
微孔板离心机实操考试应注意哪些细节?
一、仪器结构与原理认识
核心组件辨识
首先,必须熟悉微孔板离心机的组成部分,包括机盖、转子仓、转子本体、控制面板、显示屏、制动装置、电机和冷却系统等。机盖通常设有安全锁,只有盖子关闭并锁住后,设备才能启动;转子仓内须选用与所用离心板兼容的适配器或转子托架;转子本身可能分为固定式与可更换式两种,每种转子在安装时都需拧紧螺丝,并且轻轻晃动确认无松动。电机负责驱动转子,冷却系统则用于在高速运转过程中保持温度稳定,避免样本因温度升高而失活。控制面板多为触摸或按键式设计,上面标示有转速、时间、温度等参数设置区域。要在考前认真观察并辨认各个部件名称及其功能作用。工作原理概述
微孔板离心机运行时,电机驱动转子旋转,使微孔板中心到旋转轴的离心力场形成。在不同转速条件下,样本中沉淀颗粒因密度差异,在离心力作用下沉降到底部,而上清液则留在孔内或孔壁。若转子带有温控功能,还可以在程序过程中保持一定温度,避免蛋白质样本或细胞样本发生热失活。理解离心机如何将机械能转化为离心力,以及为何需要平衡样本质量,是后续操作的理论基础。
二、实验流程与准备工作
考场环境确认
进入考场后,首先确认设备型号与教学资料中是否一致。检查电源线无破损,确保插座接地可靠;确认转子仓内无多余物品,排除瓶盖、手套或纸屑等杂物;检查仪器周围无障碍物,以免操作时触碰到其他物品影响安全。若设备配有外置显示屏或电脑接口,还需确认网络线或USB线是否连接正常,以防需要更新固件或调用实验程序时出现意外。样本和实验耗材准备
通常考试会提供若干微孔板、样本试剂瓶、刻度微量移液器和相应试剂。移液器应在考前进行液路检查,吸液与排液动作要顺畅,不可出现断液或滴漏现象。吸头需选用与移液器配套的、高度匹配的耗材,并且保证无静电残留。如使用多道移液器,应提前校准每一道通道的一致性。称量样本或配制缓冲液时,应遵循实验室计量规范,使用电子天平称量粉末或液体,并记录准确质量或体积以便后续平衡步骤。安全防护与个人防护装备
考试过程中必须全程佩戴防护眼镜,以防实验过程中高转速离心机发生异物飞出导致眼部伤害;实验服要扣好纽扣,袖口和领口应包裹得当;手套需选用合适尺码,不可佩戴滑落或过大,以免操作时影响灵敏度。若考试要求使用户外用紫外灯对微孔板进行消毒,还需佩戴防紫外线护目镜和口罩。对化学试剂或标本处理后,要在离心前确认无外泄,手套上如有黏附试剂须及时更换,以免污染仪器表面。
三、样本装载与平衡技巧
平衡原则
微孔板离心机不同于单管离心机,其转子本身已为多孔孔板设计,因此在放置微孔板时,需要保证每个对称位置上所放微孔板的质量几乎相同。若仅放置一块需要离心,则在等二号位置放置一块空板或加入等质量的水;若放置两块,则可以在相对位置放置,并且每一板上的各孔质量要尽量保持一致。切忌单边加载或者让一侧质量明显大于另一侧,否则旋转过程中会出现离心头剧烈震动,判断异常时,系统会自动停机以保护自身和样本安全。样本封板与防溢措施
装液前,务必检查微孔板密封膜或盖板是否完好无损,与转子接触面应干净无灰尘。如实验要求对单孔加入多孔板上样,每次吸取样本后,需要先轻轻敲击移液管尖,让样本停留在吸头底端,再慢慢将吸头滑入孔内侧壁,以防样本贴壁后突然释放,造成液体气泡或滴漏。样本进孔后,应在孔内侧壁轻轻接触,让液体顺势滑入,以减少气泡产生。若液体表面出现气泡,可在离心前用移液枪轻拍板底,注意手法要轻,切勿大力敲击。离心转子安装与锁紧
若使用可拆卸转子,需要先确认转子的型号与离心机参数匹配。将转子套在离心机主轴上,轻转转子确认无异响,再使用扳手或手动旋钮将转子锁紧。上紧时不能过度加力,避免损坏螺纹;也不可过松,否则离心过程中会出现松动。安装完毕后,用手指轻摇上部,若能感受到轻微晃动,需再次拧紧;若完全固定,则可进行下一步。
四、操作参数设置与程序执行
参数选择原则
在考试题目中往往会给出样本类型及目标沉降效果,需要考生根据实验要求设置合适的转速(单位rpm或rcf)、时间与温度。若题目要求使用rcf值,须先将rcf换算成对应转速,并根据试题给出的离心半径进行计算;若需要保持恒温,则要在程序中启用制冷功能,并设置所需温度。设置过程中,要特别注意单位与数值的对应,避免出现因单位弄错导致转速过高或过低,影响样本分离效果。编程步骤与操作顺序
打开控制面板后,先选择“创建新程序”或“Edit”模式,根据提示输入程序名称、转速、温度、时间、加速级别、减速级别等。一般建议将加速与减速级别设置为中等,以减少样本中细胞或沉淀物因过快加速而破碎。如程序需要分段离心,如先低速后高速,只需在程序列表中添加第二段参数。确认无误后,将程序保存至“F1、F2”或其他可调用按钮。若现场需要重复同一个程序,应先保存名称,再通过快捷键启动,节省设定时间。完成后,按“Start”键前要再检查一次参数,尤其温度与时间,避免发生误操作。启动与监视运行
在启动之前,确保离心机盖已关闭且安全锁已锁定。按下“Start”键后,应目视数字显示屏,观察转速逐步攀升至设定值,并在屏幕上显示当前转速、剩余时间、温度曲线等信息。此时要特别留意仪器运行声音,如果出现异常振动声或噪音,需立即按“Stop”或“Emergency Stop”键,确认原因后再继续。此外,应保持考场安静,避免剧烈震动或碰撞影响结果。
五、安全规范与考场规则
紧急停机与报警反应
考场中如遇紧急情况,比如转子出现强烈振动、盖子松动、断电警报或异常温度报警等,应第一时间按下红色“急停键”,使设备立即停止运转。随后联系监考老师并说明情况,以免误操作造成样本丢失或设备损坏。急停后,切勿立即打开机盖,需要等系统自动或手动降速并停止转动后,才能解除安全锁,打开盖子检查转子与样本状况。生物安全与化学防护
若实验涉及病原微生物、高危化学试剂或放射性物质,务必在操作前按照生物安全三级或化学品操作规程做好分区隔离。离心时要确保离心管和板面无渗漏,且密闭盖板或密封膜完好。如使用含病毒或细菌的样本,应将整个转子仓置于生物安全柜中操作,防止气溶胶扩散。若发生渗漏,应先断电并带好防护装备,使用消毒剂或适当化学药剂彻底清洗转子槽与转子表面。考场行为规范
在实操考试时,要遵守考场纪律,不可随意走动或交谈,若有问题需举手示意监考老师指导。不要触碰他人的仪器或材料,以免影响他人成绩。完成实验后,要将使用过的耗材(如吸头、一次性手套)放入指定废弃容器并盖好盖子。若考试要求填写实验记录本,应在规定时间内清晰、规范地记录实验过程,包括样本编号、操作时间、参数设置等,以备评分员审核。
六、清洁保养与考后整理
仪器表面与转子清洁
考试结束后,即便设备还将继续用于其他考生,也要及时用无绒布或专用布蘸取适当浓度的70%乙醇擦拭仪器外壳和操作面板,防止汗渍或化学试剂残留。对于转子与适配器,应将转子拆卸,使用中性洗涤剂和流水彻底清洗,去除残留物后风干或使用低温烘干箱进行烘干,切勿在高温环境中烘烤,以防转子变形。烘干后在转子金属轴承处滴入数滴高纯度润滑油,防止下次使用时生锈或卡顿。样本与废弃物处理
已离心完毕的样本若为生物或化学危害级别低的标本,可将板盖重新封好并进行常规废弃;若是高危或传染性样本,需要按生物安全规定进行灭活处理,再集中移交专业处理机构。使用过的移液器吸头需集中放置在规定位置,并在每次取出前确认周围无污染痕迹。实验记录纸张如果书写错误须在不影响可读前提下用单线划去,不可乱涂乱画,以保证记录完整性。
七、常见故障排除与应急预案
振动过大或偏心现象
若启动后仪器出现强烈抖动,首先应立即停止运行,检查转子是否正确安装或是否存在松动;其次检查所放微孔板的质量是否平衡,并确认板面上是否有破损或者存在多余残液。重新调整后再尝试低速启动,观察是否正常旋转;若依然有抖动,可能是转子受损或机轴异物,应更换转子或联系维修人员。温度无法达到设定值
当离心机自带制冷功能,但运行中屏幕显示实际温度高于设定值,需检查设备是否处于通风良好处,散热风扇是否正常工作;确认冷凝器是否被灰尘堵塞,并在停机后用压缩空气轻轻吹净;若上述方法无效,可能需要在考场现场及时申请更换设备或通知监考老师更换考场设备。屏显故障或按键失灵
若在考试过程中屏幕出现卡顿或触摸按键无响应,先可尝试按“Cancel”键或“Stop”键退出当前界面,并重新进入程序设置;若重启后仍无法正常使用,需立即使用应急程序,比如手动校准或切换到备用程序接口;若设备故障无法自行解决,则要及时申请更换或调整考场安排,避免因设备故障耽误考试时间。
八、考场心态与时间管理
预演与自检
在正式考试前,务必充分利用练习时间进行多轮演练,模拟考试环境完成从上机操作、样本装载、程序设定到实验结束的完整流程。演练过程中要计时,熟悉每个步骤所需用时,以便正式考试时合理分配时间。把自己当作严格的评分员,评判动作是否规范、记录是否规范、语言是否清晰。保持冷静与专注
考试时,难免会遇到突发状况,比如液体撒在操作面板上、移液器吸头无法吸入样本、转子无法上锁等。此时要保持理智,不要慌乱。先挂掉离心程序,检查故障原因,简单处理后再开始下一步;如果时间紧迫但样本仍需离心,可先切换到备用离心机,确保实验完成率。不要因个别小失误而影响整体表现。充分利用记录本与时间提示
在考场中,监考老师通常会提醒剩余时间,但最重要的是参照自己的计时规划,合理安排每一步骤:装载样本、设置程序、离心运行、取板操作、清洁整理、填写记录。若样本较多,可以先进行第一轮离心,边待样本运行边完成记录、擦拭仪器及处理废弃物,实现多任务交叉,提高效率。
总结:在微孔板离心机实操考试中,要做到胸有成竹、细致入微。从仪器部件认知到程序参数设置,从样本平衡细节到安全防护要求,从清洁维护到故障应急,每一个环节都需高度重视。掌握离心机的原理与规范操作,既要保障实验数据的准确性,也要做到个人与周围环境的安全。只有在平时训练中积累经验、在考试中保持沉着镇定,才能在实操考核中取得优异成绩。