一、目的与适用范围

1.1 目的
规范Heracell 150i培养箱在化学试剂或生物样品泄漏事故发生时的应急流程，快速、安全、有效地遏制污染，保障人员健康与实验室环境安全。

1.2 适用范围
适用于科研、生技及生产环境中使用Heracell 150i CO₂培养箱时，因培养箱内误操作、设备故障或意外跌落等原因导致化学品（如染料、试剂、强酸强碱、腐蚀性溶液）或生物样品（细胞、病原微生物、转基因物质）泄漏的应急处置。

二、职责与分工

三、事故预防与提前准备

1. 风险评估：

• 定期对应实验室所用化学/生物试剂进行危害分级，并将高风险物质纳入重点监控。

2. 应急物资配置：

• 个人防护：一次性防化服、N95口罩或三级防护口罩、面罩、耐化学手套、PVC鞋套；

• 泄漏处置包：吸附棉、固化剂（for acid/base）、消毒剂（70%乙醇、0.5% 次氯酸钠）、生物灭活液、封闭袋、标识带；

• 专用工具：不锈钢铲、一次性吸液器、长柄刷、塑料托盘、清洁抹布；

• 废弃容器：标记清晰的危险废物桶（黄色塑料桶）、双层封口袋、耐腐蚀箱。

3. 培训与演练：

• 每半年对应急处置流程进行一次全员演练，重点演练培养箱门打开、样品取出、事故隔离、污染物清理与废弃物转运。

4. SOP 和应急卡：

• 在培养箱附近张贴简易流程卡，包含“一键断电/断气—紧急门锁—告警报告—隔离清理—记录归档”五步要点。

四、泄漏事故处置总流程

mermaid复制编辑flowchart TD
    A[发现泄漏] --> B{是否有人受伤？}
    B -- 是 --> C[紧急救护→送医]
    B -- 否 --> D[启动应急响应]
    D --> E[现场隔离与报警]
    E --> F[断电断气、关闭培养箱]
    F --> G[穿戴PPE→初步清理]
    G --> H[吸附/固化/灭活]
    H --> I[表面擦拭与消毒]
    I --> J[废物收集与转运]
    J --> K[环境监测→确认达标]
    K --> L[恢复运行→事故总结]

五、详细处置步骤

5.1 事故发现与初步响应

1. 发现泄漏

• 振荡或温控过程中，发现培养箱内液体渗出、滴漏或飞溅；或开门时样品破损。

2. 人员安全

• 若有人员接触污染物，应立即脱离现场并按照《实验室受伤与暴露应急》流程执行；

• 及时向应急总指挥或值班安全员报告，并启动实验室事故应急预案。

3. 紧急隔离

• 现场首发人员佩戴口罩，快速关门上锁，切断培养箱电源与外部气源接口；

• 在培养箱周边用警示带或警示锥进行区域隔离，避免无关人员进入。

5.2 现场清理与污染物处理

1. PPE 穿戴

• 应急响应组全员按三级防护标准：防化服、面罩、口罩、手套及鞋套。

2. 大体清理

• 对于液体泄漏，使用吸附棉或吸液垫吸干表层液体；

• 对于固体或颗粒，使用不锈钢铲轻扫至塑料托盘。

3. 化学品固化

• 酸碱类或有机溶剂：撒布固化剂，待充分反应成固体后以铲子转入危险废物桶；

• 强腐蚀性试剂：先局部中和（如碱中和酸），再进行固化与收集。

4. 生物样品灭活

• 细胞悬液或微生物：先喷洒0.5% 次氯酸钠灭活液，作用≥30 min；

• 经灭活后用一次性吸液器回收，再用70% 乙醇二次擦拭。

5. 表面消毒

• 用长柄刷蘸次氯酸钠或75% 乙醇，对箱内壁、托盘、盖板、密封圈等全面擦拭；

• 对所有可拆部件浸泡消毒液≥30 min，再用生理盐水冲净，晾干后复位。

6. 通风与干燥

• 打开培养箱内循环风扇与室内排风扇，使腔内与房间空气充分交换；

• 确保内部湿度降低至常态后关闭风扇，待完全干燥。

5.3 废弃物收集与转运

1. 分类包装

• 化学固化物与吸附材料归入“危险化学品废物”；

• 灭活后生物残渣、抹布、手套归入“生物危险废物”；

• 封袋后在外部贴上“化学品泄漏废物”或“生物样品废物”标签。

2. 临时储存

• 将废物桶放置在有二级围挡的危险废物暂存间；

• 保持暂存间通风、避光、防潮。

3. 转运处置

• 安排有资质的第三方危险废物公司按规范转运、焚烧或集中处理；

• 对生物废物参照《病原微生物实验室生物安全手册》送高压灭菌后集中销毁。

5.4 环境监测与确认

1. 二次监测

• 等候≥1 h 后，使用ATP荧光或其他快速检测方法对培养箱内壁和地面进行卫生监测；

• 对环境空气采样，检测残留化学溶剂或微生物含量。

2. 判定标准

• 化学残留符合《实验室空气与表面化学残留限值》标准；

• 生物指标为＜10³ CFU/m³ 或ATP＜30 RLU。

3. 结果记录

• 将监测结果填写《泄漏事故环境监测报告单》，签字归档。

5.5 恢复运行与事故总结

1. 功能验证

• 经清洁消毒后，仪器管理员应空载运行37 °C、5% CO₂持续4 h，确认箱内温度与CO₂浓度稳定；

• 检查报警、门锁、风扇及触摸屏功能是否正常。

2. 实验恢复

• 仅在验证通过后，方可恢复正常实验操作；

• 恢复实验前应告知全体用户，并更新培养箱使用日志。

3. 事故记录与评估

• 编写《事故调查报告》，内容包括事故原因分析、应急措施、监测数据及改进建议；

• 组织一次事故评审会，确定预防措施并落实到位；

• 更新风险评估与SOP，必要时进行再培训。

六、培训与演练

1. 定期培训

• 每季度对新进人员进行培养箱泄漏应急培训，重点讲解PPE穿戴、化学/生物灭活及废物分类；

• 每半年邀请第三方安全专家进行复审与技术指导。

2. 演练考核

• 现场模拟化学或生物泄漏事故，演练全过程并计时，评估响应速度与处理质量；

• 演练结束后填写《应急演练评价表》，并对发现的问题进行整改。

七、附录

1. 应急物资清单

2. 泄漏事故报告表样本

3. 环境监测报告表样本

4. 危险废物交接单样本