
光的波长在紫外区域范围是多少?
一、引言:认识“不可见”的紫外光
紫外光(Ultraviolet Light, 简称 UV)是一种波长比可见光短、能量较高的电磁波。虽然人眼无法直接看到紫外线,但它在自然界与科技应用中无处不在。紫外分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)正是利用这一“不可见之光”,分析样品对不同波长紫外线的吸收程度,实现高灵敏度的定量检测。
了解紫外光的波长范围,是掌握紫外光谱分析原理与技术应用的第一步。本文将系统介绍紫外区域的波长划分、物理特性、与紫外分光光度计的关系以及在分析化学中的实际用途。
二、紫外光的波长范围是多少?
2.1 紫外光的基本波长区间
紫外线的波长范围约为:
10 nm ~ 400 nm\textbf{10 nm ~ 400 nm}10 nm ~ 400 nm
但在光谱分析中,真正用于分光光度计的紫外区,主要是:
190 nm ~ 400 nm\boxed{\textbf{190 nm ~ 400 nm}}190 nm ~ 400 nm
这是紫外分光光度计实际工作的有效波段。
2.2 与可见光、X射线的比较
光种类 | 波长范围(nm) | 能量(eV) |
---|---|---|
X 射线 | <10 | >124 |
真空紫外(VUV) | 10–200 | 6.2–124 |
紫外光(UV) | 190–400 | 3.1–6.5 |
可见光 | 400–760 | 1.6–3.1 |
红外光 | 760–1,000,000+ | <1.6 |
三、紫外区的详细分区(按国际标准)
为了便于研究和仪器开发,紫外线通常被划分为以下三个子区:
分区名称 | 波长范围(nm) | 特点 | 紫外分光光度计适用性 |
---|---|---|---|
近紫外(Near-UV) | 320 – 400 | 能量低,接近可见光,穿透性强 | ✔ 通常也属于可见区 |
中紫外(Middle-UV) | 200 – 320 | 紫外光谱分析最常用区段 | ✔ 主要分析波段 |
远紫外(Far-UV) | 190 – 200 | 光能强,易被气体吸收,要求真空 | ✔ 高端石英光学仪可测 |
注意:190 nm 是常规紫外分光光度计的技术下限,因为低于此值空气和玻璃会强烈吸收光。
四、紫外分光光度计的有效波段
紫外分光光度计的光源、样品池和检测器决定了其可用波长范围。大多数商用仪器的紫外波段工作区如下:
下限波长:190 nm(受光源与比色皿材质限制)
上限波长:约400 nm(超出即为可见区)
因此:
紫外分光光度计的有效紫外区波长 = 190~400 nm
超出该范围(如真空紫外 <190 nm)通常需要专用真空设备,不适用于常规UV-Vis仪器。
五、不同波段紫外光的物理特性
波段 | 能量大小 | 生物影响 | 吸收特征 |
---|---|---|---|
近紫外 | 能量较低 | 穿透表皮 | 多数有机色素吸收 |
中紫外 | 能量适中 | 可致DNA损伤 | 酸类、芳香族、核苷酸强吸收 |
远紫外 | 能量极高 | 易被氧气吸收 | 多数分子发生电子跃迁 |
六、物质对紫外波长的吸收规律
6.1 紫外吸收的本质
紫外光可激发分子的π电子、n电子跃迁;
分子结构中存在共轭双键、芳香环、羰基、硝基等基团时,会对紫外线表现出特定吸收。
6.2 λmax 的意义
七、紫外光源的波长输出特点
紫外分光光度计常用的光源如下:
光源类型 | 波长输出范围(nm) | 特点 |
---|---|---|
氘灯 | 190–370 | 紫外区连续谱,强度稳定 |
氙灯 | 190–1000+ | 高频宽光源,适用于扫描全谱 |
LED紫外光源 | 特定中心波长,如254、280、310等 | 节能、寿命长,适合定波长仪器 |
注:玻璃或普通塑料不透紫外光,必须使用石英材料比色皿。
八、紫外波段常见分析应用举例
λmax(nm) | 分析物/方法 | 说明 |
---|---|---|
190–200 | 多肽键、蛋白质远紫外分析 | 高灵敏区段,需氮气吹扫仪器支持 |
230–250 | 苯类化合物、芳香胺 | 环系化合物,π→π*跃迁显著 |
254 | 微生物DNA吸收/紫外杀菌波段 | 紫外灯常用杀菌波段 |
260 | DNA/核苷酸定量 | λmax = 260 nm,对核酸敏感 |
280 | 蛋白质中酪氨酸、色氨酸 | 结构定量分析 |
300–320 | 某些有色药物/农药残留显色法 | 显色反应产物吸收带 |
320–400 | 重金属络合物/色素吸收 | 紫外–可见边界区,常用于比色法 |
九、仪器操作中的波长选择原则
9.1 固定波长测量
在 λmax 处进行定量分析;
增加检测灵敏度与选择性;
适合常规检测项目(如A260法测DNA)。
9.2 波长扫描模式
扫描190–400 nm全段;
用于未知样品的λmax寻找或光谱比较;
识别混合物中多组分。
十、紫外波长控制的误差与校准
误差来源 | 表现与后果 | 解决措施 |
---|---|---|
波长偏差 | 非λmax处测量 → 灵敏度降低 | 使用校准溶液(苯、NaNO₂等)校准仪器 |
杂散光干扰 | 吸光度抬高,曲线不线性 | 选用高质量单色器或双单色系统 |
样品池不匹配 | 波长穿透不良,信号衰减 | 使用石英比色皿,避免玻璃/塑料误用 |
光源老化 | 紫外输出下降,数据波动 | 定期更换氘灯/LED光源 |
十一、真空紫外(VUV)与常规UV的区别
比较维度 | 真空紫外(VUV) | 常规紫外(UV) |
---|---|---|
波长范围 | 10–190 nm | 190–400 nm |
光源 | 氘灯、放电管 | 氘灯、氙灯 |
环境要求 | 需真空系统 | 普通空气即可 |
光学材质 | MgF₂、CaF₂ | 石英 |
应用 | 半导体、等离子体 | 分子定量、生物分析 |
十二、结语:精准波长识别,决定分析成败
紫外波段的科学划分不仅为分光光度计的波长设置提供了基础框架,也决定了实验设计与数据解释的策略。掌握190–400 nm的紫外区波长范围,并结合样品的结构特征、仪器性能与目标指标,才能最大程度发挥紫外光谱分析的优势。
