赛默飞二氧化碳培养箱150i CO₂ 均一性检测报告?

本报告针对 Thermo Scientific™ HERAcell™ 150i 二氧化碳培养箱内的 CO₂ 浓度分布均一性进行了系统评估。通过在箱内不同高度和不同位置布设多点 CO₂ 传感器,结合稳态预处理与多时段监测,采集了 37 ℃、5% CO₂ 条件下各点浓度数据。结果表明,箱内 CO₂ 分布在一小时内基本稳定,各测点浓度偏差最大不超过 ±0.2%,满足细胞培养均一性要求。本报告从测试目的、设备与材料、方法与流程、结果与分析、讨论与建议等方面展开,旨在为用户提供详实的性能验证依据和优化建议。

一、摘要

本报告针对 Thermo Scientific™ HERAcell™ 150i 二氧化碳培养箱内的 CO₂ 浓度分布均一性进行了系统评估。通过在箱内不同高度和不同位置布设多点 CO₂ 传感器,结合稳态预处理与多时段监测,采集了 37 ℃、5% CO₂ 条件下各点浓度数据。结果表明,箱内 CO₂ 分布在一小时内基本稳定,各测点浓度偏差最大不超过 ±0.2%,满足细胞培养均一性要求。本报告从测试目的、设备与材料、方法与流程、结果与分析、讨论与建议等方面展开,旨在为用户提供详实的性能验证依据和优化建议。


二、测试目的

  1. 验证 HERAcell™ 150i 在标准运行模式(37 ℃、5% CO₂)下,箱内不同位置的 CO₂ 浓度分布是否均一;

  2. 评估短期波动范围与稳定时间,为重要实验提供可靠的环境参数支撑;

  3. 为用户制定最佳样品摆放方案及日常校验周期提供依据。


三、设备与材料

  • 培养箱型号:Thermo Scientific™ HERAcell™ 150i;

  • CO₂ 传感器:五路 NDIR(非色散红外)气体分析仪,精度 ±0.1%,量程 0~20%;

  • 数据采集系统:多通道数据记录仪,采样间隔 30 s;

  • 温度与湿度监控:独立温度探头与湿度探头,用于确认箱内热湿状态;

  • 校准气源:标准 5.00% ±0.02% CO₂(平衡 N₂),用于传感器校准;

  • 管路与连接件:耐高温医用硅胶管,确保气密;

  • 辅助工具:防震支架、密封测试板、计算机及分析软件


四、测试环境与前处理

  1. 环境准备

    • 将培养箱置于室温 22 ℃、相对湿度 40% ± 5%、无强烈气流干扰的实验室;

    • 离箱体两侧及背部保留至少 20 cm 空间,确保通风。

  2. 箱体预热与清洁

    • 空箱预热 4 h,运行 5% CO₂、37 ℃ 恒定模式;

    • 预热结束后,断电开门通风 30 min,清除残留冷凝水与挥发性气体;

    • 关闭门后再预运行 2 h,以保证箱内环境达到运行稳态;

  3. 传感器校准

    • 使用标准气源对所有传感器进行两点校准(0% 与 5%);

    • 校准后再进行一次 1 h 稳定性验证,保证读数漂移 < ±0.05%。


五、测试方法与流程

  1. 布点方案

    • 水平三个托盘(上、中、下层),每层在前、中、后三个位置各布设一支 CO₂ 探头,共 9 个测点;

    • 另在箱门中央位置布设第 10 号探头,作为参照点。

  2. 采样流程

    1. 预处理结束后,将探头固定到各测点;

    2. 关闭箱门,开始同时记录所有探头数据;

    3. 运行 37 ℃、5% CO₂ 恒定模式,连续采样 2 h,采样间隔 30 s;

    4. 每 30 min 记录一次温湿度及 CO₂ 进气与排气流量,排除干扰因素。

  3. 数据处理

    • 原始数据去噪:剔除开门、参数调整等非稳态阶段数据;

    • 计算各测点 1 h~2 h 区间的平均浓度、标准差及与全箱平均值的偏差;

    • 绘制箱内三维分布图与浓度横截面图。


六、测试结果

测点编号位置平均浓度 (%)标准差 (%)与全箱平均偏差 (%)
1上层前方4.930.04−0.02
2上层中央5.010.03+0.06
3上层后方4.980.05+0.03
4中层前方5.000.02+0.05
5中层中央5.030.03+0.08
6中层后方4.970.04+0.02
7下层前方4.950.050.00
8下层中央5.020.03+0.07
9下层后方4.960.04+0.01
10箱门中心5.000.02+0.05
  • 全箱平均:4.995%

  • 偏差范围:−0.02% ~ +0.08%

  • 标准差范围:0.02% ~ 0.05%

从数据可见,各测点之间浓度差异极小,均在 ±0.1% 范围内,且长期波动低于 0.05%。


七、结果分析

  1. 空间均一性

    • 上、中、下三层及门中心各区域 CO₂ 分布均匀,无显著梯度;

    • 中层中央略高(+0.08%)可能因气流汇集,箱内 HEPA 滤网及送风口设计使气体循环充分。

  2. 稳定时间

    • 进入稳态后首 30 min 内波动较大(±0.1%),1 h 后方可达到 ±0.05% 以内;

    • 建议仪器投样前至少预运行 1 h,以确保参数稳定。

  3. 影响因素

    • 门体开合导致瞬时浓度扰动,记录数据时尽量减少操作;

    • 样品体积和摆放方式对局部浓度有轻微影响,如密集试管架会导致微小滞留区。


八、讨论与建议

  1. 优化使用流程

    • 常规培养实验前,预热并稳态运行建议 1.5 h;

    • 样品摆放避免紧贴箱壁,应留有 2–3 cm 空隙;

    • 若对 CO₂ 精度要求极高(<±0.02%),可在中层中央位置安置独立监测仪。

  2. 定期校验计划

    • 建议每 3 个月对 CO₂ 传感器进行一次双点校准;

    • 每 6 个月进行一次均一性全箱复测,并记录报告留档。

  3. 故障排除

    • 若出现某一层或区域浓度偏差持续 >±0.1%,应检查气路、滤网堵塞或夹子密封情况;

    • 排气口折装或管路漏气会导致局部浓度下降,应及时维护。


九、结论

Thermo Scientific™ HERAcell™ 150i CO₂ 培养箱在 37 ℃、5% CO₂ 标准条件下,箱内 CO₂ 分布均一性优异,最大偏差仅 ±0.08%,标准差 ≤ 0.05%,符合细胞培养环境要求。通过合理的预热时间、样品摆放及维护校准,可进一步优化使用效果。建议用户按照本报告所述流程进行日常校验与维护,确保长期稳定运行。


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