一、编写目的与适用范围
目的
明确 150i 型 CO₂ 培养箱校准的基本流程、操作要求和记录方式。
确保培养箱温度、CO₂ 浓度及湿度的准确度和稳定性，满足细胞培养和生物实验的质量控制要求。
适用范围
适用于实验室采购或自有的 Thermo Scientific 150i 系列 CO₂ 培养箱。
适用于运行前校准、定期校准、维护后校准及质量体系审核等多种场景。
二、术语与定义
校准（Calibration）：将培养箱输出参数与参考标准进行比对并调整的过程。
可溯源标准：经国家计量机构认证的温度计、CO₂ 测量仪和湿度传感器。
准确度：测量值与真实值之间的接近程度。
均匀性：培养箱不同位置参数的一致性。
稳定性：在一定时间内参数波动范围。
三、职责分工
| 职能 | 角色 | 主要职责 |
|---|---|---|
| 质量管理部门 | 质量负责人 | 定制 SOP，监督执行，审核校准记录，定期评审。 |
| 仪器管理员 | 校准执行者 | 按 SOP 执行校准，填写校准报告与维护台账，维护校准设备。 |
| 实验室主管 | 使用监控人员 | 确保按周期进行校准，及时处理校准异常及设备故障。 |
| 第三方服务机构（可选） | 校准验证者 | 提供可溯源标准设备，完成专项比对与验证。 |
四、校准周期与档案管理
校准周期
首次校准：设备安装调试完成后进行。
定期校准：建议 6 个月校准一次，或根据实验室质量体系要求执行。
再校准：维修、搬迁或出现报警故障后需重新校准。
档案管理
校准记录包括：校准报告、设备标识、标准装置证书、校准人员签名及审核意见。
校准报告保存期限不少于 5 年，并归档至质量管理系统。
五、校准设备与材料
标准温度计
可溯源铂电阻温度计（Pt100 或等效）。
精度等级 0.1℃ 或更高。
CO₂ 浓度分析仪
NDIR（非色散红外）或电化学式，精度 ±0.1% CO₂。
配备独立气源或取样管路。
湿度传感器
露点仪或相对湿度计，精度 ±2% RH。
辅助工具及消耗品
标准电缆、取样管、密封圈、无纤维擦拭布、乙醇、记录表格。
六、校准前准备
环境检查
实验室温度 20–25℃，相对湿度 30–60%。
无强电磁干扰、振动源或气流直吹。
设备预热
培养箱断电 10 分钟后恢复供电，空载运行 ≥2 小时，使温度、CO₂ 和湿度稳定。
文件核对
确认校准仪器证书在有效期内；
核对校准表格与批次设备编号。
七、校准步骤
1. 温度校准
点位布置
在箱体中心、四角及门侧中点共 7 个位置均匀放置标准温度计感温探头。
设定温度
按照用户需求或校准规范依次设定 37℃、25℃、4℃ 或其他温度梯度。
稳定确认
每个设定点达到稳态（温度波动 ≤±0.2℃ 且持续 30 分钟）后记录各点读数。
计算平均值、最大偏差和均匀性（最大差值），并与设定值比较。
调整与验证
若偏差超出允许范围（典型 ±0.5℃），按说明书调整 PID 参数，重复上述步骤直至满足。
2. CO₂ 校准
取样方式
通过无纤维取样管将箱内气体引至 CO₂ 分析仪；确保管路密闭，无外界气体干扰。
设定浓度
依次设定 5%、10%（用户需求可选 3%–20%）；
稳态确认
CO₂ 稳定（波动 ≤±0.1% 且持续 20 分钟）后，记录分析仪读数。
偏差评估
计算误差（分析仪读数与设定值之差），若超出 ±0.2% CO₂，则需调节流量控制器或校准 MFC。
重复验证
调整后复测直至符合规范。
3. 湿度校准（可选/根据标准）
采样布点
在门侧中、高、低位置及箱体中心安装湿度传感器。
测量设定
在 60%、80% RH 或用户预设湿度条件下等候稳态（波动 ≤±3% RH 且持续 30 分钟）；
结果分析
记录各点读数，计算平均值及最大差异；若偏差超出 ±5% RH，检查水盘水位及湿化系统。
八、校准结果处理与报告
数据整理
将温度、CO₂、湿度数据录入标准表格，并计算偏差、均匀性和稳定性指标。
合格判定
对照《培养箱校准规范》或用户协议中规定的允许偏差；
对于不合格项，出具不符合项报告并附整改意见。
报告编制
内容包括：设备编号、校准日期、校准人员、使用标准、校准数据、结果评价及签字。
审核与存档
质量负责人审核签字后，归档至校准档案柜或电子管理系统。
九、风险识别与控制措施
| 风险项 | 可能后果 | 预防与控制 |
|---|---|---|
| 标准仪器精度失效 | 校准数据失真，导致设备长期误差累积 | 严格执行仪器年检与校准证书管理，过期不得使用 |
| 培养箱未预热或未稳态 | 读数不稳定、校准结果不准确 | 预热时间≥2h，实时监测波动范围，确认稳态后再进行校准 |
| 取样管路漏气 | CO₂ 校准误差大或读数偏低 | 检查管路密封性，采用快装接头及定期更换密封件 |
| 湿化器水质或水位异常 | 湿度偏低或波动大 | 使用蒸馏水或去离子水，按周期更换水并保持水位在推荐范围 |
| 人为记录错误或疏漏 | 校准档案缺失或数据错误 | 表格填写规范化，双人交叉验对，电子系统自动校验数据完整性 |
十、附件与表单
校准记录表（示例）
设备编号、校准人员、校准日期、各点读数、偏差值、调整记录、结果判定、签名。
不符合项报告表
描述不符合项、整改措施、整改完成验证及签名。
仪器清单与证书复印件
标准仪器型号、编号、证书编号与有效期。
总结：
编写 150i CO₂ 培养箱校准 SOP 时，应围绕“目的明确、职责清晰、方法标准、记录完整、风险可控”五大原则展开，既要突出操作步骤的细化与可执行性，又需兼顾校准结果的可溯源性和管理闭环，确保培养箱在日常使用中能够持续、稳定地满足细胞培养及相关实验的质量要求。
