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低速离心机尿液检查是否用离心?

尿液检查是临床检验中最常见、最基础的项目之一,通过对尿液外观、化学成分和沉渣形态的综合分析,可反映机体代谢、肾脏功能及泌尿系统状态。在众多检测方法中,离心法是制备尿沉渣的关键步骤之一,而“低速离心”因其温和、安全、成本低、操作简便等特点,成为实验室常用手段。本文将从原理机制、应用价值、操作规范、离心参数、注意事项、质量控制、结果判读、设备维护与实际案例等九个方面,全面阐述低速离心机在尿液检查中的适用性与具体实施

一、低速离心法原理及作用
离心分离技术基于离心力对不同密度颗粒的分离作用。将尿液样本置于离心管内,旋转过程中离心力推动较重的沉渣(如红细胞、白细胞、管型、细菌和晶体等)沿管壁向管底沉降,而上清液则保留悬浮度较低的溶解物质和小分子成分。低速离心一般指相对离心力(RCF)在200–1 000 ×g,对应转速在1 000–3 000 rpm之间,其离心力足以沉降大多数尿沉渣成分,却不会因过高离心力产生沉淀结构破坏或细胞形态畸变,从而保证形态学观察的真实性。

二、低速离心在尿液检查中的应用价值

  1. 保真性高:低速离心力温和,能最大程度保持红细胞、白细胞和管型等微观结构完整,便于镜检下准确计数与形态学评估。

  2. 操作简便:与高速或超速离心相比,设备门槛较低,无需高性能密封转子和复杂冷却系统,适合基层医院与检验室常规使用。

  3. 样本适用范围广:对一般生理盐浓度的尿液、轻度浑浊或轻度蛋白尿样本均能获得清晰沉渣,配合显微镜或自动化尿沉渣分析仪效果良好。

  4. 成本效益好:离心管和试剂成本低廉,能满足大批量样本的快速预处理需求,尤其在体检中心及社区卫生机构具有明显优势。

三、尿液沉渣制备的标准操作流程

  1. 样本采集与预处理

    • 首选晨尿或中段尿,新鲜标本应在采集后1小时内处理;若需延时,可在4 °C冰箱内短暂保存,最长不超过4小时。

    • 轻度浑浊样本可先行过滤或静置5–10分钟,让悬浮大颗粒自然沉降,再取上清进行离心;高度混浊或含大片块时,应先予以纱布或40 μm滤网粗滤。

  2. 离心管装载

    • 取10–15 mL塑料或玻璃离心管,标记患者信息;将8–10 mL尿液缓慢注入,避免产生气泡或急剧搅动引发沉淀物析出。

  3. 离心操作

    • 将装有尿液的离心管放置于离心机转子上,严格对称配对放置,以免失衡;

    • 设定转速:一般取1 500 rpm(约200–300 ×g)离心5分钟;若样本中细胞含量较低,可适当提高至2 000 rpm(约400–500 ×g)或延长时间至10分钟。

    • 启动离心后,静待程序完成,严禁打开盖门,否则易扰动已沉降的沉渣。

  4. 弃上清与重悬

    • 结束后轻轻取出离心管,小心倾倒上清液至废液容器,留存约0.5 mL沉渣;

    • 用移液管或吸头轻轻吹打沉渣,使其均匀悬浮于底部剩余液中;

    • 将重悬液滴片于载玻片,盖上盖玻片,准备镜检。

四、离心参数优化与常见变通

  1. 离心力与时间的平衡

    • 对于红细胞、白细胞及上皮细胞,RCF = 200–400 ×g、5分钟即可满足;对于细菌、精子或较细管型,可适当提高至RCF = 500–800 ×g,但一般不超过1 000 ×g,以免沉渣压实影响观察。

  2. 样本粘度与稀释

    • 对于高比重、浓缩尿或含多量蛋白样本,可先以生理盐水按1:1或1:2稀释,以降低粘度、提高离心效率;

    • 稀释后要考虑稀释倍数对计数结果的校正。

  3. 冷却与温度控制

    • 常温离心(室温20–25 °C)适用于绝大多数常规尿液;若需保留酶学活性或敏感成分,可使用风冷或制冷离心机,将温度设置在4–10 °C。

  4. 转子类型与管材选择

    • 使用固定角度转子能快速沉降颗粒,上清较为清澈;使用摆动转子可得到平整沉渣盘,便于扫描和定量,但操作耗时更长;

    • 塑料离心管耐腐蚀、成本低;玻璃管易清洗再用,但易摔破,应视实验室条件选用。

五、镜检与结果判读

  1. 红细胞(RBC)

    • 正常尿液红细胞≤3 /HP;离心法制备后若镜检到RBC成团、异形红细胞或红细胞管型,应警惕肾小球源性病损。

  2. 白细胞(WBC)

    • 正常值≤5 /HP;离心后可观察白细胞形态,若细胞碎片或细菌包裹在白细胞内,提示泌尿系统感染。

  3. 管型(Casts)

    • 玻璃管型、颗粒管型、蜡样管型等在离心后沉渣中易被识别,浓缩细胞成分与基质成分,临床意义重大。

  4. 上皮细胞、微生物与晶体

    • 扁平上皮、肾小管上皮及移行上皮在离心后分布于沉渣;各类结晶(草酸钙、磷酸钙、尿酸盐等)亦会随离心而沉积,便于观察。

六、常见问题与注意事项

  1. 沉渣损失与交叉污染

    • 弃上清时操作要稳妥,避免将沉渣误弃;重悬时要充分但轻柔,以免破坏细胞。工作台要定期消毒,离心管与吸头切勿混用。

  2. 离心机失衡与安全

    • 必须严格配对离心管,质量相差不得超过0.1 g;若发生失衡报警,应立即停止、打开检查并重新平衡。

  3. 样本时效与保存

    • 新鲜尿液最佳,若需延迟,尽量在4 °C保存并在4小时内完成;避免高温(>25 °C)放置,以免化学成分变化和细胞崩解。

  4. 管型易碎与脱落

    • 摆动转子制备管型效果更好,但操作时应尽量减少震动;玻片搬运要轻柔,防止管型脱落或断裂。

七、质量控制与标准化建设

  1. 内部质控

    • 定期选用标准细胞悬液(如固定人红细胞悬液、白细胞悬液)或人工管型混悬液进行离心制片、镜检,评估离心效率与镜检一致性。

  2. 外部质评

    • 参加临床实验室外部质量评价项目(如Cytology CAP Survey),对尿沉渣计数和形态辨识进行比对与反馈,不断优化流程。

  3. SOP与培训

    • 制定标准操作规程,明确样本采集、离心参数、弃上清技术、镜检方法及报告格式;定期培训与考核检验人员,确保方法统一。

八、设备维护与日常保养

  1. 清洁与消毒

    • 每次使用后,用中性洗涤剂和水彻底清洗转子槽及转子,定期用酒精棉擦拭内部组件;避免使用强酸强碱腐蚀性试剂。

  2. 润滑与校准

    • 根据厂商建议对轴承适时加注润滑脂;每半年或一年对转速和温控精度进行校准,确保离心力和温度准确。

  3. 维修与备件管理

    • 建立设备档案,记录维修保养日志;常备O形圈、离心管架和保险丝等易损配件,确保故障情况下可快速更换。

九、实践案例分享
案例一:社区卫生服务中心在大量体检样本处理中,将离心参数设为1 500 rpm、7分钟,制备尿沉渣后进行自动化镜检,平均单样本处理时间缩短20%,检测结果与高层医院对照误差<5%。
案例二:某三甲医院泌尿科为诊断微量组织细胞脱落病变,采用摆动转子、2 000 rpm、10分钟的离心方案,成功保留少量上皮细胞团块,辅助病理学进一步分析,诊断准确率提升15%。

结语
低速离心法在尿液检查中既是一项经典、必不可少的预处理步骤,也是保证沉渣形态学分析可靠性的关键环节。通过合理选择离心参数、规范操作流程、强化质量控制及设备维护,可最大程度地保留尿沉渣结构、提高检验效率与准确度。各级实验室应结合自身条件,建立完善的SOP与培训体系,充分发挥低速离心机在尿沉渣制备中的优势,为临床诊断提供坚实的数据支持。