一、霉菌培养基概述

1.1 定义与分类

霉菌培养基是指用于霉菌生长、繁殖和分离纯化的人工配制营养基质。根据用途和成分不同，可分为以下几类：

• 通用型培养基

• 选择性培养基

• 鉴别型培养基

• 特殊功能培养基（如抗生素筛选、产酶测定等）

1.2 霉菌对营养基质的需求

霉菌普遍对碳源和氮源的适应能力较强。一般培养基需提供：

• 碳源：葡萄糖、蔗糖、马铃薯淀粉等

• 氮源：蛋白胨、硫酸铵、酵母粉等

• 无机盐：磷酸盐、镁盐、铁盐等

• 其他添加剂：pH缓冲剂、抗生素、色素指示剂等

二、常用霉菌培养基介绍

2.1 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）

组成（每升）：

• 新鲜马铃薯 200g（煮汁）

• 葡萄糖 20g

• 琼脂 15~20g

• 蒸馏水至 1000mL

特点：

PDA 是霉菌研究中最常用的通用培养基，适合绝大多数霉菌的生长。马铃薯提供丰富的营养物质，葡萄糖为碳源。

应用：

• 霉菌的分离和初代培养

• 毒素霉菌的形态观察

• 食品微生物检测

2.2 营养琼脂培养基（NA）

组成：

• 牛肉浸膏 3g

• 胨 5g

• NaCl 5g

• 琼脂 15g

• 蒸馏水至 1000mL

特点：

虽然多用于细菌培养，但部分霉菌如酵母样真菌在此基上也能较好生长。

应用：

• 酵母菌的培养

• 霉菌与细菌混合样本初筛

2.3 沙氏葡萄糖琼脂（Sabouraud Dextrose Agar，SDA）

组成：

• 葡萄糖 40g

• 胨 10g

• 琼脂 15g

• pH 调整至 5.6

特点：

低pH环境有利于抑制细菌，有利于真菌尤其是皮肤真菌生长。

应用：

• 皮肤病致病真菌的分离培养

• 抗真菌药物敏感性测试

2.4 Czapek-Dox琼脂培养基（CZA）

组成：

• 蔗糖 30g

• NaNO₃ 2g

• K₂HPO₄ 1g

• MgSO₄·7H₂O 0.5g

• KCl 0.5g

• FeSO₄ 0.01g

• 琼脂 15g

特点：

适合于生理代谢研究及特定霉菌（如青霉、曲霉）培养，蔗糖为唯一碳源。

应用：

• 土壤霉菌分离

• 产酶霉菌筛选

• 色素霉菌研究

2.5 玉米粉琼脂培养基（Corn Meal Agar, CMA）

组成：

• 玉米粉煮汁 50g

• 琼脂 15g

• 蒸馏水至 1000mL

特点：

营养较低，诱导霉菌形成分生孢子结构，便于形态学鉴定。

应用：

• 分生孢子的形成观察

• 霉菌系统分类研究

2.6 酵母膏葡萄糖琼脂（YGA）

组成：

• 酵母膏 10g

• 葡萄糖 20g

• 琼脂 15g

特点：

富含维生素与核苷酸，利于营养要求高的真菌（如担子菌类）生长。

应用：

• 高营养需求霉菌培养

• 基因转化实验用真菌生长支持

2.7 酚红培养基

添加物：

在其他培养基中加入0.01%-0.02%的酚红作为pH指示剂。

特点：

通过颜色变化反映霉菌代谢产酸或产碱特性，利于代谢路径分析。

应用：

• 酸碱代谢能力检测

• 抗生素产酸特性的初步筛选

三、选择性培养基与抑菌添加剂

为了提高霉菌分离的选择性，常在培养基中添加特定成分以抑制非目标微生物。

3.1 抗生素添加剂

• 氯霉素：抑制革兰氏阳性细菌

• 链霉素：常用于真菌培养，抑制细菌污染

• 青霉素：对细菌敏感，霉菌耐受

3.2 酸碱调节

• pH 5.6 左右：有利于抑制大多数细菌，促进霉菌生长

• 加入乳酸、柠檬酸：调酸并防止碱性细菌生长

3.3 其他抑菌物质

• 玫瑰红钠：抑制细菌同时不影响霉菌

• 酒石酸：用于真菌中特殊代谢反应分析

四、霉菌培养基使用注意事项

4.1 配制过程要求无菌

所有培养基在高压蒸汽灭菌（121℃，15min）后才能使用，防止杂菌污染。

4.2 温度适配

霉菌培养一般选用25~28℃，需根据菌株耐温特性调整。

4.3 湿度与通气

霉菌生长需较高湿度和良好通气，因此培养箱应设湿度控制系统，并定期检查通风情况。

4.4 保存方式

已配制未用完的培养基应在4℃冷藏保存，避免失水和污染。

五、实际应用案例

案例一：食品霉菌污染检测

采用PDA与SDA培养基对饼干表面进行分离培养，观察不同处理组霉菌生长密度，进行霉菌种属鉴定与污染源追踪。

案例二：产酶霉菌筛选

利用Czapek-Dox基础培养基分别加入底物（如纤维素、蛋白质），检测透明圈形成情况，筛选高产酶菌株。

案例三：霉菌抗药性测试

在SDA基础上加入不同浓度抗真菌药物，如酮康唑，观察霉菌抑制圈直径，判断药敏性。

六、发展趋势与新型培养基

随着合成生物学、代谢组学的发展，传统培养基正在向更精准、高效、多功能方向演进：

• 组合型培养基：结合生理活性成分，针对性诱导代谢产物

• 发光标记培养基：通过霉菌代谢产物激活荧光报告基团，用于自动化检测

• 三维凝胶基质：模拟生物组织结构，研究霉菌侵染机制与生物膜形成

结语

霉菌培养基作为微生物研究的基础工具，其科学配置与合理使用直接关系到实验成败和数据质量。通过深入理解各类培养基的组成和功能，科研人员和技术人员能够更有效地进行霉菌的分离、鉴定、应用开发等工作。未来，随着人工合成培养体系的发展，霉菌培养基将更加精准化、自动化与高通量，为生命科学和工业应用带来更多可能。