一、低速离心机原理与分类
低速离心机（通常转速在数百至一万转/分钟，RCF 在数百至数千×g）主要用于较大颗粒或细胞级别的分离。其核心部件包括定子、转子、密封轴承和驱动电机，通过离心力使样本中的不同组分按密度分层。按功能分，有角转子式、水平转子式及专用收集头式。了解其工作原理及性能参数，是判断是否适合病理样本离心的前提。

二、病理样本类型与处理需求
病理样本多为组织块、细胞悬液、石蜡切片脱蜡后产物或血液、胸腹水等体液。不同样本对离心参数、温度保护、缓冲体系及操作流程有不同要求：

1. 组织块匀浆：需低速预离心去除大颗粒组织碎片；

2. 脱蜡切片水相提取：去除蜡屑，保持核酸或蛋白活性；

3. 细胞培养上清：分离细胞碎片与可溶性因子；

4. 生理体液：分离细胞成分与血浆/浆液。

三、低速离心机适用范围评估
对于上述样本，低速离心机能完成初步粗分：

• 组织碎片去除：300–1,000×g 离心 5–10 分钟，可有效沉降大颗粒；

• 细胞回收：500–2,000×g 离心 3–5 分钟，回收大多数细胞（如巨噬细胞、上皮细胞）；

• 玻片脱蜡液澄清：1,000×g 离心去悬浮蜡屑，减少下游污染。

但对于更精细的胞器分离（线粒体、核糖体）、亚细胞结构或超滤前处理，则需超速或梯度离心。因此，低速离心机多用于样本的预处理与粗分，不宜作为最终纯化手段。

四、离心前样本制备与保护措施

1. 预冷与稳温：病理样本分子敏感，离心前应将转子与离心管预冷至 4 ℃；

2. 缓冲体系选择：常用 PBS、HEPES 或含蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液，避免高盐、表面活性剂过量；

3. 去泡与分批装管：防止气泡导致样本不均匀受力；若体积过大，分多管离心；

4. 标记与编号：一对一对应病理编号与管号，避免样本混淆。

五、转速与时间参数优化
不同样本需根据大小与密度调整：

• 巨块组织与大细胞团：300–500×g、5–8 分钟；

• 普通上清与细胞碎片：800–1,000×g、5 分钟；

• 混悬液澄清：1,200–1,500×g、3–5 分钟。
  参数过低导致沉降不完全，过高会将目标成分意外沉降或破坏细胞结构。建议先行预实验，记录各参数对沉降效果的影响，再制定统一 SOP。

六、温度控制与样本活性维护
病理样本中的酶、蛋白、核酸极易受温度影响。低速离心多发生在 4 ℃ 环境：

• 离心仪制冷功能：合理设置目标温度，启停前达到平衡；

• 间歇操作：连续多次离心时，每次间隔取出转子查看温度，防止过热；

• 冷却支架与冰浴：放置离心管于冰上或保温盒中，进一步降低热损伤。

七、离心管材质与离心介质选择

1. 管材质：聚丙烯（PP）或聚苯乙烯（PS）管，耐低温、抗化学；对于需避光样本，可选棕色离心管；

2. 离心介质：纯缓冲液适用于大部分预处理，若需密度分层，可加入蔗糖、Percoll 等梯度；

3. 管填充体积：离心管不能装满，应留 10–20% 空间，防止旋转时液体溢出和气泡产生。

八、实验室操作规范与安全防护

• 个人防护：穿实验服、戴手套、护目镜或面罩，防止病理样本气溶胶或液体飞溅；

• 一次性耗材：尽量使用单次离心头与隔离帽，防止交叉污染；

• 废弃物处理：离心后样本残留管与缓冲液纳入生物危害废弃物管理；

• 仪器维护：定期校验转子平衡、检查密封圈与电机状态，保证安全锁、门盖联动正常。

九、临床与科研案例分析

1. 细胞免疫组化：科研中用低速离心 800×g 去除组织碎片，上清用于蛋白定量，成功提高抗体标记比率；

2. 临床血液样本：300×g 离心分离血浆用于代谢组学分析，平滑曲线背景干扰降低 30%；

3. 转化医学研究：对脱蜡切片提取核酸，低速离心去蜡后 PCR 扩增效率提高明显，产物完整度提升。

这些案例表明，合理利用低速离心对预处理与净化效果显著，但需结合下游需求与样本特性。

十、总结与建议
总体而言，低速离心机可作为病理样本的初级分离与粗净化工具，适合去除大颗粒组织碎片、细胞团及石蜡杂质，并为后续超速离心、梯度分离、色谱或分子检测提供预处理清洁样本。关键在于：

• 明确样本类型与分离目标，选择合适离心力与时间；

• 严格温控与缓冲条件，维护生物活性；

• 规范操作与安全管理，防止交叉污染与样本丢失；

• 结合案例与实验优化，不断完善 SOP。