

离心机对水质检测样品处理?
一、引言
水质检测是环境监测与公共卫生保障的重要环节,涵盖地表水、地下水、生活污水、工业废水等多种水体。离心机以其高效分离悬浮颗粒、微生物、胶体与无机/有机胶状物的能力,在预处理、富集和分级分析中发挥着关键作用。科学设计离心流程,不仅能提高检测灵敏度和精确度,还能避免结果偏差,为水质评价和污染治理提供可靠依据。
二、水质样品特点与预处理需求
样品类型:包括浑浊水(悬浮固体含量高)、透明水(悬浮物少)、胶体(水渾浊但颗粒极细)、富营养化水(藻类、高有机物)、污泥水(泥沙、絮凝体)。
预处理目的:去除大颗粒、分级富集微生物、浓缩胶体及细小颗粒,为光度法、离子色谱、质谱、微生物检测等下游分析提供干净、富集的分析物。
预处理方法:粗滤(100–200 μm筛网)、静置沉降、化学絮凝(加入絮凝剂后低速预离心)等。预处理后再行高转速离心,提高分离效率。
三、离心机选型与转子类型
微量离心机:处理0.2–2 mL小体积样品,常见于胶体分离或微生物DNA提取前富集。
转子形式:角转子(快速沉降)、水平转子(等密度分层)、软管转子(大体积、现场取样)。
耐腐蚀与密封:处理含盐、酸碱及有机溶剂样品时,应选择不锈钢或涂层转子与防腐蚀密封圈。
四、悬浮固体分离流程
目的:测定水中悬浮固体(SS)含量、颗粒大小分布。
流程:
2.1 取样:现场采集水样,混匀后取一定体积(如500 mL);
2.2 预过滤:通过200 μm滤网去除树叶、砂石等大颗粒;
2.3 预离心:低速(1,000×g,5 min)去除易沉大颗粒;
2.4 高速离心:10,000×g,10 min;沉淀即为悬浮固体,吸取上清后将沉淀烘干称重并计算SS含量。注意事项:离心管选用容量匹配、低吸附材料,避免样品吸附损失;计算SS时应多重平行测定,取平均并扣除空白值。
五、胶体与微粒富集
目标:水中胶体颗粒(0.001–1 μm)及细菌、原生动物、藻类等微生物。
梯度离心流程:
2.1 配置Percoll或聚乙二醇(PEG)梯度(如10%、20%、40%):在离心管内形成连续或分层梯度;
2.2 加样:将预处理后的水样缓慢覆盖于梯度顶端;
2.3 梯度离心:12,000×g,20–30 min,4 ℃;
2.4 分层回收:从各分层处回收对应颗粒富集带,进一步用于粒径分析、DNA提取或显微观察。优势:高分辨率分离,不破坏微生物结构;适合后续分子检测与活性测定。
六、有机污染物吸附剂回收
背景:检测多环芳烃、农药等有机污染物时,常以固相吸附剂(如C18、活性炭)富集目标物。
流程:
2.1 吸附:将水样与吸附剂混合,室温或轻摇下一定时间;
2.2 固相分离:10,000×g,5 min;
2.3 吸附剂回收:弃上清,保留吸附剂;
2.4 洗脱:以有机溶剂洗脱污染物,进一步GC–MS或HPLC定量。要点:离心速度须确保吸附剂全部沉降,温控可保持吸附效率与溶剂兼容性;吸附剂使用后再生或丢弃,应符合环保规定。
七、生物毒性与微生物检测
微生物富集:环境水样中菌体浓度低(10^2–10^4 CFU/mL),离心富集能提高检测下限。
离心策略:
2.1 预离心:2,000×g,10 min,去除大颗粒;
2.2 富集离心:5,000–8,000×g,15 min,4 ℃;
2.3 悬浮重悬:弃上清后将沉淀用PBS缓冲液重悬,用于菌落计数、qPCR或流式细胞术。消毒与生物安全:离心机应置于通风柜或配备防飞溅盖;操作后转子与管腔需用下列消毒:70%酒精擦拭、氯消毒剂浸渍或高压灭菌。
八、营养盐与浊度测定
测试项目:总磷、总氮、硝态氮、氨氮、浊度等。
离心作用:通过离心去除胶体和细菌,获取澄清水样,避免颗粒干扰光度法或比色法测定。
常用条件:3,000×g,5 min,室温;或1,200×g,10 min,根据浑浊度和颗粒量调整。
注意:离心后的上清体积充足,避免过度离心造成目标离子与胶体共沉。
九、重金属前处理
配合化学沉淀:水样中重金属常以金属羟基或硫化物形式沉淀。
联合离心流程:
2.1 加药:向调节pH或加入硫化钠等沉淀剂;
2.2 反应:室温放置10 min;
2.3 离心:6,000×g,15 min;
2.4 沉淀回收:分离沉淀,用浓硝酸消解后ICP–MS定量。要点:pH控制精确、絮凝时间充分;防止金属或化学剂腐蚀离心机部件。
十、离心机校准与维护
校准周期:每半年或累计运行500 h进行一次转速与温度校准;
转速校验:使用校准转速仪对照多档转速(1,000、5,000、10,000 rpm),误差≤±5%;
温度校准:放置标准探头,测试4 ℃至室温范围内温度误差≤±1 ℃;
清洁与防腐:离心腔与转子定期用适宜清洁剂(中性洗涤剂、酒精、氯消毒剂)擦拭并彻底干燥;使用耐腐蚀材料减少化学试剂损伤。
十一、质量控制与数据管理
空白与参比:每批处理设空白(无水样)和标准参比(已知SS或离子浓度)并行离心;
平行样本:至少三重复,计算平均与相对误差(RSD),RSD应≤5%;
数据记录:详细记录样品编号、离心机编号、转速、时间、温度与操作人,纳入LIMS系统并长期保存。
十二、常见问题与优化建议
沉淀难定量:可加入可溶性标记(如荧光微球)辅助回收率计算;
胶体黏性过高:先行化学絮凝或酶解(纤溶酶);
温控不稳定:对低温离心可增加冰浴或预冷转子;
管壁吸附:对有机物或微生物样品,使用低吸附离心管或表面封闭预处理。
十三、案例分享
某湖泊水体富营养化调查中,通过5,000×g、15 min离心,成功富集浮游植物与藻类,结合荧光显微技术计算种群密度;同时以10,000×g、10 min处理上清,测定SS和浊度,数据与在线浊度仪监测高度一致,验证了离心预处理的可靠性与重现性。
十四、结语
离心机在水质检测样品处理环节中,承担着悬浮固体分离、胶体富集、微生物浓缩和化学沉淀回收等多种任务。合理选型转子与耗材、优化离心参数、严格执行质量控制,能够显著提升检测灵敏度与准确度。随着样品多样性和下游分析技术的不断发展,离心流程将更加精细化、自动化与可追溯,为环境监测与污染防控提供坚实支撑。