确保微量离心病毒样本处理始终符合最新法规和行业标准。