洗板机洗板步骤可否跳过验证？——实验室质量控制中的关键审视

一、引言：验证不仅是流程，更是实验质量保障

洗板机是现代生物实验、医学检验和药物开发等流程中不可或缺的设备，其作用是在微孔板检测前后，对孔内残留液进行程序化清洗，确保实验数据准确性和样品间无交叉干扰。尽管洗板步骤在流程中看似简单，但其对整个实验系统的结果稳定性和可靠性具有深远影响。

在实际操作或新方法开发中，有些实验人员可能出于效率考虑或经验判断，意图“跳过”对洗板步骤的验证环节。但从实验室质量管理体系的视角来看，这一做法是否合理？洗板步骤真的可以跳过验证吗？

本文将围绕这一核心问题，展开系统分析，并结合法规标准、实际案例、风险评估及方法学逻辑，为实验室使用者提供科学指导。

二、洗板步骤验证的基本含义

1. 什么是“验证”？

在实验室管理体系中，“验证”指的是通过客观证据证明某个过程、程序、设备或系统在预定用途下能可靠运行，并满足设定要求的活动。其核心目的是保障数据的可重复性、可追溯性和科学性。

2. 洗板步骤的验证范围

洗板步骤验证通常涵盖以下内容：

• 洗板程序有效性验证：检测残留物是否达到可接受标准；

• 交叉污染控制验证：是否存在孔与孔之间的液体传播；

• 程序稳定性验证：多次运行中清洗结果的一致性；

• 设备兼容性验证：洗板程序是否适配不同孔板和试剂；

• 清洗液选型验证：不同清洗缓冲液是否影响清洗质量。

三、为何一些实验跳过洗板步骤验证？

尽管验证具有重要意义，但在一些场景中仍存在“跳过验证”的行为，主要基于以下几种原因：

1. 方法沿用历史版本，认为已有验证

部分实验室在长期使用某一洗板程序的基础上，默认其已经“验证过”，而忽视了试剂更换、设备升级、参数调整后需要重新验证的要求。

2. 实验类型简单，清洗要求不高

某些初筛、教学或非关键型试验，对洗板精度要求较低，操作人员可能选择省略验证步骤以提升效率。

3. 缺乏验证知识或重视程度不足

部分实验室工作人员缺乏验证意识，或将其视为“繁文缛节”，忽略了对实验结果潜在影响的深层次风险。

四、洗板步骤跳过验证可能带来的风险

1. 数据不一致性增加

清洗不充分或过度清洗都可能导致数据偏差，特别在OD值临界样本附近，稍有残留即可能改变判断结论。

2. 假阳性或假阴性风险

残余抗原或底物在微孔中积聚，容易造成信号放大或抑制，直接影响结果判定，增加误判率。

3. 样本交叉污染

清洗不彻底使得高浓度样本的残留液进入相邻孔，引起“幽灵信号”现象，尤其在传染病检测中风险极高。

4. 方法合法性被质疑

跳过验证将无法向内部审计或外部审评（如FDA、CFDA、ISO等）提供流程合规证明，影响方法合法性和可接受性。

5. 设备损耗和效率下降

未经验证的清洗程序可能造成泵体过载、管路堵塞或液位传感器误报，影响设备寿命和运转稳定性。

五、法规与指南对洗板步骤验证的要求

1. FDA（美国食品药品监督管理局）

FDA在《21 CFR Part 820》中明确提出，所有与实验相关的过程必须“有据可查并验证其有效性，尤其在最终产品质量依赖该过程时”。

2. WHO GMP（世界卫生组织良好生产规范）

WHO GMP强调“所有关键步骤必须通过验证证明其能持续满足预定用途”，洗板程序在体外诊断产品检测中属于关键操作环节。

3. ISO 15189（医学实验室质量标准）

该标准规定“实验室应验证采用的程序，包括设备自动清洗步骤，确保其符合预期用途，并记录验证结果”。

4. CNAS-CL02（中国实验室认可准则）

强调设备程序参数变更后，必须重新验证与确认其可重复性与可接受性。

六、验证流程设计：如何科学验证洗板步骤？

1. 明确验证目的与范围

如：验证当前洗板程序能否有效清除孔内残留液体，是否能防止交叉污染。

2. 设计验证实验

• 使用显色液（如TMB）或高浓度样品检测残留；

• 采用“空白孔+强阳性孔”交替布板；

• 设置不同程序参数（洗液体积、次数、停留时间）进行比对。

3. 结果判断标准

• 空白孔OD ≤ 0.05；

• 邻孔差异控制在±10%以内；

• 清洗后重复性CV值 ≤ 5%；

• 残留液体量 ≤ 2 μL（通过称重法测量）。

4. 验证记录归档

每次验证后，应形成完整报告，包括：

• 实验日期；

• 所用程序与参数；

• 实验人员签名；

• 原始数据；

• 结论与建议。

七、实际案例分析

案例一：未验证导致交叉污染报警

某市疾控中心使用自动洗板程序进行乙肝抗体检测，因更换清洗液浓度但未重新验证洗板效果，导致高滴度样本残留进入空白孔，数百份样本需复测，造成资源浪费和社会关注。

案例二：验证确保流程一致性

某生物企业在开发新型ELISA试剂盒时，对三种不同洗板程序进行残留实验验证，最终选择5次清洗、每次加液350 µL、停留10秒的设置，确保了产品交付稳定性和用户满意度。

八、是否可以“局部验证”代替“全验证”？

在某些情境下，如：

• 原设备程序未变，仅试剂批次变化；

• 同类型实验切换；

• 程序调整幅度极小；

可考虑实施“等效验证”或“局部验证”，通过对比验证结果一致性来判断是否需重复整个验证流程。但即便如此，也必须进行记录与归档，并由主管人员批准，不能完全跳过验证。

九、未来趋势：自动验证与智能分析系统

1. 智能设备内置自验证模块

部分高端洗板机如Tecan、BioTek已集成洗板监控系统，可自动检测残留液、压力值、清洗流速等参数，并形成报告，简化验证流程。

2. 与LIMS系统联动

未来，洗板验证数据可直接上传至LIMS，实现验证周期提醒、参数调整提醒、远程审批，提升效率和合规性。

3. AI辅助优化洗板程序

通过机器学习算法自动识别最佳清洗参数组合，减少试错次数，保障数据稳定性与清洗效率双赢。

十、结语：洗板验证不可忽视，质量保障始于细节

尽管洗板步骤在流程中属于“技术细节”，但其对实验质量、结果可重复性和监管合规性起着重要支撑作用。跳过验证看似节省时间，却可能埋下重大隐患，尤其在医学诊断、疫苗研发、感染病监测等关键领域，洗板验证更是不可动摇的“安全底线”。

实验室管理者应建立科学、合理、高效的洗板验证体系，不仅仅是对规范的遵循，更是对科学结果的尊重，对公众健康的负责。