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酶标仪样品架更换与校正流程?

酶标仪是一种基于光学原理对微孔板样品进行检测的分析仪器,广泛用于生化、免疫学等领域。样品架将微孔板精准定位于光路中心,保证吸光度及荧光信号的可靠性。频繁插拔微孔板会导致样品架与导轨磨损或污染,影响测量结果。因此,定期更换样品架并进行校正,对维持仪器性能至关重要。建议根据使用频率,每千小时或每年进行一次样品架更换,并针对不同实验类型设定校正周期。更换完成后建议进行基础功能测试,以确认整体安装正确。

一、概述
酶标仪是一种基于光学原理对微孔板样品进行检测的分析仪器,广泛用于生化、免疫学等领域。样品架将微孔板精准定位于光路中心,保证吸光度及荧光信号的可靠性。频繁插拔微孔板会导致样品架与导轨磨损或污染,影响测量结果。因此,定期更换样品架并进行校正,对维持仪器性能至关重要。建议根据使用频率,每千小时或每年进行一次样品架更换,并针对不同实验类型设定校正周期。更换完成后建议进行基础功能测试,以确认整体安装正确。

二、适用范围及注意事项
本流程适用于包括安捷伦、赛默飞、BIO-TEK、PerkinElmer等常见酶标仪型号。操作前须仔细阅读说明书,熟悉仪器结构与软件界面。更换前务必关闭软件并断开电源,避免在带电状态下触碰光学或电子元件。校正时,需使用无损伤的校准板或标准样品,确保其质量可靠。操作环境应保持清洁、干燥,避免灰尘和静电干扰。此外,建议定期对操作人员进行培训和考核,确保每次维护流程一致且符实验室质控要求。

三、准备工具与耗材

  1. 样品架组件:与仪器匹配的原厂或认证替换件,含定位底座、导轨、弹簧、定位销等。

  2. 工具:十字螺丝刀、内六角扳手、镊子、无尘布、酒精棉球、镜头纸、棉签。

  3. 校准耗材:均匀吸光度校准板、吸光度标准板、波长校准滤光片或荧光校准板及荧光标准品。

  4. 软件与固件:仪器配套控制软件、校准模块及固件更新包。

四、更换样品架流程

  1. 仪器断电与准备
    1.1 关闭控制软件,确认无测量任务运行后,依次关闭后侧电源开关并拔掉电源线,等待至少5分钟。
    1.2 将仪器置于平整工作台,佩戴防静电腕带,准备好拆卸工具与清洁用品。

  2. 拆卸外壳
    2.1 使用螺丝刀或内六角扳手拆卸顶部或侧面固定螺钉,记录螺钉规格与位置。
    2.2 轻轻抬起外壳面板,若有卡扣可先松开卡扣,取下面板后置于无尘布上。

  3. 拆卸旧样品架
    3.1 在光学检测区下方或侧面找到样品架固定螺钉位置,用工具逐一松动并取下螺钉,妥善放置。
    3.2 小心抬起样品架组件,避免偏斜或用力过猛划伤导轨。
    3.3 检查样品架、弹簧、定位销等部件有无明显磨损或变形,必要时同时更换相应配件。

  4. 清洁导轨与光学区
    4.1 无尘布蘸70%乙醇擦拭导轨,去除灰尘与油污。
    4.2 镜头纸或棉签蘸镜头清洁液擦拭反射镜、滤光片位置和传感器窗口。
    4.3 手动滑动导轨,检查顺滑度,如有阻滞可适量润滑或联系维护部门;确认光纤与电线连接可靠。

  5. 安装新样品架
    5.1 检查新样品架型号与仪器匹配,将组件沿导轨插入,调节使定位孔对齐。
    5.2 插入定位螺钉后,先手动旋入确保同心,再用工具按对角顺序均匀拧紧。
    5.3 手动推动样品架至极限位置,确认滑动顺畅且能回到“归零”位置。

  6. 恢复外壳与通电
    6.1 将外壳面板盖回并对准卡扣,均匀按压后按顺序拧紧螺钉。
    6.2 插回电源后启动仪器并打开控制软件,等待自检完成,确认无异常提示。

五、校正流程

  1. 校正前准备
    1.1 仪器通电预热至少30分钟,保证光源与检测器达到稳定状态。
    1.2 环境要求:室温20~25℃,湿度30%~60%,避免温度波动和灰尘干扰。
    1.3 更新并运行最新版控制软件,打开“校正向导”或“维护模式”。
    1.4 准备光学校准板、吸光度和荧光校准板,检查无划痕且在有效期内。

  2. 光路基线校正
    2.1 选择“基线校正”或“零点校准”功能,将空白板放置于样品架中央定位。
    2.2 以常用波长(如450 nm、492 nm)进行扫描,获取基线信号并对比上次校正结果。
    2.3 如基线偏离预设范围,可使用“自动增益优化”或手动调整光源电流与检测器增益。
    2.4 校正完成后保存报告,记录光源强度、噪声水平和增益参数。

  3. 波长校准
    3.1 在“波长校正”界面选择对应滤光片或荧光校准板参考波长(如450 nm、550 nm、620 nm)。
    3.2 将校准组件依次放入样品架,启动扫描程序,系统自动测量并与标准值比对,调整光栅或检测器位置。
    3.3 若偏差超出允许范围,需要手动微调光栅支架螺丝或联系售后维护。
    3.4 保存波长偏移曲线与线性度报告,确保波长准确性。

  4. 吸光度精度校正
    4.1 装载已知吸光度值的校准板,选择“吸光度校准”功能,执行0.0~2.0 A范围扫描。
    4.2 软件输出测量值与真实值对比,并计算线性回归系数。若线性度<0.999,检查光源与检测器状态。
    4.3 根据提示进行“光密度校正”或“斜率调整”,修正各点偏差,恢复线性系数至0.999 以上。
    4.4 保存校正报告,包括校准系数、残差范围、测试日期及操作人员信息。

  5. 荧光灵敏度校正(如具备)
    5.1 进入“荧光校准”模块,选择样品对应激发/发射波长,放置荧光标准板并执行检测。
    5.2 系统测量荧光峰值与背景噪声,调整增益和滤光片位置以获得最佳信噪比。
    5.3 若灵敏度或线性度不足,可进行多点校正并保存校正曲线报告。

  6. 校正验证
    6.1 准备浓度梯度标准样品,建立验证方法并测量,绘制标准曲线并计算R²和偏差。
    6.2 若R² ≥0.995 且偏差<5%,判定校正合格;如不达标,重新检查流程或联系维护。
    6.3 保存完整验证报告,包括校正日期、操作人员、仪器型号、耗材批号与验证数据。

六、常见问题与维护建议

  1. 样品架抖动:检查固定螺钉与导轨是否松动或有异物,必要时更换弹簧和定位销。

  2. 信号不稳定:光源老化、光纤松动或检测器污染均可导致噪声增大,应定期清洁并关注灯管寿命提示。

  3. 校准失败:确认校准板放置是否居中、无污染,重新放置后再校正;若仍失败,可联系厂商技术支持。

  4. 温度漂移:避免靠近空调出风口或窗户操作,保持实验室温度恒定。

  5. 定期保养:每季度进行基础清洁,每半年或每千小时进行系统校正,记录维护日志并及时解决问题。

  6. 数据管理与培训:建立校正电子档并定期趋势分析,管理部门应按月或季度审阅校正日志,及时发现异常。建议对操作人员实施定期培训,确保流程规范与数据可追溯。

  7. 操作注意:更换手套防止污染,对新仪器首次使用时应进行完整校正并记录基线数据。保持仪器周边环境整洁。

七、总结
通过规范的样品架更换与校正流程,包括断电准备、拆卸旧部件、导轨清洁、安装新样品架,以及基线、波长、吸光度和荧光校正,有效保持酶标仪的测量精度与稳定性。建议实验室将此流程纳入质量管理体系,定期审查校正电子档并结合实际运行状况及时维护。此外,可建立校正日志,不断优化维护计划,提升实验室数据可重复性与仪器利用率。操作完成后,可形成SOP文档并向新进人员下发,保证团队规范化操作,降低人为失误。未来可根据设备状态实现预防性维护,并利用校正数据制定预算计划。