一、引言

紫外分光光度计（UV-Vis Spectrophotometer）是一种常用于物质定量与定性分析的精密仪器，其测量精度直接依赖于光路的稳定与比色系统的清洁状态。样品池（或称比色池）作为光通过样品的唯一通道，其清洁度对于实验结果至关重要。

在日常使用中，样品池容易因残留样品、沉淀、微生物滋生、无机盐结晶等原因受到污染。这些污染不仅干扰光路，造成吸光度误差，还可能导致仪器误报警、基线不稳、重复性变差等问题。

本文将系统介绍紫外分光光度计样品池污染的识别方法、各种类型污染的清洗策略、常用清洗剂与工具、清洗流程、注意事项，以及如何建立有效的样品池维护制度，保障实验的准确性与仪器的长期稳定运行。

二、样品池的作用与结构概述

1. 样品池的功能

样品池用于放置比色皿或直接承载液体样品，是光束在穿透样品后到达检测器前的重要路径。其透光性、清洁程度、光轴对准情况将直接影响吸光度测量的准确性。

2. 常见样品池结构

• 固定式比色池：内置流通槽，用于自动进样或连续监测；

• 可更换比色架式：插入不同类型的比色皿（石英、玻璃、塑料）；

• 自动换样模块：带有机械臂控制的样品位。

样品池内部多为金属、塑料或石英材质构成，对强酸、强碱、有机溶剂等有不同的耐受性，因此清洗方法需区别对待。

三、样品池污染的主要来源与类型

样品池污染的形式多样，归纳起来主要有以下几类：

1. 样品残留

• 未及时清洗比色皿或进样针，残留液干结于池底或池壁；

• 常见于高浓度溶液、蛋白质样品、有机染料等。

2. 无机结晶污染

• 水样或溶液中含Ca²⁺、Mg²⁺、Na⁺等离子，在蒸发后形成白色结晶；

• 干扰光通过路径。

3. 微生物和藻类

• 在高温潮湿条件下，残留液体成为微生物培养基；

• 池壁出现黏液、绿色斑点或不明沉淀。

4. 油脂类附着

• 操作人员手部接触、乳状液样品、界面活性剂等；

• 形成半透明斑痕，极难直接冲洗。

5. 色素沉积

• 如高锰酸钾、墨汁、苯酚红等染色剂；

• 着色严重影响短波光的穿透。

四、污染识别与诊断方法

在实施清洗前，首先需确认污染程度和类型，可通过以下方法：

1. 肉眼观察

• 池内是否可见沉淀、斑点、膜状物、颜色；

• 是否有异味或浑浊感。

2. 空白扫描测试

• 使用纯水空白进行扫描；

• 若发现基线波动、非零吸光度、光强异常，可初步判断为污染。

3. 标准物检测

• 用重铬酸钾、KCl等标准溶液测试吸光度；

• 若数据偏离理论值，可能与池污染有关。

五、常用清洗方法分类与原理

针对不同类型污染，应采用相应的清洗方式。常用方法包括以下几类：

1. 水洗法（基础方法）

• 使用去离子水反复冲洗；

• 适用于新鲜污染、低粘度溶液残留。

2. 有机溶剂清洗法

• 使用乙醇、丙酮等；

• 清除油脂类、弱极性染料；

• 注意：塑料池不可用强溶剂。

3. 酸洗法

• 常用0.1–1 mol/L HCl或稀硝酸；

• 去除无机结晶和金属离子残留；

• 使用后必须彻底中和和清水冲洗。

4. 碱洗法

• 用0.1 mol/L NaOH溶液；

• 适合去除有机酸、蛋白残留等；

• 同样需清洗干净以防碱腐蚀。

5. 超声波辅助清洗

• 将样品池或比色皿置于超声波清洗器中；

• 利用微泡气泡震动剥离污染物；

• 时间控制在5–15分钟之间为宜。

6. 专用清洗液使用

• 市面上有专用比色皿清洗液（如酸性氧化剂混合物）；

• 适合严重污染清除。

六、清洗流程建议（标准操作步骤）

以下是一套推荐的标准清洗流程，适用于中等程度污染处理：

第一步：初步冲洗

• 使用大量去离子水冲洗样品池或比色皿内外表面；

• 尽量将残留样品带出。

第二步：判断污染类型

• 观察是否有结晶、颜色、粘液、沉积层等；

• 根据判断选择清洗剂。

第三步：选用清洗液

• 无机污染：使用0.1 mol/L HCl清洗；

• 有机污染：使用95%乙醇清洗；

• 生物污染：使用过氧化氢或漂白液稀释液。

第四步：浸泡处理

• 用所选清洗液填满样品池，静置10–30分钟；

• 对比色皿污染可置入超声波清洗器中处理。

第五步：多次清水冲洗

• 用大量蒸馏水冲洗至少5次；

• 检查pH恢复中性。

第六步：乙醇漂洗并干燥

• 用无水乙醇冲洗去除水分；

• 倒置干燥或自然晾干，避免使用纸巾擦拭。

七、不同材质样品池与比色皿的清洗注意事项

八、清洗过程中的常见误区

1. 使用纸巾擦干样品池

容易刮花表面，影响光路传输。

2. 浓酸长时间浸泡

高浓度酸易腐蚀池体材质，反而降低使用寿命。

3. 使用未中和清洗液

残留酸碱会继续腐蚀池体并干扰下次测量。

4. 倒置干燥位置不当

若倾斜不合理，残液可能沉积于池角形成二次污染。

九、清洁频率建议与维护制度建设

建议实验室建立《样品池维护记录表》，包括：

• 清洗日期；

• 使用清洗剂种类；

• 操作人签字；

• 池状态备注（如是否结垢、是否重新校准等）。

十、样品池污染预防建议

良好的使用习惯可以大大减少污染：

• 不用含颗粒、沉淀或乳液样品；

• 比色皿使用后立刻清洗；

• 控制样品浓度，避免高浓度吸附；

• 配置专用注射器、进样器避免交叉污染；

• 定期检测池内透光率，用空白扫描观察异常；

• 封闭样品池，减少尘埃和微生物进入。

十一、结语

样品池的清洁状况直接决定紫外分光光度计数据的可靠性，是影响分析误差、重复性和仪器状态的关键因素。建立科学的清洗方法和流程，不仅可以有效清除不同类型的污染，还能延长仪器部件寿命，减少故障频率。

通过本文提供的污染识别方法、清洗流程、注意事项和维护制度建设建议，实验室可在实际操作中实现标准化、规范化的样品池维护，保障检测工作的顺利开展。