一、洗净率概念与衡量方法

洗净率（washing efficiency）通常用以下三类指标量化：

1. 残留体积分数——洗后孔底残液／洗前总液量；

2. 背景信号抑制率——空白孔 OD 或 RLUs 的下降百分比；

3. 交叉污染率——色素或标记物由高浓度孔转移至低浓度孔的比值。
   这些指标必须结合使用，单看残液量往往无法真实反映“洗得干不干净”。

二、洗液量发挥作用的两条物理路径

1. 快速体积稀释阶段
   当新鲜洗液喷入时，它会立即把“液滴状”残液与未结合组分稀释并抽走。此过程几乎完全由单次冲洗体积与泵速决定，量越大、流速越高，稀释倍数越高。扩散/浸润阶段

2. 一层紧贴孔壁的微薄液膜（通常 <20 µm）仅能依靠分子扩散交换溶质，决定了需要“浸泡 + 再抽吸”才能进一步降低背景。此阶段对时间和表面张力更敏感，单纯增加体积收益有限。

简而言之，“大水漫灌”可以解决第一阶段，却很难触及第二阶段的扩散瓶颈。

三、洗液量—洗净率的量化关系：递减收益曲线

实验与模拟皆表明，在标准 96 孔板中每孔冲洗体积从 100 µL 提高到 300 µL时，背景信号可下降 50% 以上；但从 300 µL 继续增加至 500 µL，洗净率平均只再提升 5–10%，曲线明显趋于平台。若同时设定 3–4 个冲洗循环，总体背景抑制率与 400 µL×3 次几乎等效。

数学模型（对数线性稀释）

Cn=C0(1−VdVw+Vr)nC_n = C_0\left(1-\frac{V_d}{V_w+V_r}\right)^nCn=C0(1−Vw+VrVd)n

C 为残留组分浓度，V_d 为单次冲洗体积，V_w 为孔内工作液体积，V_r 为残液体积，n 为冲洗次数。
当 V_d≫V_r 时，曲线进入递减斜率区域，此时增加 V_d 远不如增加 n 更划算。

四、体积与其他参数的耦合效应