
气套式培养箱的气体供应中断时应怎么办?
一、气体供应中断的影响与应急原则
1. 气体供应在气套式培养箱中的作用
气套式培养箱通常分为两类:一类仅利用空气加热维持温度;另一类则在温度基础之上,还需通入特定气体(如CO₂、N₂、O₂、H₂等)以满足细胞培养或微生物生长对气体环境的需求。二氧化碳培养箱常用来维持箱内5%~10% CO₂浓度,以保证细胞生长的酸碱度环境;而厌氧培养箱则需保持极低氧分压。在此背景下,气体供应一旦中断,箱内气氛瞬间失去平衡,CO₂含量下降会使培养基pH值升高、细胞代谢紊乱;若氧气发生中断,厌氧或好氧微生物培养可能中止;氮气若中断,气套加热循环可能受阻,影响温度均匀性。因此,保持稳定气体供应是确保实验顺利进行的基础之一。
2. 应急处置的总体原则
面对气体中断,首要目标是保障实验样本安全并防止设备进一步损坏;其次需在最短时间内恢复气体供应或采取替代方案,以将损失降到最低;最后要对中断原因进行彻底排查并建立“故障原因—应对措施—验证结果”的闭环记录,为日后改进提供依据。整体思路可概括为:立即响应 → 样本保护 → 临时处置 → 根因排查 → 恢复验证 → 预防改进。
二、紧急响应与样本保护
1. 确认中断与启动紧急预案
报警识别:培养箱一般配备气体流量/压力监测装置,一旦气体中断,报警器会首先提示。此时应迅速查看控制面板上的报警信息,确认是气体流量低、气体压力不足,还是单纯的管路故障。
火速记录:在紧急情况下,人员应在最短时间内记录中断时间、箱内温度、CO₂或其他气体浓度读数,并拍摄报警画面,确保后续分析有直观数据依据。
通知相关人员:第一时间联系实验室负责人、维护人员或技术支持团队,同时通报可能受到影响的实验项目负责人,以便多方协同处置。
启动应急预案:如果实验室事先制定了“气体供应中断应急预案”,此时要按照预案指引快速展开。若未制定,可临时启用“样本转移预案”——将易受影响的细胞或微生物样本迅速转移至备用培养箱或其他适宜环境中,以免细胞大量死亡或培养体系坍塌。
2. 迅速保护实验样本
转移至备用培养设备:若实验室内有备用二氧化碳培养箱或通风箱,可在短时间内将细胞瓶、培养皿或培养瓶转移过去,继续在备用环境中维持CO₂浓度和温度。不必过度惊慌,优先选择气体供应尚可的近距离设备,从最小化操作时间和环境振荡两个维度考虑。
使用临时气体罐或简易气源:若备用培养箱不够,可考虑临时开启便携式CO₂钢瓶或小型氮气瓶,以手动或简易调压方式为培养箱供气。需遵守安全规范:穿戴防护手套、佩戴气体管路接口,缓慢开启阀门,注意压力变化,防止管路爆炸或气体泄漏伤人。
暂停气体敏感实验:若实验已经进入关键期(如细胞增殖指数检测、药物处理后观察期等),在确认样本移除后,应短暂暂停该实验项目,并在实验记录中注明气体中断可能带来的干扰因素,避免后续数据分析产生偏差。
维持箱内温度:气体中断后,箱内温度若依赖气套循环加热,需要通过短暂关闭箱门、减少频繁开门次数来尽量保持温度稳定,或使用临时保温罩将培养箱包裹,以延缓温度骤降。
三、临时替代措施与快速恢复
1. 临时气源方案
便携式气体钢瓶
小型CO₂钢瓶:可用于二氧化碳培养箱的短时供气,容量一般为25公斤,需配合减压阀、流量计等管路组件使用。开启时先关闭阀门,先将所有管路接头牢固连接,然后缓慢开启阀门,对减压阀和流量计进行调节,确保输出压力在培养箱规定范围(如0.10.2 MPa)内。
手动氮气罐:在厌氧培养或气套循环需惰性气体的情况下,可准备小型氮气瓶。使用时同样要使用匹配的减压阀,将输出流量调节到合适数值(一般几升/分钟),以保证培养箱内部气体循环系统能够正常运作。
便携式混合气体罐:若培养箱需特定比例的混合气体(如5%CO₂+95%空气),可提前订购配置好配比的混合气体钢瓶,在中断时直接接入,省去自行配比步骤。
实验室共享气源或集中气源
如果实验室或楼层内有集中气源(集中供气管网),可临时将培养箱管路与集中供气接口对接。在对接前,应确认集中供气系统压力和气体纯度是否满足培养箱要求,避免带入水分、油污等杂质。对接完成后,打开相应阀门,调节减压装置,恢复气体流量。简易气罩或气袋过渡
在极端紧急情况下,可使用干净无菌的气袋(如医用氧气袋)装入CO₂或氮气,然后通过针头或硅胶管将气体手动输送至培养箱内。但该方法往往难以保证稳定流量,仅能维持极短时间,操作过程中需注意无菌原则,以免污染样本。
2. 快速恢复常规气源
检查气源总阀及分支阀门
确保气瓶阀门已经完全打开,若更换气瓶后需再次拧紧。若是管网气源,中控柜或楼层气源总阀是否已打开,分区阀门是否处于正常状态。排空管路残余空气
在气体中断后,管路内可能充满杂质或湿气,需要关闭培养箱侧的一切截止阀门后,暂时打开减压阀的排气嘴,让管路内空气排净,再关闭排气嘴;然后再慢慢开启减压阀,恢复培养箱供气。这样有助于快速恢复稳定流量,避免杂质进入箱内。观察气体流量计与压力表
恢复供气后,需观察培养箱气体流量计是否回到设定数值范围(如二氧化碳培养箱一般为0.2~0.5 L/min);同时查看气源压力表读数,若仪表指示超出设备承受范围,需通过减压阀适当调压。二次确认箱内气氛稳定
当气体恢复后,需在箱内装载指示剂(如pH指示剂或氧化还原指示剂)或利用箱内自带气体传感器进行多点复测,确认CO₂浓度、O₂浓度、湿度等参数是否达到设定值。若出现较大偏差,应适当延长气体供给时间,待箱内气氛稳定后再恢复实验。
四、故障根因排查与根本解决
虽然上述应急措施能够在短期内维持培养箱基本运转,但要彻底解决气体供应中断问题,需要对故障原因进行深度排查,并加以纠正。以下从常见故障类型逐一分析。
1. 气源问题
气体瓶压力过低或用完
当CO₂或氮气气瓶耗尽时,减压阀指针会迅速降至0,培养箱气流瞬间中断。排查时先查看气瓶压力表读数,若接近零,应立即更换或添加新气瓶。
气瓶使用期限过长或存放环境温度过低时,内部气压不足,尽管阀门未耗尽,但流量无法达到设定值。需检查气瓶存放条件、使用日期,以及气瓶本身是否老化。
气源配送和储备不及时
实验室若未做好气瓶库存管理,当气瓶临近用完时未及时配送,会造成意外断气。建议建立规范的“操作人员提醒—仓库补货—到库登记—提醒续费”流程,确保气瓶储备量始终维持在1~2瓶以上。
管网气源压力异常
如果是气体集中管网,一旦上游供气公司断供、降压、检修或爆管,会导致楼层气网压力降至阈值以下。此时需联系气源供应商确认是否出现计划检修或突发故障,并与实验室气路配套的减压装置、压力调节阀联合检查,确保下游压力稳定。
2. 气路管线故障
管道堵塞或结露
在气体运行过程中,如果气路内出现水分(尤其二氧化碳管道易产生结露)或杂质积聚,会导致减压阀后压力不稳、流量不足。可先关闭阀门,拆下气管,用无菌棉签或压缩空气清理管路内部,并检查气管接口处是否漏水。
定期更换气体滤芯和除湿装置,防止湿气带入箱内。若怀疑管路堵塞,可用氮气反吹管道,看是否有气泡或阻塞点。
连接件松动或渗漏
在气体供应系统中,减压阀、流量计、接头以及培养箱接口处都需要密封良好。接口处若出现松脱、老化或密封圈破损,就会导致气体泄漏。排查时可在阀门和管道接口处涂抹皂液,如果出现大量气泡,说明存在漏点,需要更换密封圈或重新紧固。
特别要检查管道弯头、分支三通、快插接头等处,因为这些位置最容易因振动或撞击而松动。
减压阀故障或流量计损坏
减压阀通过弹簧和阀芯来调节出口压力,一旦弹簧断裂、阀芯卡滞或膜片破损,会导致输出压力不稳或直接阻断。可尝试手动调节减压阀的压力旋钮,若仍无法输出气体,则需要拆下减压阀进行检修或更换。
流量计内若零件脱落、浮子卡住或玻璃管破裂,会导致读数不准确或完全失灵。排查步骤为先断气后拆卸流量计,对流量计进行清理并检查浮子的活动状态;若仍无法正常回位,则要更换全新流量计。
3. 培养箱内部气路系统问题
内部气路阀门或截止阀失灵
气套式培养箱内部一般设有多个阀门来切换不同气体、控制回路。长期使用后阀门容易生锈或积垢,导致开关无响应或关闭不严。此时需要关闭总气源,拆下阀门进行清洗、加润滑油或必要时整体更换。
气密性老化或损坏
培养箱内部连接件、密封圈、气套包层等部位若使用时间过长,会因为长期受热而老化开裂。老化裂纹会造成箱内气源分散或泄漏,使得气套加热循环和CO₂浓度保持失衡。排查时可使用干冰检测法:将干冰放入箱内,关闭门后观察箱外是否出现CO₂浓度升高;或用红外测漏仪对气路接口进行检测。
内部循环风机或管道堵塞
在气套循环加热系统中,循环风机通过吹风产生对流。若风机叶轮上附着大量灰尘或异物,导致风量下降或风机卡死,会影响气路循环效率,使得箱内气体难以快速更新,造成实际气氛参数偏离设定值。处理方法是切断电源后拆下风机叶轮进行清洗、更换润滑油并恢复风机工作状态。
4. 传感器与控制系统故障
气体浓度传感器漂移或失灵
培养箱内部通常配备CO₂、O₂传感器用于实时监测箱内气体浓度。传感器若长期使用未校准,会出现读数偏差,导致系统检测不到实际中断。此时需将传感器拆下,使用标准气体校准仪进行校准,或直接更换全新传感器。
控制器参数设定错误或固件故障
有时候培养箱控制面板上的设定值与实际阈值不一致,导致系统在气体供应中断后并未触发报警或切换到备用模式。此时需要进入菜单检查气体浓度报警设置、延时关闭参数等,同时查看控制器固件版本,若版本过旧或出现系统卡死现象,需升级固件或重启控制器。
PLC或继电器损坏
如果培养箱采用可编程逻辑控制器(PLC)进行流程控制,一旦PLC内部继电器损坏,会导致无法控制气阀开关,也无法及时触发气体中断报警。排查时可检查PLC指示灯状态,对可疑模块进行替换或送修。
五、长期保障与预防性管理
为避免频繁发生气体供应中断状况,应从制度建设、物资储备、培训体系、定期维护等多角度建立完善的预防机制,降低气体中断风险。
1. 制定完善的应急预案与操作规程
编制“气体中断应急预案”
明确各个岗位的职责与协同流程,包括:监控人员、实验负责人、维护人员、采购人员、气体供应商联系窗口等,确保出现中断时能够快速、高效联动。
预案中要包含:报警后应急联系人清单、备用气源的存放位置及其使用方式、备用培养设备的型号与数量、气体瓶更换流程、现场安全注意事项等。
完善操作规程与检查清单
将日常巡检、定期维护与校验工作纳入实验室管理流程,形成“日报、周检、月检、季检、年检”五级检查制度。内容包括:气瓶库存数量检查、减压阀及流量计功能测试、管道密封性检测、传感器校准、风机维护、培养箱气套保温检查等。
为值班或轮值人员编制详细的“气体供应检查清单”,包括具体检查项目、工作时点、记录表格及签名栏,以保证工作落实到人。
2. 储备充足的气源与备件
气瓶与减压阀备货
根据实验室日常用气量进行统计,提前与气体供应商签订长期采购合同,保证气源供应渠道畅通。实验室内应至少保留2~4瓶备用气瓶,以应对突发中断。
备齐常用气体减压阀、流量计、密封圈、快速接头、管道等易损件,并设置合理的“盘点周期”(例如每季度一次),及时补充欠缺物资。
备用培养箱与应急设备
如果条件允许,可购置一台小型便携式CO₂培养箱或混合气体培养箱,作为应急过渡环境。一旦主培养箱气体供应发生故障,可将重点实验样本转移至备用培养箱进行短期维持。
准备简易气源装置(如手动气袋、小型医用气罐)的安全使用指导,并定期检查其完好性。
3. 强化人员培训与应对演练
培训内容覆盖率
对所有使用气套式培养箱的实验人员进行定期培训,培训内容涵盖:气源系统构造、气瓶更换流程、管道排空操作、流量调节方法、仪器报警识别、应急预案各步骤、气体安全操作规程(如防止气体泄漏引起窒息或火灾)、对外联系渠道等。
针对维护人员或仪器工程师,需培训减压阀与流量计拆解、清洗、校准、维修更换、气密检漏等技术要点。
定期应急演练
每半年组织一次“气体中断应急演练”,演练流程包括:模拟气瓶耗尽、管线堵塞或阀门损坏等不同场景,检验报警、通知、分工、紧急转移、替代供气、恢复供气等各环节是否按预案顺利完成。
演练结束后,应撰写“演练报告”,总结演练过程中的问题与不足,并根据反馈及时修订应急预案与操作规程。
4. 建立定期巡检与校验体系
气源系统定期巡检
每周巡检:检查气瓶压力是否在安全范围,气瓶阀门及连接件是否完好,管道接口处无泄漏;检查气瓶标签是否清晰(气体类型、充装日期、到期时间)。
每月巡检:对减压阀进行泄露检测与功能测试,对流量计进行校验并观察是否出现读数漂移;对易凝露管道进行排湿维护。
每季度巡检:测量培养箱箱内CO₂浓度或O₂浓度传感器的读数,将其与校准仪器对比,确保误差在允许范围(一般±0.1%~0.2%);检查培养箱内部气套密封性,观察是否有脱胶或裂纹。
年度校验与维护
每年将减压阀、流量计送至计量检定机构进行校准,确保输出压力、流量的准确度符合国家或行业标准。
对培养箱控制系统进行固件升级,检测PLC或单片机控制板的运行状况,更换老化的继电器电子元件或风机电机。
定期对备用气瓶、备用减压阀及备用设备进行状态检查,保证随时可投入使用。
六、示例与经验分享
下面结合某科研所与某医药企业的实际案例,分享在气体中断时的应对经验及改进举措,供各位学习和参考。
1. 科研所案例:二氧化碳培养箱气源中断应急
某大型生命科学研究所,拥有多台二氧化碳培养箱,实验类型涵盖干细胞培养、高级药物筛选等高价值样本项目。一天凌晨,培养箱发生CO₂气瓶泄漏事故,气瓶所剩气量迅速耗尽且减压阀失灵,导致数台培养箱同时报警。应急响应步骤如下:
启动应急预案:气体监控系统自动发送短信给实验室管理员,管理员立即赶到现场,确认报警原因并拍照记录。
切换备用气源:实验室预先储备了两支小型CO₂钢瓶,现场迅速进行连接。为保证管路无泄漏,管理员使用皂液检测法对所有接口进行再次确认。约10分钟内,几台培养箱恢复气体供给。
样本转移与评估:尽管气体恢复迅速,但为了保险起见,研究所将其中两台处于细胞关键分裂期的培养箱内细胞移至一台备用小型CO₂培养箱中短时维护,并监测细胞形态和pH值变化,未出现明显异常。
故障根因追踪:经检查发现,原气瓶在接近耗尽时,减压阀弹簧因长期受压疲劳失效,造成无法稳定输出。实验室遂对所有减压阀进行更换,并与气体供应商协商,将气瓶更换周期从3个月缩短至2个月。
预防改进:针对该次事故,研究所修订了“气瓶定期更换提醒机制”和“减压阀寿命监测指标”,并在每周巡检中新增“阀门阻力测试”项目,避免类似故障再次发生。
2. 医药企业案例:厌氧培养箱气套中断
某生物医药企业在生产车间内有数台厌氧培养箱用于生产用微生物的发酵实验,该箱需持续供应高纯度氮气以保持厌氧环境。一季度一次全面检修时,厂区集中供气系统需要停气半小时进行管道维护,若不提前采取措施将导致厌氧环境崩溃,发酵菌株失活。应急准备步骤如下:
协调管道维护时间:生产车间与厂区气体维护小组沟通,将停气时间安排在发酵间歇期间,并提前3天通知技术团队做好准备。
启用备用气罐:车间提前准备了4个装满高纯度氮气(99.999%)的便携式气瓶,每个气瓶配备专用减压装置和高压管线。停气当天,技术人员按顺序缓慢开启备用气瓶阀门,并调节减压阀至既能满足厌氧培养箱的静态封闭需求,又不会导致过高的气体耗用。
实时监测气体浓度:在气路切换过程中,技术团队每隔5分钟使用手持式氧气检测仪监测厌氧培养箱内氧气残留含量,确保其始终维持在<0.1%(体积分数)以下。全程共用备用气源30分钟后,厂区气体维修完成,恢复气路后立即关闭备用气瓶并统计气体使用量与更换阀门状态。
总结与改进:此次事件后来被纳入企业的SOP(标准操作规程)中,要求每次管道检修都必须提前一周提交“气路停供申请”,并提前安排“备用气源配置方案”。同时增加了“备用气瓶压力监测”的内容,并且每月更新一次备用气瓶的压力标定数据。
七、总结与展望
气套式培养箱气体供应中断会给实验和生产带来严重影响,及时、科学地应对中断事件至关重要。本文从紧急响应、样本保护、临时替代、故障排查、制度保障、经验分享等多个维度,系统阐述了当气体中断时的应急处置流程、故障根因分析方法以及长期预防性管理要点。核心思路可归纳为以下几点:
紧急响应要迅速,样本保护要优先。在中断发生后,应第一时间确认报警信息、记录现场数据、启动应急预案,并通过转移样本或临时气源等方式争取时间,减少样本损失。
临时替代要安全、有效、规范。使用备用气瓶或集中气源时,必须严格遵守气体管路、减压装置、流量控制等安全操作规范,确保气体流量和纯度满足培养箱要求。
故障排查要细致、全面。结合气源系统、气路管线、培养箱内部气路、传感器与控制器等多个环节进行检查,利用压力检测、皂液检漏、干冰示踪、仪器校准等方法,查找根本原因并彻底整改。
预防管理要持续、规范、有保障。通过制定完善的应急预案、巡检与校验制度、物资储备及人员培训体系,确保实验室在气体供应方面具备较强的抗风险能力。
不断改进与总结经验。借助演练和实际案例,不断完善SOP,保持与气体供应商、设备厂家沟通,定期评估替换阀门、传感器等易损件,对制度和流程进行持续优化。
未来,随着智能化仪器和物联网技术不断发展,气套式培养箱的气体供应系统也将逐步实现远程监测与自动切换,比如在检测到气瓶压力低于设定阈值时自动切换到备用气源,并通过系统提醒相关人员补充气瓶;或通过云平台实时监控培养箱气体浓度,一旦出现异常自动触发多级报警并联动后备方案。这些技术进步将进一步提升气体供应的稳定性和应急响应效率,为科研和生产提供更安全可靠的保障。