ABI PCR仪简介
ABI PCR仪简介
一、什么是ABI PCR仪？
ABI PCR仪是由美国Applied Biosystems（现为赛默飞世尔科技的一部分）开发的一系列聚合酶链式反应（PCR）仪器，广泛应用于基因扩增、分子生物学研究和医学诊断领域。它因其高精度、稳定性和易操作性而成为PCR行业的领先品牌，尤其以实时荧光定量PCR仪（如QuantStudio系列）享有盛誉。
二、常见ABI PCR仪型号
ABI 7500/7500 Fast Real-Time PCR系统
支持SYBR Green染料法和TaqMan探针法。
快速模式下可完成30分钟PCR实验。
高灵敏度，适合定量基因表达和突变检测。
用途：实时荧光定量PCR检测。
特点：
ABI 7900HT Real-Time PCR系统
支持96孔和384孔板格式。
配备自动化选项，适合高通量研究和大规模筛查。
用途：高通量实时定量PCR。
特点：
ABI Veriti Thermal Cycler
具备梯度功能，优化退火温度。
灵活的温控模块，适合多种PCR应用。
用途：传统PCR反应。
特点：
QuantStudio系列
智能化界面，支持云端数据管理。
高通量、多通道，适合复杂实验设计。
QuantStudio 3/5：科研级，适合中小型实验室。
QuantStudio 7 Pro/12K Flex：支持高通量、多功能检测，适合大规模实验。
用途：最新一代实时荧光定量PCR。
常见型号：
特点：
三、主要功能特点
ABI PCR仪采用高精度热循环模块，温度波动小于±0.1°C，确保扩增一致性。
荧光检测技术
实时PCR仪配备高灵敏荧光检测系统，支持多通道检测，用于基因表达、基因分型和绝对定量分析。
快速模式
部分型号（如ABI 7500 Fast）支持快速模式，在30分钟内完成PCR扩增。
高通量
支持96孔、384孔板和TaqMan Array卡，适合高通量基因分析。
用户友好界面
配套软件界面简洁，易于设置和分析数据，支持标准曲线分析、Ct值计算、熔解曲线分析等。
智能化和自动化
QuantStudio系列支持智能化实验设计和云端数据共享，适应现代实验室数字化需求。
四、ABI PCR仪的应用
医学诊断
病原体检测：如新冠病毒、流感病毒、细菌感染。
遗传病筛查：检测基因突变、拷贝数变异。
癌症研究：分析肿瘤标志物、突变热点。
基因表达研究
定量分析mRNA和非编码RNA的表达水平。
基因分型
SNP分析、多态性研究、基因编辑验证。
食品安全
转基因食品检测、病原微生物检测。
微生物污染监控、水体和土壤病原体分析。
五、ABI PCR仪的操作步骤（以ABI 7500为例）
样品准备
提取目标核酸（DNA或RNA）。
配置PCR反应体系，包括模板、引物、探针（或染料）、酶和反应缓冲液。
装载样品
将反应体系分装至96孔板或反应管中。
用光学封板膜密封，防止蒸发。
仪器启动与参数设置
设置PCR程序：包括变性、退火、延伸的温度和时间。
定义荧光检测通道（如FAM、HEX）。
选择标准曲线或相对定量分析。
打开ABI 7500，启动配套软件。
新建实验：
将反应板放入仪器样品槽中，确保位置正确。
运行实验
点击“开始实验”，仪器自动运行并实时记录荧光信号。
结果分析
查看扩增曲线和Ct值。
对标准曲线、熔解曲线进行分析，验证实验特异性和扩增效率。
数据导出
保存实验数据并导出为PDF或Excel文件，用于进一步分析或报告。
六、ABI PCR仪的优势
精度与可靠性
温控精确，荧光检测灵敏，确保实验结果高度一致。
广泛适用性
适合多种实验需求，从基因扩增到高通量筛查。
用户友好
界面简洁，操作便捷，实验设计模块化。
数据分析强大
配套软件功能齐全，支持多种定量和分型分析。
品牌信誉
Applied Biosystems长期专注于PCR技术，是分子生物学领域的领导品牌。
七、常见问题及解决方案
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 扩增无条带 | 模板浓度过低或引物设计问题 | 检查模板质量，提高浓度，优化引物设计 |
| 荧光信号弱 | 探针或染料降解，反应条件不佳 | 使用新试剂，优化退火温度和时间 |
| 熔解曲线异常 | 非特异性扩增或引物二聚体 | 调整引物浓度，优化退火温度 |
| 样品蒸发 | 反应管密封不良 | 确保封板膜完全密封 |
八、维护与保养
清洁
定期清洁样品槽和仪器外部，防止污染。
校准
定期校准光学检测系统和温控模块。
软件更新
检查并安装最新版本的软件，确保功能完整。
光源检查
定期检测荧光光源的性能，必要时更换。
九、总结
ABI PCR仪以其卓越的性能和丰富的功能，成为分子生物学研究和诊断领域的首选仪器。无论是实时定量PCR还是传统PCR实验，ABI PCR仪都能以高灵敏度和高精度满足实验需求。通过正确操作和定期维护，ABI PCR仪将为科研和临床提供可靠的技术支持。
