一、准备阶段的失误

1. 缺乏系统检查
   部分初学者认为洗板机“通电即用”，忽视对吸液瓶、废液瓶、管路快速接头及密封圈的预检。若瓶盖未旋紧或密封圈老化，真空不足会引发吸液不彻底，造成板孔残液大量残留，直接影响后续显色强度。

2. 洗液配置随意
   实验室常用磷酸盐缓冲盐水(PBS)或专用洗液。错误配比浓度、未充分溶解粉末或使用与试剂盒不兼容的洗液都会引发蛋白沉淀堵塞管路。尤其在高盐浓度环境下，微小结晶会在喷针端部累积，日积月累导致喷针堵塞。

3. 未进行管路预冲
   洗液加入后，需要通过“Prime”功能冲洗管道并排除空气。若直接开机洗板，会把空气推入喷针以致喷射断续，孔内形成气泡，从而降低洗涤剪切力，产生假阴性。

4. 忽视板型匹配
   市场上常见U形、V形、平底及半面积板。若操作员未在软件或面板中正确选择板型，系统默认吸液高度便可能刮损孔底涂层或吸入底部粘附的抗原，导致背景升高或信号丢失。

二、程序设定阶段的失误

1. 冲洗体积设定过低
   为追求速度，一些人将单孔冲洗体积调到200 µL以下。对粘度较高或含表面活性剂的体系而言，该体积不足以彻底稀释残液；孔壁残留抗体会再次与底物反应，造成系数变异增大(CV＞10 %)。

2. 浸泡时间忽略待机效应
   洗板机一般支持“冲洗-浸泡-再冲洗”循环。若浸泡设定为0或不足3秒，结合剂较强的蛋白无法充分解离。相反，设置过长又会促使解离物再沉积于孔壁，出现“边缘效应”。

3. 吸液高度与倾斜角未优化
   厂家出厂默认吸液高度距底0.2 mm，只适合平底板。若未针对V形板上调高度，则会将底部样本全部抽干，再次进样时气泡难以排除，最终导致OD值离散。

4. 洗涤循环数盲目累加
   在追求零残留的心理驱动下，有人将洗涤循环提高到8-10次。频繁吸排液产生的强剪切力会使部分抗原-抗体复合物从固相脱落，甚至冲刷掉高结合力的钕磁珠，出现整体读数降低而CV依旧偏高的矛盾现象。

三、运行阶段的失误

1. 洗板过程中开盖或移动机器
   设备运行时如果打开顶盖观察，将导致机内负压瞬间丧失；若此时水泵仍在工作，会强行吸入空气，喷针回位时携带大量泡沫。

2. 未监听报警音或异常提示
   多数洗板机配有压力、液面及堵塞传感器。当废液瓶满或泵压异常时会主动提示。因实验室噪音大，操作员未及时处理，废液便可能倒吸至管路深处，引发交叉污染。

3. 不当加样节奏造成“混洗”
   若ELISA加样仍在进行，而洗板机已开始抽排相邻通道的洗液，板孔之间的压差会通过侧壁毛细作用把未孵育完全的反应液吸入空孔，形成鬼影阳性。

四、维护阶段的失误

1. 停止运行后不做清洗
   实验结束后应立即用纯水和70 %乙醇轮流冲洗。若直接断电，含蛋白或HRP底物的残液一夜之间会在内壁干结，次日再用即告堵塞。

2. 仅重视喷针忽视泵体
   用户常拆洗喷针却忽略回流泵的硅胶隔膜。长时间冲击后隔膜表面出现应力裂纹，虽未完全破裂但已潜在漏液。再次开机时压力不稳导致洗液飞溅，污染内部电路板。

3. 过滤器更换周期过长
   洗液瓶与主机间通常串联微孔过滤片。若超过三个月未换，过滤效率降低而外观却难以察觉，导致看似足量的冲洗流速实则杂质充斥，与其后的堵针事故并无表面关联，排查困难。

4. 忽视软件版本更新
   新固件往往优化阀门开启时间、增加自检项目。操作员若因担心“出BUG”选择不升级，老旧算法在高温或高海拔地区会表现吸液节拍漂移，小幅却足够改变CV。

五、耗材及环境相关失误

1. 使用劣质一次性吸头替代喷针刷
   为节约成本，有人将加样器吸头插入喷针孔清洁，但吸头底端常留有加工毛刺，轻则划伤喷针管壁产生毛边，重则折断残片嵌入喷路。

2. 洗液长时间暴露
   PBS中含磷，室温放置易被空气中细菌及霉菌利用。若三天内未更换，菌膜生成使流量传感器读数异常，甚至散发腥味难以分辨。

3. 温湿度控制不足
   大部分洗板机无主动除湿。南方梅雨季节实验室湿度>75 %时，控制板极易凝露。水珠聚集在继电器、驱动IC上会引起短路，表现为步进电机不规则啸叫，却常被误当做机械故障。

六、安全及合规性失误

1. 未按生物安全规程处理废液
   洗板废液可能含HBV、HIV等高致病样本。若直接倒入水池而非经含次氯酸钠的专用桶灭活，既违反法规也危及公共管网。

2. 忽略跨项目交叉污染
   同一台洗板机轮流用于临床样本、兽医项目及食品检测，却未执行分区放置或管路更换。微量残留抗生素或动物免疫球蛋白会在临床检测中产生假阳性，带来法律风险。

3. 操作日志缺失
   ISO 15189要求关键设备留有首末班点检记录。若洗板机发生故障又无法追溯当班参数与操作者，结果将被外审判定“不确定”，实验数据作废。

七、与上游、下游环节衔接的失误

1. 读板机参数未匹配洗板残液量
   洗板机若未完全抽干，残液上浮在孔上沿形成镜面。光密度读取时，边缘折射导致信号偏低。操作人员却只在读板机调整参比波长，却忽视洗板根因。

2. 加样体积未依据残液量调整
   高灵敏度配方常要求总反应体积一致。洗板后若残液差异±5 µL，但加样体积仍固定，终体积的百分比误差已经能使线性回归R²降至0.990以下。

八、常被忽略的细节性失误

1. 擅自拆卸喷针校正垫圈
   有经验的技师会通过调节垫圈厚度微调喷针同行度。未经培训的用户拆装后未记录原装垫圈顺序，结果喷针相对高度差>0.3 mm，出现一行吸得干、一行吸得浅的班纹。

2. 软件区域语言设置
   洗板机软件在不同语言包下对应键位略有差异。更换电脑后若选择错误语言，某些参数字段内容会被截断显示，用户未察觉就保存，使设定值归零。

3. 忘记移除运输固定块
   新机箱底常有黄色塑料块固定喷头运动轴。若未拆除便上电，电机负载骤增触发保护停机，部分用户误以为硬件损坏而私自拆机，售后保修随即失效。

结语
洗板机看似“简单洗涤”，实则暗含大量与流体力学、材料学、软件控制相关的细节。以上数十条常见操作失误覆盖了准备、设定、运行、维护、安全与上下游衔接的全过程。避免这些误区，需要从三方面入手：一是建立标准化SOP并强化新员工培训；二是定期进行质量审核与维护保养，形成闭环；三是与供应商保持沟通，及时更新固件与耗材。唯有如此，方能保证实验结果的准确性、重复性与可追溯性，并延长设备使用寿命。
此外，实验管理层还应在年度预算中预留培训与备件基金，把“看不见”的运行质量转化为可量化的KPI，例如每月统计洗板后空白孔平均OD及CV，作为评价操作水平的硬指标。通过数据驱动改进，可及早发现趋势性偏差，将故障拦截在萌芽阶段。