一、为什么气泡在紫外分光光度计中特别“危险”

紫外分光光度计依靠固定光路和短光程对样品进行高精度检测。任何小的光学障碍物，都会因其放大效应对数据造成较大的干扰，而气泡正是最常见的隐性干扰源：

核心问题： 在紫外检测中，微米级气泡也可能导致明显偏差，特别是在低浓度分析、微光程比色池中更为明显。

二、气泡产生的主要环节

1. 溶液本身含气

• 高温配液后未冷却静置；

• 有机溶剂易吸附空气；

• 缓冲液高盐浓度时饱和度不稳。

2. 配液与稀释时卷入空气

• 快速移液操作；

• 枪头浸入深度不一致；

• 反复吸打造成涡流。

3. 上样过程产生气泡

• 微量平台未铺满液面；

• 手动移液冲击形成瞬间气泡。

4. 比色池结构问题

• 比色池划痕易附泡；

• 池内壁有残余杂质附着；

• 清洗不到位造成挂壁微泡。

5. 温度变化诱导析气

• 冷藏液快速上机，热平衡形成析气；

• 室温不稳，溶解度波动释放微泡。

三、避免气泡的核心原则：预防优先 + 侦测辅助 + 排泡保障

1. 预防优先：让气泡根本“生成不了”

A. 溶液脱气

B. 移液操作规范

• 反向移液法：吸过量，缓慢排液至目标体积；

• 控制吸液速度：避免涡流与气泡夹带；

• 稳定浸入深度：枪头入液 2-3 mm 最佳；

• 避免末端吹残：枪头末端残液勿强吹防止起泡。

C. 比色池准备规范

• 每次使用前彻底清洁、烘干或气流吹干；

• 池壁透明度检查确保无划痕与污渍；

• 上样前目测液面完整性。

D. 温度预平衡

• 所有试剂与样品提前 20-25 ℃ 静置 15 分钟；

• 比色池恒温平台保持温度一致；

• 避免冷热交替上机造成析气现象。

2. 侦测辅助：让气泡“暴露无遗”

A. 视觉检查

• 倾斜观察法：比色池倾斜 30-45°旋转检查；

• 放大镜辅助：识别贴壁微泡；

• 透光法：逆光检测气泡遮挡。

B. 仪器内置监测

• 部分高端紫外设备具备光程一致性检测模块，实时提示异常信号；

• 微量比色池具备液面检测系统，提示未满液、漂浮气泡状态。

C. 双波长对比法

• 主峰与参考波长吸光度比值突变时，可疑气泡干扰；

• 适合多组分或固定比值检测项目快速判别。

D. AI智能识别（新兴技术）

• 摄像+图像算法辅助识别微米级气泡；

• 实时生成气泡概率评分，提示是否需重测。

3. 排泡保障：气泡一旦形成，快速消除机制

A. 轻敲振动法

• 比色池上端轻敲 2-3 次；

• 可有效将粘壁微泡释放浮出液面。

B. 针尖导引法

• 微型移液枪头沿池壁轻点气泡边缘；

• 利用气液界面张力促泡缓慢爬升并消失。

C. 离心脱泡法

• 将样品移入离心管；

• 3000-5000 rpm 离心 1-2 分钟快速去泡。

D. 微流控预处理法（高级）

• 微通道流体控制自动剥离微泡；

• 适用于高通量自动化系统中批量样品排泡。

E. 真空脱泡仪

• 配备负压腔体整体抽真空处理；

• 适合大量溶液一次性排泡。

四、不同检测模式下的排泡敏感度差异

**结论：**光程越短 → 气泡影响越大 → 管控措施需越严格。

五、气泡对重复性与定量准确度的典型影响数据

六、将防泡策略固化入实验室SOP

样品前处理规范

• 脱气步骤标注；

• 温度平衡流程规范；

• 配液移液流程固定化。

操作检查清单

• 比色池上样检查项；

• 视觉观察合格打勾项；

• 排泡动作执行记录。

数据监控控制点

• 每批样品插入标准对照物；

• 吸光度差值监控RSD变化；

• 突变点二次确认重测机制。

七、气泡管理智能化的未来趋势

八、结语

气泡虽微小，却极易毁掉一组吸光度数据。真正控制好气泡，需把预防、识别、排除、记录贯穿紫外检测全过程。

• 先消灭可见气泡，再控制微泡；

• 先规范操作流程，再引入智能辅助；

• 先建立SOP标准，再考虑自动化升级。

只有当“无气泡”成为实验室操作的日常本能，紫外分光光度计的每一次吸光度读数，才真正可靠、稳定、重复。