
紫外分光光度计由哪些主要部分组成?
一、引言
紫外可见分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)是一种利用紫外和可见光吸收特性进行样品分析的重要光谱仪器,广泛应用于化学、生物、环境、食品和医药等领域。其核心功能依赖多个关键部件协同工作,才能实现准确、稳定的定性与定量测量。
本文将从以下六大模块系统阐述UV-Vis分光光度计的主要组成部分、工作原理与协同机制:
光源模块
单色器(单色化系统)
样品池(比色皿)与样品室
检测器模块
电子控制与信号处理系统
软件与人机交互界面
二、光源模块
2.1 光源类型
氘灯(D₂):提供190–400 nm紫外连续光谱;
钨灯(W):提供360–900 nm可见至近红外光谱;
氙灯(Xe):覆盖190–1000 nm宽带;
卤素灯与LED组合:用于特定波长应用。
2.2 光源要求
连续稳定光谱;
短期波动<0.1%,长期漂移<1%;
预热时间、寿命与维护周期平衡。
三、单色器(单色化系统)
3.1 单色器作用
将光源的宽带连续光,通过折射或衍射等光学原理分离,输出所需单一波长的光。
3.2 单色化元件
棱镜(Prism):利用折射色散;
光栅(Grating):利用衍射干涉;
狭缝系统(入射缝与出射缝)控制带宽。
3.3 调节与校准
步进电机或伺服驱动旋转光栅/棱镜;
编码器反馈与软件线性校正,实现波长精度±0.2 nm。
四、样品池与样品室
4.1 样品池材质
石英:170–2500 nm;
燧石:高纯紫外区;
硼硅玻璃/普通玻璃:>320 nm;
塑料(PMMA/PS):>330 nm一次性。
4.2 样品室设计
双光束与单光束布局;
恒温控制与防震设计;
自动进样与转盘多位样品架选择。
五、检测器模块
5.1 检测器类型
光电二极管(PD):200–1100 nm;
光电倍增管(PMT):185–900 nm;
CCD/CMOS阵列:200–1100 nm全谱并行;
光电池与光电阻用于非精密场景。
5.2 性能指标
量子效率、暗电流、噪声等效功率、动态范围和响应速度;
双通道对照与平均化处理提升准确度。
六、电子控制与信号处理系统
6.1 控制硬件
DAC/ADC模块:波长与信号数模转换;
单片机或FPGA:实时控制光栅转动、数据采集与处理;
高压电源:PMT驱动。
6.2 信号处理
基线扣除、空白校正;
平滑滤波与积分时间设定;
峰值检测与积分面积计算;
标准曲线拟合与浓度反算。
七、软件与人机交互界面
7.1 操作软件
7.2 硬件接口
USB、LAN、RS232等可与LIMS、实验室信息系统对接;
触摸屏交互或PC控制两种模式。
八、系统协同与综合性能优化
双光束设计:同步空白与样品通道,实时抑制灯强漂移;
光路稳定性:防振平台、恒温舱体保障;
自动校正功能:多点汞灯校准与AI漂移补偿;
高通量配置:自动进样器、可更换滤光片库。
九、应用示例与案例分析
蛋白280 nm定量:石英单光束+PD;
药典方法符合:双光束+PMT+自动校准;
在线监测:LED组+PD阵列+高速扫描。
十、结语
UV-Vis分光光度计由光源、单色器、样品池、检测器、电子控制与软件界面等核心模块构成,各部分协同工作决定了测量的准确性与稳定性。透彻理解各组件原理与性能,并在选型与维护中进行平衡,才能真正发挥仪器的应用价值。
