一、概述
在聚合酶链式反应（PCR）前处理环节，微量离心机承担着样本分离与浓缩的关键任务。合理使用该设备不仅可保证样本纯度和核酸浓度，还能有效降低实验背景噪声，为后续扩增提供可靠基础。本文结合实践经验，分模块阐述微量离心机在PCR样本预处理中的操作要点与防护策略，旨在提升实验安全性与重现性。

二、设备操作前检查

1. 外观与标识：确认离心机外壳无裂纹，操作面板按钮灵活，铭牌与容量指标清晰可见；

2. 电源与接地：使用专用插座，确保接地良好；仪器应连接具备漏电保护功能的断路器；

3. 转子状态：取下转子，检查转子孔内无杂质、腐蚀或划痕；轴承松紧适宜，转轴旋转时无卡滞；

4. 密封圈及盖锁：确认密封圈弹性完好，离心腔盖锁闭稳固，以防运行中产生气体泄漏或意外开启。

三、样本及离心管选择
根据样本类型（细胞悬液、组织裂解液、血清或环境样本）选用合适材质的微量离心管。推荐低吸附聚丙烯材质、刻度清晰、耐高转速、防渗滤。样本体积应控制在管容积的30%～70%范围内，以平衡离心效果与安全裕度。避免使用旧管或变形管，防止高速离心时破裂。

四、转子平衡与装载

1. 平衡原则：同批样本管于相对位置配对，质量差值≤0.01 g；若样本数为奇数，可加入等质量空管；

2. 配对策略：体积差异大的样本应配对空管或稀释后再离心，以保证质量一致；

3. 装载方式：微量转子应先以手轻压管帽，使其完全贴合转子孔；装载完成后轻轻晃动转子，检查离心管是否牢固。

五、离心参数设定
根据实验需求与试剂说明设定合适的转速（RCF或rpm）、加速／减速级别和离心时间。

• 细胞沉淀：4 °C、300 × g、3–5 min；

• 核酸沉淀：12 000–16 000 × g、4 °C、10–15 min；

• 蛋白除杂：10 000 × g、室温、5–10 min。

禁用超过试剂与耗材标定极限的转速，以防管体损坏及样本成分过度剪切。

六、温度与时间控制
温控离心机在低温环境中可有效抑制酶活与核酸降解。若仪器具备预冷功能，应提前将腔体与转子降至目标温度，再放入样本。实验开始前，务必确认仪表显示稳定在设定温度。离心时间不可任意缩短或延长，以免影响颗粒分层或造成样本交叉溶解。

七、污染与交叉污染预防

1. 操作流程：离心前后分别在清洁区与污染区进行，避免将PCR产物或放大片段带入预处理中；

2. 封闭转子腔：运行过程中关闭离心腔盖，减少气溶胶逸散；

3. 定期消毒：使用75%乙醇或次氯酸钠溶液擦拭离心腔与转子表面，建议每周至少一次，或每次大面积操作后进行点消；

4. 一次性耗材：尽量采用一次性离心管与移液器吸头，避免交叉重复使用。

八、实验室安全与生物安全

1. 生物安全柜配合：放置离心机时，应远离生物安全柜气流出口，防止气流扰动导致样本气溶胶扩散；

2. 个人防护：佩戴实验服、手套和护目镜；若处理病原样本，应根据生物安全等级甄别合适的防护措施；

3. 应急预案：若离心管破裂，应先断电停机，待腔体静止后再行清理，使用适宜消毒剂擦拭并做好废弃物分类。

九、设备维护与日常保养

1. 转子保养：每次使用后拆卸转子，用温和中性洗涤剂与软毛刷清洗，彻底冲净残留物并自然风干；

2. 润滑检查：定期检视转轴密封圈与轴承润滑情况，必要时涂抹推荐润滑剂；

3. 软件升级与校准：遵循厂家保养手册，按时进行转速、温度与计时精度校准，并记录校准报告；

4. 季度检修：邀请专业人员进行内部电路、风扇与温控系统检查，确保离心机长期稳定运行。

十、故障处理与应急措施

1. 异响或震动：立即停机，检查转子平衡与管体状况；

2. 温度异常：先确认设定值与温度传感器状态，如需更换传感元件，联系售后服务；

3. 启动失败：查阅错误代码，对照说明书进行初步排查；如无效，应记录故障信息并安排专业检修；

4. 电路跳闸：检查是否短路或过载，确认插座与接地线状况后才能重新启动。

十一、数据记录与文档管理

1. 实验日志：每次离心操作应记录日期、样本编号、转速、温度、时间与工作人员签名；

2. 保养档案：维护与校准记录存档，标注下次保养日期与联系人；

3. 问题追踪：若实验出现异常，应及时对照离心记录，分析可能的离心参数或设备故障原因。

十二、结语
合理规划与严格执行微量离心机操作规范，是PCR预处理成功的基础。通过严格的设备检查、精准的参数设定、完善的生物安全措施及细致的日常维护，能够显著提升样本质量与实验重复性，为后续PCR扩增提供可靠保障。研究者应不断总结经验，优化操作细节，推动实验室管理水平迈上新台阶。