一、引言

紫外分光光度计是一种高精度、常规性的分析仪器，广泛用于化学、生物、环境、食品、医药等领域。在进行任何一次样品测量之前，必须完成一系列准备工作。这些步骤不仅决定了数据的准确性和重现性，还关乎仪器运行的稳定性与实验的可溯性。

很多实验误差并非来源于仪器性能，而是由于样品测前准备不充分所致。本文将系统阐述在使用紫外分光光度计进行分析前，操作人员必须进行的准备工作，构建完整的样品前处理和仪器准备规范。

二、实验室环境条件准备

2.1 温度与湿度控制

实验室温湿度直接影响仪器运行和样品性质。

• 推荐温度：20°C–25°C；

• 相对湿度：应小于60%，避免冷凝水影响光学元件；

• 温差过大：可能导致样品析出或比色皿结雾，影响读数。

2.2 防尘与防振

• 紫外分光光度计应放置在稳定、无振动的平台上；

• 周围应保持清洁，远离强磁设备、高频仪器；

• 仪器附近不应放置液体、化学试剂或吸附粉尘的纸张。

2.3 电源供应保障

• 使用独立电源，接地良好；

• 建议使用稳压器或UPS系统防止电压波动；

• 避免与大功率设备共用插座。

三、仪器状态检查与预热

3.1 外观与系统检查

• 仪器表面干净、按钮完好；

• 检查光源灯是否完好（氘灯、钨灯）；

• 比色皿架运行顺畅、无卡滞；

• 检测器状态正常，无报错提示。

3.2 电源启动与预热

1. 先开启电源稳压器（如有）；

2. 启动仪器主机，观察自检是否正常；

3. 打开操作软件或控制面板；

4. 点亮光源灯（氘灯、钨灯）；

5. 预热时间：

• 氘灯：≥20分钟；

• 钨灯：≥15分钟。

提示：预热不充分会导致光源输出不稳，从而影响吸光度读数和谱图稳定性。

四、测量波长与模式设置

4.1 测量模式选择

• 吸光度（Abs）：常用于定量分析；

• 透光率（%T）：适合比对透光性能；

• 能量模式（Energy）：较少使用；

• 定量（Concentration）：需要事先建立标准曲线；

• 光谱扫描（Scan）：用于定性分析和波长选择。

4.2 波长设定

• 单波长模式：输入目标吸收峰波长（如260 nm）；

• 扫描模式：设定起始和终止波长范围（如200–400 nm）；

• 步长与扫描速度：根据样品特性与分辨率需求设置。

五、比色皿的准备与管理

5.1 材质匹配

• 石英比色皿：适用于190–900 nm（紫外+可见）；

• 玻璃比色皿：适用于350–900 nm（可见）；

• 塑料比色皿：用于教学或一次性实验，透光性差。

5.2 清洗要求

• 使用中性洗液或无离子水清洗；

• 禁止使用带腐蚀性的清洁剂；

• 用无绒布或擦镜纸擦拭光学面，避免划痕；

• 检查是否有裂痕、气泡或残留液体。

5.3 操作规范

• 比色皿插入方向一致（光路平行于光学面）；

• 注入样品高度一致，避免液面误差；

• 避免指纹污染光窗，操作前戴手套。

六、样品溶液的制备与处理

6.1 浓度预估与设定

为获得理想吸光度（0.1–1.0 A），应根据摩尔吸光系数和样品性质预估所需浓度。

• 若A值 > 1.5，稀释样品；

• 若A值 < 0.05，可增加浓度或使用更长光程比色皿。

6.2 溶液均质化

• 配制后应充分混匀，避免沉淀；

• 可用漩涡混匀器或轻轻摇匀；

• 高粘度样品要确保溶解度。

6.3 气泡与颗粒处理

• 样品应静置或用超声处理排气泡；

• 若有悬浮颗粒，应使用滤膜过滤（0.22–0.45 μm）；

• 样品温度应与环境一致，避免析气或析出。

七、空白溶液与标准曲线样品准备

7.1 空白液体准备

• 空白液必须为样品所用溶剂或反应基质；

• 与样品成分除目标分析物外完全一致；

• 用于进行空白校正，消除溶剂、自身吸收及比色皿影响。

7.2 标准样品制备（定量分析）

• 准备不同浓度标准液（推荐5–7个梯度）；

• 使用容量瓶、移液管等高精度器具操作；

• 每次实验应重新配制新标准液；

• 建议采用单批次母液稀释，避免浓度差异。

八、校正与空白调零操作

8.1 空白调零

• 将空白液体装入比色皿；

• 插入样品室并对准光路；

• 点击“Blank”或“Zero”按钮，完成调零；

• 仪器设定该透光率为100%或吸光度为0。

8.2 波长校正（可选）

• 高级仪器可用滤光片校正波长；

• 一般每季度或半年进行一次；

• 波长漂移将影响最大吸收峰定位。

九、测量前检查表（推荐使用）

十、常见问题与防范措施

十一、总结

紫外分光光度计的测量前准备不仅是一项基础性工作，更是一项决定实验成败的核心保障。从实验环境、仪器状态、比色皿管理到样品溶液配置，每一环都必须严格把控，才能最大限度减少系统误差与操作偏差。

良好的准备，是获取高质量实验数据的前提。科学研究的严谨性，体现在每一个看似微小的实验步骤之中。只有做到“未测先谋”，才能实现“数据可信、结果精准”。