一、目的与适用范围

为避免不同实验批次之间的交叉污染，保持培养箱内环境洁净、稳定，特制定本清空流程。适用于赛默飞CO₂培养箱150i在细胞培养、组织培养等实验中完成一批样品取出后，进行腔体及配件彻底清空、清洁、消毒，并恢复至下一批次使用前状态的全过程。

二、职责分工

• 实验室负责人：审批清空计划，监督执行；

• 维护工程师：提供技术支持，确保设备状态符合要求；

• 操作人员：严格按照流程完成清空、清洁与记录；

• 质量管理员：对清空结果进行验收并归档。

三、清空前准备

1. 人员防护

• 穿戴实验服、无尘罩衣、一次性手套、口罩；

• 配备防护眼镜或面罩，防止化学消毒液飞溅。

2. 设备断电与隔离

• 在控制面板选择“停机”，待箱内温度自然降至室温后解除加热状态；

• 关闭CO₂气瓶阀门并启动“气路排空”程序，确保管路无残余气压；

• 断开主电源线，并在插座处张贴“维护中禁止合闸”警示牌；

• 挂锁培养箱门，防止他人误开门操作。

3. 物料与工具准备

• 消毒液：75%医用酒精、0.1%次氯酸钠、70%异丙醇；

• 清洁用品：无纺布、脱脂棉球、软毛刷；

• 配件容器：灭菌塑料盒或托盘，用于短期存放取下的配件；

• 记录表格：《培养箱清空记录表》；

• 辅助用品：干燥剂包、塑料封袋、标签和记号笔。

四、样品及配件拆卸

1. 样品取出

• 铲除所有培养板或培养皿，轻拿轻放，避免震动；

• 若有冻存盒、移液管等附属器皿，亦一并取出；

• 将已培养样品按生物安全规定转移至指定废弃或保存区域。

2. 托架与加湿盘拆除

• 打开箱门，取下上、中、下三层不锈钢托架，置于消毒托盘内；

• 取出加湿托盘，倒净残余蒸馏水，用无纺布吸干并放入托盘；

• 对UVC消毒模块（若配置）轻轻取下，避免刮伤灯管。

3. 传感器与内部附件

• 如设备配有可拆卸的温湿度传感器、CO₂探头，应按照说明书指示小心拆卸，并置于防静电托盘中；

• 拆除气路过滤器和供气管道上的滤芯组件，用标签标明拆卸位置。

五、腔体内壁清洁与消毒

1. 初步清洁

• 用预先浸湿中性清洁剂的无纺布，沿箱壁从上至下、从里向外方向擦拭；

• 对角线顺序分区清洁，确保每个平面均匀处理；

• 重点清理箱门密封条凹槽、观察窗边缘及风道出风口。

2. 二次消毒

• 采用0.1%次氯酸钠溶液进行喷雾式消毒，作用5分钟；

• 再以75%医用酒精或70%异丙醇彻底擦拭一遍，去除残余氯离子并二次杀菌；

• 对于UVC舱线灯管意外污染处，可在断电状态下短时开启UVC消毒（遵守厂家推荐时间）。

3. 水迹与化学残留去除

• 消毒后立即使用干净脱脂棉或无纺布擦拭，确保箱内无水滴或消毒剂残留；

• 检查并用软毛刷清除风机叶轮及风道内可见的灰尘。

六、配件清洗、消毒与烘干

1. 不锈钢托架与加湿盘

• 在洗消槽中用温水和中性洗涤液浸泡10分钟，使用软刷轻刷表面和凹槽；

• 冲洗干净后放置于无尘烘干柜中以60 ℃烘干2小时；

• 烘干后转入含有干燥剂的灭菌托盘内，覆盖无尘布防尘。

2. 传感器及电子附件

• 用75%医用酒精蘸取脱脂棉，轻拭传感器探头表面及连接插头；

• 自然晾干或以洁净压缩空气吹干，切勿使用高温烘干；

• 置于防静电托盘，并覆盖无尘布。

3. 密封圈与O型圈

• 用70%异丙醇擦拭，并检查有无裂纹、变形；

• 如损伤应及时更换，新密封圈可在同消毒柜内与托架一同烘干。

七、内部干燥与环境维护

1. 自然通风干燥

• 在箱门保持微开状态（5–10 mm），放置1–2包硅胶干燥剂；

• 维持通风状态24–48 小时，辅助箱内水分挥发。

2. 加热干燥程序

• 启动“烘干”功能（若150i支持），设定60 ℃运行2–4 小时；

• 干燥结束后关闭加热，待腔体自然降至室温；

3. 滤网与风道维护

• 同时检查进风口HEPA滤网，用洁净压缩空气吹走表面灰尘；

• 如滤网脏污过重，应按照厂家要求更换或送厂清洗。

八、复位与质量验收

1. 配件复位

• 将已烘干并灭菌的托架、加湿盘、风机滤网装回原位；

• 安装传感器、滤芯及其支架，按照拆卸标签正确定位；

• 固定所有螺丝与卡扣，检查无松动。

2. 环境自检

• 通电后设置箱内温度25 ℃、CO₂浓度5%，湿度循环关闭；

• 运行30分钟，确认箱内无异常异味、噪音或水汽凝结；

• 用校准温湿度计和CO₂分析仪分别在箱内中央及四角测量，确认参数稳定在±0.5 ℃、±0.5% CO₂ 范围内。

3. 记录与签字

• 完成《培养箱清空记录表》，记录清空日期、操作人员、消毒液批号及过程耗时；

• 由操作人员、维护工程师和质量管理员签字确认，电子档与纸质档双重存档。

九、日常维护与预防

1. 定期小清

• 每批样品更换后均应按上述流程执行简化版（仅托架与内壁擦拭消毒）；

• 每月进行一次全面清空，以防长期微污染。

2. 环境监测

• 建议在培养箱内放置菌落指示板或被动采样过滤器，定期监测微生物水平；

• 对于关键实验或无菌培养，增加UVC或循环紫外曝照。

3. 培训与优化

• 定期培训操作人员，更新消毒体系与新型环保消毒剂；

• 结合实验室使用频率与污染风险，动态调整清空周期与深度。

十、结语

通过上述系统、规范的换批清空流程，不仅能够彻底清除前一批次样品残留与微生物污染，还能在最短时间内恢复赛默飞CO₂培养箱150i的洁净状态，保障下一批次细胞或组织培养的实验质量和安全性。建议各实验室根据自身实际使用频率与污染风险，持续优化流程细节，形成完善的操作SOP，不断提升培养环境管理水平。