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紫外分光光度计由哪些主要部分组成?

紫外可见分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)是一种利用紫外和可见光吸收特性进行样品分析的重要光谱仪器,广泛应用于化学、生物、环境、食品和医药等领域。其核心功能依赖多个关键部件协同工作,才能实现准确、稳定的定性与定量测量。

一、引言

紫外可见分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)是一种利用紫外和可见光吸收特性进行样品分析的重要光谱仪器,广泛应用于化学、生物、环境、食品和医药等领域。其核心功能依赖多个关键部件协同工作,才能实现准确、稳定的定性与定量测量。

本文将从以下六大模块系统阐述UV-Vis分光光度计的主要组成部分、工作原理与协同机制:

  1. 光源模块

  2. 单色器(单色化系统)

  3. 样品池(比色皿)与样品室

  4. 检测器模块

  5. 电子控制与信号处理系统

  6. 软件与人机交互界面


二、光源模块

2.1 光源类型

  • 氘灯(D₂):提供190–400 nm紫外连续光谱;

  • 钨灯(W):提供360–900 nm可见至近红外光谱;

  • 氙灯(Xe):覆盖190–1000 nm宽带;

  • 卤素灯LED组合:用于特定波长应用。

2.2 光源要求

  • 连续稳定光谱;

  • 短期波动<0.1%,长期漂移<1%;

  • 预热时间、寿命与维护周期平衡。


三、单色器(单色化系统)

3.1 单色器作用

将光源的宽带连续光,通过折射或衍射等光学原理分离,输出所需单一波长的光。

3.2 单色化元件

  • 棱镜(Prism):利用折射色散;

  • 光栅(Grating):利用衍射干涉;

  • 狭缝系统(入射缝与出射缝)控制带宽。

3.3 调节与校准

  • 步进电机或伺服驱动旋转光栅/棱镜;

  • 编码器反馈与软件线性校正,实现波长精度±0.2 nm。


四、样品池与样品室

4.1 样品池材质

  • 石英:170–2500 nm;

  • 燧石:高纯紫外区;

  • 硼硅玻璃/普通玻璃:>320 nm;

  • 塑料(PMMA/PS):>330 nm一次性。

4.2 样品室设计

  • 双光束与单光束布局;

  • 恒温控制与防震设计;

  • 自动进样与转盘多位样品架选择。


五、检测器模块

5.1 检测器类型

  • 光电二极管(PD):200–1100 nm;

  • 光电倍增管(PMT):185–900 nm;

  • CCD/CMOS阵列:200–1100 nm全谱并行;

  • 光电池光电阻用于非精密场景。

5.2 性能指标

  • 量子效率、暗电流、噪声等效功率、动态范围和响应速度;

  • 双通道对照与平均化处理提升准确度。


六、电子控制与信号处理系统

6.1 控制硬件

  • DAC/ADC模块:波长与信号数模转换;

  • 单片机或FPGA:实时控制光栅转动、数据采集与处理;

  • 高压电源:PMT驱动。

6.2 信号处理

  • 基线扣除、空白校正;

  • 平滑滤波与积分时间设定;

  • 峰值检测与积分面积计算;

  • 标准曲线拟合与浓度反算。


七、软件与人机交互界面

7.1 操作软件

  • 波长设定与扫描模式选择;

  • 吸光度/透光率/浓度显示切换;

  • 数据存储、导出功能(csv, pdf);

  • 自动校准脚本与维护提示。

7.2 硬件接口

  • USB、LAN、RS232等可与LIMS、实验室信息系统对接;

  • 触摸屏交互或PC控制两种模式。


八、系统协同与综合性能优化

  1. 双光束设计:同步空白与样品通道,实时抑制灯强漂移;

  2. 光路稳定性:防振平台、恒温舱体保障;

  3. 自动校正功能:多点汞灯校准与AI漂移补偿;

  4. 高通量配置自动进样器、可更换滤光片库。


九、应用示例与案例分析

  • 蛋白280 nm定量:石英单光束+PD;

  • 药典方法符合:双光束+PMT+自动校准;

  • 在线监测:LED组+PD阵列+高速扫描。


十、结语

UV-Vis分光光度计由光源、单色器、样品池、检测器、电子控制与软件界面等核心模块构成,各部分协同工作决定了测量的准确性与稳定性。透彻理解各组件原理与性能,并在选型与维护中进行平衡,才能真正发挥仪器的应用价值。