一、概述

在GMP/GLP质量体系中，微孔板振荡器的OQ/PQ是保证设备在实际运行条件下满足设计规范、实现预期性能的重要环节。OQ侧重验证设备运行参数和安全保护功能是否符合技术规格；PQ侧重评估在典型生产/实验条件下，设备能否稳定、可靠地完成指定任务。二者共同构成设备最终验收的核心内容。

二、OQ—运行确认

1. OQ目标

• 验证振荡器硬件、软件及安全保护系统的功能完整性。

• 确认设备在所有规格范围内，参数设定准确且响应及时。

• 保障运行环境与电气接口符合技术要求。

2. OQ准备

1. 编写OQ协议

• 前言：简述目的、范围、职责分工及术语定义。

• 设备信息：型号、序列号、制造商、安装地点和出厂日期。

• 测试项目：列举所有拟验证的功能、参数及其接受标准。

• 测试环境：温度、湿度、电源参数及振荡介质说明。

• 资源配置：检测仪器（频率计、温度计、加速度传感器等）、辅助设备、工具及耗材清单。

• 角色与权限：明确执行人、审核人及批准人。

2. 检查前提条件

• IQ已完成：包括设备到货验收、安装位置、电气接地、结构安装、软件安装及网络配置等已验证并记录完毕。

• 校准证书：所有检测仪器均在有效期内，并具有可追溯校准证书。

• SOP与表单：OQ执行SOP、数据记录表格、偏差报告模板和签字栏等已齐备。

3. OQ执行

3.1 功能验证

1. 面板与软件操作

• 按键/触屏响应：依次测试主控面板所有按键与菜单选项，响应时间≤1s，无输入失误或冻结现象。

• 参数输入范围：分别输入最低值、最高值和典型值（如振幅1–50mm、频率10–300rpm、运行时间1s–99h59min），读取值与设定值偏差≤±1%。

• 存储/调用程序：新建程序、保存、删除、调用各项功能，验证执行一致性，程序存储数目与最大容量符合说明书。

2. 安全保护测试

• 超速保护：故意设置超过最高频率，观察是否自动停车并报警。

• 欠压/过压保护：模拟电压异常，确认设备切断并报警。

• 紧急停止：按下急停按钮后，振荡器立即停止并切断输出，松开后需重新启动。

• 门/盖保护：若振荡箱配有门联锁，打开后振荡应立即停止并报警。

3.2 性能参数校验

1. 振幅校准

• 示波器或位移传感器测量：在不同频率档位（如50、150、300rpm）下，记录实际振幅，偏差≤±5%。

• 多点测试：至少在低、中、高三点测试，每点重复三次并取平均。

2. 频率校准

• 频率计测量：使用光电或磁电传感器，测定设定频率与实际频率差值，误差≤±1rpm。

• 线性范围：在10–300rpm范围内至少五档测试，验证线性关系。

3. 稳定性与波动度

• 长时间运行测试：设定典型工况（如200rpm、10mm振幅）连续运行8h，采集每隔30min的振幅与频率值，偏差范围应保持在设计要求内（通常±5%）。

• 温升检测：振荡平台与机壳表面温度在8h内升高不超过5°C。

4. 载荷能力验证

• 满载测试：在平台上放置最大允许重量（如5kg均匀分布），验证振幅与频率误差仍在±5%范围内，且无异常振动或噪声增大。

3.3 环境与接口检查

1. 环境适应性

• 在不同温湿度条件（15–30°C、20–80%RH）下进行功能与性能测试，确认设备性能无明显变化。

2. 通讯与接口

• 若有外部通讯需求（RS-232、Ethernet或USB），模拟数据传输场景：发送控制命令并接收状态反馈，无丢包或延迟超限（≤100ms）。

4. OQ报告

• 测试记录：完整填写每个测试项目的数据与观察结果。

• 偏差与偏差处理：如果出现不符合项，需填写偏差报告，分析原因，并记录纠正措施及再验证结果。

• 审核与批准：由执行者、QA审核、部门负责人签字，最终形成OQ确认文件。

三、PQ—性能确认

1. PQ目标

• 在实际生产/实验流程中，验证振荡器能否稳定、高效地完成既定任务。

• 通过代表性工况试验，评估设备对实验指标（如混匀度、重复性、样本完整性等）的影响。

2. PQ准备

1. 编写PQ协议

• 项目背景：说明实验目的、样品类型（细胞、蛋白、核酸等）及关键质量指标。

• 试验方案：明确样品数量、批次数量、振荡参数组合、检测方法及接受标准。

• 安全与废弃物管理：列明生物安全、化学安全及废液处理流程。

2. 样品与检测方法

• 选择稳定性好且易定量的示踪样品（如荧光微球、染料溶液、标准DNA片段等）。

• 确定检测仪器（酶标仪、荧光计、分光光度计、粘度计等），并保证校准合格。

3. PQ执行

3.1 代表性试验

1. 混匀效率测试

• 固定板式样品：在96孔板中加同浓度染料溶液，设定两个振荡方案（如100rpm/5mm与200rpm/10mm），分别振荡2min、5min、10min。

• 检测与分析：用酶标仪测定各孔吸光度，计算CV值（孔间变异系数），要求CV≤2%。

2. 温和振荡对细胞存活率影响

• 细胞悬液：取同株细胞悬液于板中，进行200rpm/5mm、300rpm/3mm两个工况振荡20min。

• 活力检测：采用台盼蓝染色法或荧光染色法测定存活率，要求细胞存活率≥90%。

3. 蛋白稳定性评估

• 蛋白溶液：分别在150rpm/5mm与250rpm/8mm振荡30min。

• 结构完整性检测：使用紫外–可见分光光度计记录吸收光谱或用胶体金法检测聚集，判断是否有降解或聚集现象。

4. 高通量自动化兼容性

• 将振荡器与自动移液工作站联动，通过编程实现“移液→振荡→测读”循环，进行多轮（如50轮）全流程试验，检查是否出现堵塞、信号丢失或样品溢出。

3.2 重复性与再现性

• 批内重复：同一批样品在相同条件下重复3次，计算CV；CV应≤3%。

• 批间重复：不同批次样品或不同日期进行试验，结果应一致，偏差≤5%。

3.3 极限与异常工况

• 最小负载测试：空载或1孔样品振荡，确认系统稳定；

• 极限参数测试：接近最大振幅或频率运行，观察样品是否溢出、飞溅或泡沫产生。

4. PQ报告

• 数据汇总：以表格和图表形式展示各项性能指标及统计分析结果。

• 评估结论：对照预先设定的接受标准，给出设备性能是否符合使用要求的结论。

• 改进建议：如发现性能不足之处，提出优化方案（如调整振荡方案、更新夹具等），并在实施后补充再评估。

四、复验与再确认

1. 定期复验

• 建议每年至少进行一次完整的OQ/PQ或部分关键项目验证，确保设备性能不随时间衰减。

2. 重大变更再确认

• 如更换电机、控制器、主要部件或软件升级后，需重新执行对应的OQ项目；若影响实验结果，则补充PQ验证。

五、文档管理与质量追溯

• 归档：OQ/PQ协议、执行记录、偏差报告、审核批准文件等均应按电子和纸质双轨管理，保存期限不少于设备寿命期加五年。

• 追溯：如出现实验异常，可通过设备验证记录快速定位问题来源，实施纠正和预防措施。

六、注意事项与最佳实践

1. 严格控制环境条件：温湿度、电压波动等外界因素对振荡器性能影响较大，建议在恒温、恒湿的实验室或仪器房内进行验证。

2. 校准与维护配合：OQ/PQ前后应进行仪器校准与日常保养，消除设备状态变量。

3. 多学科协同：项目涉及工程、质量、应用等团队协作，确保技术要求与用户需求充分对接。

4. 持续改进：把OQ/PQ中发现的问题及优化措施纳入质量改进体系，形成闭环管理。