洗板机多种液体轮换使用时如何清洗管道？
一、多液轮换的实验需求背景
在实际应用中，洗板机往往需要按实验类型或程序段落依次注入不同功能的液体：
去离子水或纯水：用于最后一步冲洗或稀释中和；
含Tween-20洗液：清除非特异结合蛋白；
高盐缓冲液：用于特定洗脱程序；
酶清洗剂：分解残余有机成分；
抑菌液或清洗维护液：用于停机前系统保护。
这类“多阶段、间歇式流体更替”的使用策略，对管路系统提出两个关键要求：快速彻底冲洗以及最小化交叉干扰。
二、管道残留液体的危害机制
未有效清洗的管道会产生多种问题：
交叉反应：强酸性清洗液残留可能与弱碱性缓冲液中和，影响清洗效果；
酶抑制或激活：不同酶类清洗液混合后可能残留活性，作用于下轮实验孔；
荧光或颜色干扰：若上一种液体含有显色物质（如TMB残留），会干扰下一阶段读数；
微生物滋生：部分含碳源液体在温暖管道中可形成生物膜，长期影响系统卫生；
管壁吸附/再释放：某些表面活性剂在管壁吸附后缓慢释放，延续影响数十个板次。
因此，科学设置清洗步骤不仅是设备维护的任务，更是确保实验可信度的“防火墙”。
三、系统结构决定清洗方式选择
不同洗板机在流体路径结构上差异显著，常见两种布局：
1. 单泵多阀切换式结构
洗液通过多个电磁阀接入同一个泵，依次切换液体种类。这种结构优点是紧凑、高效，但因共用主通道，交叉污染风险高。适合静态阶段清洗。
2. 独立泵路并行系统
每种液体拥有独立泵与吸液通道，通过切换接口或程序分段使用。清洗效率高，适合高洁净需求实验，但设备成本与维护复杂度较高。
根据设备结构不同，清洗程序需做相应调整，不能一刀切。
四、清洗步骤与程序设计逻辑
根据液体特性与管路复杂度，一般可将清洗流程分为以下步骤：
（1）空管排液
目的：快速排出前一种液体，减少新液与残液混合风险。
方法：以空气推动、正压吹扫或抽空操作完成，时长控制在10秒以内，防止气泡进入系统。
（2）首轮冲洗
使用中性缓冲液（如PBS）或纯水冲洗1–2轮，目的是稀释并带走残液成分。此步采用较高流速（如800 µl/s）有助于剪切吸附液滴。
（3）动态循环冲洗
开启循环泵，使冲洗液在主管路—喷头—回流管—废液通道内循环，建议持续30–60秒以提升流动性与贴壁层清除率。
（4）震荡排液+深度抽空
启动喷头震荡/震荡台/微振动功能，同时最大功率抽液，防止管道内低洼区域存液。
（5）第二阶段清洗液注入
此步可选用异性质清洗剂，如含低浓度NaOH的清洗液，用以破坏生物膜或蛋白复合物残余。
（6）最终漂洗与系统复位
用超纯水彻底漂洗数轮，保证新液体不受上一步影响。系统保持空管待机或预填新液视任务而定。
五、参数优化与关键变量调控
针对多液体清洗，以下参数可作为程序优化参考：
| 参数名称 | 推荐值 | 说明 |
|---|---|---|
| 冲洗体积（每轮） | 1000–1500 µl | 依设备管道体积设定，保证“完全替换” |
| 冲洗次数 | 2–4轮 | 视前一液体粘度或毒性而定 |
| 抽吸深度 | 喷头底部0.3 mm | 保证无残液残留 |
| 抽吸速度 | 中速（300–500 µl/s） | 防止空气卷入液面 |
| 循环时间 | 30–90秒 | 用于破除附着层 |
所有参数应根据所用液体具体配方、设备型号与实验要求灵活调整。
六、清洗液种类选择与注意事项
为了更好地清洁管道、保护材料并抑制残留效应，推荐以下清洗液搭配：
| 清洗目的 | 推荐液体 | 注意事项 |
|---|---|---|
| 中性洗 | PBS 或Tris缓冲液 | 稳定性高，可日常使用 |
| 酶去活 | 1%次氯酸钠稀释液 | 强腐蚀性，必须彻底冲洗残留 |
| 杀菌防霉 | 0.1% 苯扎氯铵或氯己定 | 注意冲洗后避免生物活性干扰 |
| 管道脱脂 | 2% Triton X-100 | 用后须大量纯水冲洗避免泡沫残留 |
| 蛋白残留清洗 | 含NaOH或蛋白酶混合液 | 建议小批量实验验证兼容性 |
若设备材料为不耐碱或不耐氧化的材质（如软管为硅胶或聚氨酯），需评估兼容性后使用。
七、实践案例：生物制药平台多液切换实操流程
某抗体检测实验平台中使用如下流体序列：
清洗液A → 酶去除液B → 去离子水 → 抗菌保存液C。
使用如下操作逻辑：
使用空气驱动系统排出A液残留（5秒）；
注入纯水1 ml × 3轮循环冲洗；
切换B液，低流速注入，静置30秒；
启动回流泵循环60秒；
二次抽干+高压气体吹扫；
注入去离子水2轮；
注入抗菌液C并静置系统待机。
结果显示，下一轮实验中背景值显著下降，空白孔OD均值降至0.03以下，信号重复性提升15%。
八、长期运行下的预防性清洁策略
日常操作中，除了在液体轮换时清洗外，还应定期执行深度管路清洁计划：
每周一次：使用温和酶解液清洗全系统；
每月一次：使用稀释NaOH进行全通道冲洗（含废液管）；
每季度：拆除喷头并目检有无管内斑块、水垢或颜色沉积；
年检维护：由厂商或技术员更换关键管件、验证泵腔清洁性能。
九、自动化清洗程序与软件辅助控制
目前高端洗板机已普遍支持“多液清洗模板”功能，用户可在软件中预设：
每种液体进入前所需冲洗步骤；
每种液体后所需保护液类型与体积；
不同液体之间的管路清洗强度（标准/加强）；
异常中断后的“重新清洗策略”。
此外，部分型号集成传感器可监测液体种类、电导率或颜色变化，自动判断是否需要额外清洗轮次。
十、结语：优化多液清洗，保障实验效能
随着ELISA、CLIA、核酸扩增及多靶标检测实验的复杂化，洗板机在液体切换过程中承担的流体管理责任愈加重要。合理、高效、可追溯的管道清洗方案，不仅决定实验本身的准确性，也关系到设备寿命、试剂经济性与质量体系合规。
