
微量离心机无菌离心管的使用注意事项?
常见材质为聚丙烯(PP)和聚苯乙烯(PS),其中 PP 耐高温、耐有机溶剂;PS 透明度好但耐温较低。
购买前需确认耐化学品范围,如强酸、强碱或有机溶剂的兼容性,以免高离心力或化学反应导致管壁破裂或样品吸附。
尺寸与容量
根据样品体积选择 0.5 mL、1.5 mL、2.0 mL 等规格,避免管内空间过大导致样品分散不均或过小引起样品溢出。
若同时需回收上清或沉淀,可选配低保留底部设计管,加厚底部以增强强度。
灭菌与质量保证
选购符合 ISO 11137 或 EN 556 标准的 γ 射线或环氧乙烷灭菌产品,确保无热源残留。
核对生产批号、生产日期及有效期,杜绝过期管使用。
一、选购与识别
材质与耐化学性
常见材质为聚丙烯(PP)和聚苯乙烯(PS),其中 PP 耐高温、耐有机溶剂;PS 透明度好但耐温较低。
购买前需确认耐化学品范围,如强酸、强碱或有机溶剂的兼容性,以免高离心力或化学反应导致管壁破裂或样品吸附。
尺寸与容量
根据样品体积选择 0.5 mL、1.5 mL、2.0 mL 等规格,避免管内空间过大导致样品分散不均或过小引起样品溢出。
若同时需回收上清或沉淀,可选配低保留底部设计管,加厚底部以增强强度。
灭菌与质量保证
选购符合 ISO 11137 或 EN 556 标准的 γ 射线或环氧乙烷灭菌产品,确保无热源残留。
核对生产批号、生产日期及有效期,杜绝过期管使用。
二、实验前准备
清洁与消毒工作台
在无尘台或生物安全柜内操作,开机后至少使用 70% 乙醇或 1% 漂白剂擦拭台面,风干后方可放置离心管。
手套与实验服
使用无粉手套,定期更换,避免手部油脂或灰尘污染管内;实验服、口罩、头套等也可减少环境微生物。
标签与记录
先在离心管帽或侧壁用耐溶剂笔标注样品编号、日期、浓度等,文字统一、清晰;避免后期识别混淆而重复操作。
平衡管准备
若装载单个样品,则需对称放置等重量的平衡管;而当仅有一支样品时,应添加等质量的“空白”管或加等体积缓冲液。
三、样品装载原则
体积控制
离心管内装液体高度应低于刻度上限的 80%,一般不超过管容积的 ¾,以预防高速离心时产生液体喷溅或上盖松动。
管壁清洁
若样品含悬浮固体,可用移液管缓缓沿管壁加入,避免气泡产生;结束后使用无菌移液吸头,确保不沾管壁。
重心对称
配对样品管的位置必须在同一转子半径上对称放置,重量差不超过 0.01 g;若仅一管样品,则使用空管或等量缓冲液调整质量。
四、离心机参数设置
转速(RPM)与相对离心力(RCF)
根据实验需要设定适宜转速,常用 5,000–15,000 rpm;使用 RCF(×g)更为准确,可通过公式 RCF = 1.118 × 10⁻⁵ × r × RPM² 进行换算。
温度控制
生物样品常需 4 ℃ 离心以抑制酶活或防止蛋白降解;当实验室环境温度较高时,务必启用制冷功能,避免温升影响样品稳定性。
时间与加速/减速曲线
设定离心时间时要兼顾样品沉降所需时间;若样品对剪切力敏感,可选择慢启动(Soft)和缓停(Braking OFF)模式,减少样品扰动。
五、离心过程监控
设备预热与自检
开机后待离心机完成自检并稳定转速,再开始加载转子;制冷机需预冷至设定温度后才能离心冷敏样品。
观察振动与声音
若出现不平衡振动或异常噪声,应立即按“急停”键;待转子完全停止后检查平衡情况及离心管完整性,排查原因再继续操作。
安全防护罩
始终关闭上盖,确保机械防护罩完好并牢固锁紧;绝勿在离心机盖敞开或转子旋转时企图取出样品。
六、离心结束后处理
缓慢解锁
离心完成后,待转子完全停止方可开盖;对于使用缓停模式离心的样品,建议再等待 30 s,确保转子彻底静止。
按序取管
先打开侧锁,再解开上盖;按照从外向内或从一侧对称的顺序依次取管,避免突然取出引起转子失衡。
防止沉淀重悬
取管后应避免剧烈颠倒或摇晃,必要时可先倾斜管口缓慢倾倒上清,使沉淀保持底部紧凑。
七、再使用与重复灭菌
一次性原则
建议无菌离心管尽量一次性使用,以防残留蛋白或核酸影响后续实验;若确需重复使用,必须进行高压蒸汽灭菌(121 ℃、20 min)并彻底干燥。
化学清洗
对于少量有机溶剂污染的离心管,可浸泡于 1% 洗涤剂溶液中清洗,再用大量纯水冲洗干净;完成后需烘箱干燥或自然晾干。
八、化学与温度相容性
溶剂耐受性
聚丙烯对大多数缓冲液及有机溶剂如醇类、酮类耐受良好,但不得长期接触浓硝酸、浓硫酸等强氧化剂。
pH 与温度范围
在 pH 2–14 范围内短时间使用不会明显降解;耐温区间一般在 −80 ℃ 至 121 ℃ 之间,低温保存或高压灭菌均属安全范围。
九、质量控制与记录
实验日志
每次离心操作均需记录操作参数(转速、温度、时间)、离心管编号、样品信息及任何异常情况,确保可追溯性。
定期校准
微量离心机应至少每半年进行一次校准,包括转速准确度、温度一致性及制冷性能测试;校准报告需存档备查。
十、废弃与安全处置
生物危害样品
含病原微生物的离心管在废弃前必须高压灭菌或化学灭菌,灭菌后按生物危害废弃物处理流程丢入黄色危险废物桶。
化学污染废弃物
含剧毒、有机溶剂或放射性标记的离心管,应分别存放在标识明确的化学废物或放射性废物容器中,由专业回收单位处理。
十一、常见误区与排查
误区 | 原因 | 对策 |
---|---|---|
装液超标 | 未参考刻度线 | 严格控制体积,留出 20% 余量 |
未对称平衡 | 粗心或数量不足 | 准备等质量空白管,精准天平称量 |
温度未达标 | 未启用制冷或预冷不足 | 离心前预冷 10 min,确认温度显示 |
急停后未检查 | 图省事 | 每次急停后检查转子与管体完整性 |
十二、附录:故障排查建议
离心机持续振动
排查平衡状态、检查转子卡口、确认离心管是否紧固。
转速达不到设定值
校准转速传感器、更换或维修电机驱动组件。
温度偏高或无法制冷
检查制冷剂泄漏、清洁散热鳍片、联系工程维护。
结语
正确掌握微量离心机无菌离心管的选购、准备、操作及维护要点,不仅能有效避免实验污染和设备损坏,更能显著提升实验效率和数据可靠性。希望以上详尽指南能帮助您在实际操作中得心应手,获得稳定、高质量的实验结果。