一、为什么气泡在紫外分光光度计中尤为“致命”

紫外分光光度法以极高光学精度检测样品吸收，当溶液中存在气泡时，因光线被折射、散射、遮挡，会导致吸光度读数产生非线性误差。

即便是肉眼难以察觉的微米级气泡，在1cm光程下都可能引发**≥5%的吸光度偏差**，严重威胁数据重复性与准确性。

二、气泡形成的物理机制

核心概念：任何让气体由溶液进入气相的过程，都会埋下气泡干扰隐患。

三、气泡对紫外测量的影响路径

四、避免气泡的总体技术框架

复制编辑溶液准备 → 移液操作 → 比色池处理 → 上样技巧 → 实时观察 → 事后排查

每一个阶段均有专门控制策略。

五、溶液准备阶段的预防措施

5.1 使用脱气溶剂

• 真空脱气：–0.1MPa下脱气10~15分钟；

• 超声脱气：40 kHz超声波3~5分钟；

• 氮气慢速吹扫：缓慢流速排出溶解氧气。

5.2 溶液稳定预平衡

• 配液后充分静置15~30分钟；

• 温度预平衡于室温（20~25℃）；

• 避免冷热交替造成溶解度变化析气。

5.3 过滤去除微粒

• 采用0.22μm微孔膜过滤；

• 同步去除微颗粒和伴随析出气泡核。

六、移液稀释操作中的避泡技巧

6.1 移液姿势规范

• 杜绝移液枪快速吸排；

• 枪头入液深度2–3mm最佳；

• 反向移液技术有效减少卷气。

6.2 移液工具控制

• 定期校准移液器精度；

• 采用UV级洁净枪头，防止附着污染影响液滴张力。

6.3 混匀方式优化

• 采用倒置旋转法轻柔混匀；

• 避免剧烈振荡产生乳化气泡。

七、比色池使用与处理控制

7.1 比色池表面状态管理

7.2 比色池填充技巧

• 比色池倾斜45°缓慢注液；

• 液面高出入光口1mm左右；

• 杜绝溢出与残留挂液；

• 加盖或密封防止液面挥发。

7.3 安放固定

• 固定安放位置，避免震动扰动；

• 安装稳固比色池夹持器。

八、上样与检测前的视觉检测要领

8.1 目检技巧

• 借助冷光源与背景白板逆光观察；

• 轻微转动比色池，识别挂壁气泡；

• 透明高倍率放大镜提升微泡观察力。

8.2 智能图像识别辅助

• AI图像识别气泡判别系统正在部分高端仪器应用；

• 动态标记微米级潜在干扰泡点。

九、事后排泡处理措施

9.1 轻敲排泡法

• 手指或橡皮头轻敲比色池顶端2~3次；

• 利用张力释放挂壁泡。

9.2 针尖引导法

• 微量移液器枪头轻贴气泡旁缘；

• 缓慢牵引气泡爬升至液面消散。

9.3 离心法

• 3000–5000 rpm低速短时离心30秒；

• 聚集悬浮气泡上浮分离。

9.4 真空快速脱泡法

• 将整池样本放置于真空腔室；

• 5–10分钟内完成快速排泡。

十、不同光程条件下气泡风险敏感度

光程越短 → 气泡影响越放大 → 控制要求越严格。

十一、气泡控制的智能化技术趋势

十二、合规体系下的气泡控制要求

十三、排泡标准化SOP框架建议

样品前处理

• 每批次脱气、过滤、恒温；

• 记录溶液预处理批号与人员签名。

上样控制

• 使用标准角度与入液高度；

• 排泡确认打勾记录表单。

检测前检查

• 目检+图像辅助；

• 排泡后静置平衡1分钟后上机。

异常处理

• 出现跳动数据时，启动重新排泡机制；

• 溯源并记录操作修正细节。

十四、结语总结

• 气泡管理能力 = 紫外分光光度计定量能力的放大镜。

• 规范操作流程、掌握物理机制、固化排泡动作，才能让每一次吸光度数据都“干净如水面”。

• 标准化、数字化、智能化将共同消灭未来紫外实验室的气泡误差隐患。

优秀的紫外实验室，从来不是因为仪器贵，而是因为每一个气泡都不被允许存在。