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洗板机洗板是否可结合图像识别判断残液?

随着高通量ELISA、细胞学及药物筛选日趋自动化,洗板机在微孔板实验中的作用已从简单液体交换上升到“数据质量守门人”。然而,即便最先进的多针负压系统,仍难以百分百保证每孔残液一致;残液过多或分布不均可导致背景升高、抗体漂移甚至假阴/假阳。近年来,借助高速工业相机与深度学习算法的图像识别技术被引入液体处理领域,用于判定血液袋残液、空瓶洁净度等场景,显示出高灵敏度与实时纠偏潜力。

一、残液视觉检测的核心机理

  1. 光学成像基础微孔板通常为透明或半透明聚苯乙烯/聚丙烯材质;在顶照或斜侧照模式下,残液与空气界面形成折射率突变,导致光强、反射纹理或干涉环的可测差异。

  2. 特征提取路径

    • 经典CV:Otsu阈值、Sobel 边缘与连通域过滤即可区分“液–空气”二值图;适合96孔板低通量质控。

    • 机器学习:Histogram of Oriented Gradients (HOG)、LBP 纹理 + SVM,对不同液色或泡沫有更强鲁棒性。

    • 深度学习/语义分割:U-Net、DeepLab v3+ 在小样本场景下配合迁移学习,可把一孔分割成“液面”“壁挂液膜”“空区”多标签,为算法闭环提供更细粒度反馈。en-trust.at

  3. 量化指标

    • 残液体积估算:通过液面曲率 + 已知孔径可直接积分计算;

    • 均匀性系数CV:对板内96/384个位点快速统计;

    • 阈值预警:实验室通常将残液≤1 µL视为合格(多数商用洗板机技术参数亦如此)alkalisci.com


二、图像识别与洗板机的集成架构

子系统功能关键技术要点可选硬件
光源模块提供均匀照明、抑制眩光环形冷光LED+偏振片;可编程亮度470 nm 蓝光阵列或白光条带
成像模块捕获高分辨孔面图≥8 MP CMOS,帧率≥60 fps;镜头畸变≤1%GigE或USB3相机+12 mm定焦
运动控制相机与洗头同步扫描伺服+光栅尺,定位重复精度±0.05 mm与现有X/Y平台共轨
AI推理单元实时残液判定Jetson Orin / Intel Movidius / FPGA<50 ms 单板推理
闭环指令根据检测结果调整洗头参数二次冲洗、延长抽吸或提高负压软PLC ↔ 微控制器

工作流程
①抽吸结束→②相机拍照→③AI计算残液热图→④若超阈值,则自动触发二次洗→⑤再拍照确认→⑥存档至LIMS。整个循环可压缩在3–4 s 内完成,不会拖慢连续板栈作业。


三、算法落地难点与解决策略

难点原因对策
液面反光/镜面噪声高表面张力液体+塑料壁光滑交叉偏振、HDR多曝光;引入深度ToF辅助
多色底物干扰TMB显色后呈深蓝,RGB阈值失效HSV/CIELab 色域转换;引入分光相机分通道处理
384/1536 孔浅液面检测液深<0.5 mm,纹理弱使用远心镜头 + 深度学习超分辨重建;孔壁阴影校正
气泡/挂壁膜误判泡沫与液面反射相似训练集中增加泡沫标签;结合时间序列差分验证

四、经济与合规价值盘点

  • 减少复测与溶液浪费:文献与厂内验证显示,每减少1 µL残液,可将背景噪声下降5–8%并节省约1 mL/板的洗液。

  • 符合法规与审计:GMP/ISO 15189强调“关键工艺监测可追溯”,图像与日志共同存档利于审计追溯与CAPA分析。

  • 降低人工巡检负担:成像 + AI 准确率>98%,取代人工肉眼检查,可节省1名质控员/班次。

  • 提升上下游兼容:视觉结果可与酶标仪光学结果交叉验证,构建端到端质量链。


五、应用案例速写

  1. 疫苗QC车间:某生物制品厂在流感HA抗原批放行环节上线双摄+U-Net系统,残液超阈率由4.5%降至0.3%,单批释放时间缩短30 min。

  2. CRO高通量筛选:在384孔酶抑制筛选线上,视觉闭环将洗涤失败率减半,并减少板面翘曲导致的假阴性。

  3. 移动方舱检测:偏远地区疾控中心把视觉检测集成在便携洗板-酶标一体机内,实现离网运行;Jetson板载AI在低带宽环境离线推理。


六、技术演进趋势

  • 多模态融合:联合电容液位、压力曲线与视觉特征,构建Sensor Fusion网络,进一步提升漏检鲁棒性。

  • 边缘-云协同训练:云端聚合多实验室“场景长尾”数据增量训练,边缘端滚动更新轻量版模型。

  • 联邦学习与数据隐私:在法规严格的IVD行业,可用联邦学习跨厂训练算法,避免原始影像离开本地服务器。

  • 可解释AI:Grad-CAM热图直观显示残液区域,为实验员提供工程调优依据,增强信任度。


七、实施建议与路线图

  1. 需求澄清:先评估残液对检测偏差的量化影响,确定ROI;如果<1 µL残液不影响实验,则不必过度投资。

  2. 试点验证:选取日常洗涤失败率>3%的项目作为PoC;推荐 5000 块板、≥10种底物作为训练集起点。

  3. 渐进集成:从离线视觉质控→联机“一键重洗”→全流程闭环三阶段,每阶段留出软硬件接口。

  4. 人机协同:UI提示与看板报警颜色应符合实验室SOP配色习惯,避免视觉疲劳;同时对算法“灰区”结果保留人工复核按钮。

  5. 维护与校准:定期使用标准透明液柱卡校准相机视场-孔位映射;更新模型时保留版本切换记录以满足审计。


结语

将图像识别技术与洗板过程深度耦合,为“看不见的残液”装上“慧眼”,不仅可实时校正洗涤步骤、提升实验一致性,也为符合GMP/ISO审计和降低试剂与人力成本提供了可量化的收益。随着深度学习、联邦训练和多模态传感器的成熟,未来洗板机将从“机械执行器”升级为具备自感知、自决策能力的智能节点,成为自动化实验室质量闭环的重要一环。