洗板机洗板过程如何质控？
一、引言：洗板质控的重要性
洗板机（Microplate Washer）是 ELISA、细胞培养、病毒检测、免疫分析等高通量实验中的关键设备之一。其核心功能是自动化完成微孔板中样本或试剂的冲洗与抽吸操作，以减少背景干扰、提高比值信噪比及孔间一致性。然而，若洗板质量控制不到位，极易导致假阳性、假阴性、边缘效应、残液干扰等现象，严重时甚至使整批实验作废。因此，建立科学、全面、系统化的洗板质控流程是保障实验准确性与重现性的必要环节。
本节将围绕洗板全过程，逐步解构质控关键点，涵盖设备性能验证、参数校正、耗材管理、操作行为规范、故障响应策略、记录归档制度等内容，构建完整的质控闭环。
二、洗板质控的总体原则
预防为主，标准先行：通过SOP标准操作流程减少人为偏差。
过程监测，数据验证：不仅记录参数，更对结果实施实时评估。
闭环机制，持续改进：质控发现问题后可追踪、修正并归档。
合规对标，文档齐备：确保符合GLP、ISO 15189、GMP等体系审计要求。
三、洗板机质控的主要维度
3.1 设备状态质控
3.1.1 安装与定期验证
安装后IQ/OQ/PQ确认：确认进液管接通、通道畅通、无漏液
年度功能验证（OQ）：检查泵压、针头移动轨迹、吸液时间等
运行小时累计监测：每达厂家推荐换泵时间（如2000h）应预检更换
3.1.2 自检功能使用
多数洗板机具备“系统测试”、“空运行”等内建程序，应每周使用1次检查：
洗液泵工作是否平稳无波动
每路针头出液是否均匀
废液抽吸是否通畅
3.2 洗板参数质控
3.2.1 标准化参数设定
SOP中明确设定以下关键参数区间：
| 参数名称 | 推荐值（ELISA常规） |
|---|---|
| 每孔洗液体积 | 300 μL |
| 洗涤轮次 | 3~5次 |
| 吸头距板底高度 | 0.5~1 mm |
| 浸泡时间 | 每轮10~30秒 |
| 吸液延迟 | 2~3秒 |
3.2.2 多人操作一致性控制
所有操作者必须使用命名的程序模板
禁止现场手动修改参数值，若需更动，需填写变更审批记录
3.3 洗液与耗材质控
3.3.1 洗液来源控制
使用厂家推荐浓度的1×缓冲液（如PBS、TBST）
记录洗液批号、配制时间、有效期
每周换新，防止微生物污染和沉淀析出
3.3.2 吸头与废液系统监测
检查针头是否有堵塞、弯曲或脱落
废液瓶不得超过3/4满，应每日更换
吸头与管道建议每周用0.5%NaOH冲洗防结垢
3.4 洗板效果评价质控
3.4.1 孔间背景一致性测试
在空板中加洗液后抽吸，检测各孔残液光密度
若某孔 OD450 >0.05，说明冲洗不完全或管路问题
3.4.2 “边缘效应”观察
加入染料洗板后比对A-H与中间孔 OD 值变化，若边缘值偏差>10%，考虑针头行程或温差问题
3.4.3 阳性/阴性孔比对
实验中随机设置一排空白孔，对比是否出现交叉污染迹象
使用含色素模拟液观察孔间液体残留
3.5 操作行为质控
3.5.1 洗前操作检查
检查吸头对准度，防止刺穿孔底
确保板位固定不偏移
打开设备空气滤芯，防负压失效
3.5.2 洗后操作核查
仔细观察吸液后孔中是否仍有液体残留
每次洗板后操作员应填写操作记录表，包括：
操作时间
洗板程序名称
洗液批次
异常标注（如冲洗不完全）
3.5.3 培训与考核制度
所有洗板相关人员需定期接受再培训
建立操作模拟平台供新手上岗前练习
每季度一次考核洗板规范动作及参数设定能力
3.6 异常处理与应急预案
| 异常类型 | 可能原因 | 应急处理 |
|---|---|---|
| 部分孔无液体残留 | 喷针堵塞、泵老化 | 停机检查针头通畅性、更换泵膜 |
| 全板残液多 | 吸头高度过高 | 重新校准吸头位置 |
| 冲洗后泡沫残留 | 洗液含表面活性剂 | 改用无泡缓冲液，添加消泡剂 |
| 某通道不出液 | 管路折叠、泵气堵 | 检查管路并空载运行清洗 |
| 同板孔间信号差距大 | 冲洗时间不均 | 更换吸头、更新程序、调整流速 |
所有异常均需填写《质控偏差记录表》，标明根因分析与整改措施，并由质控负责人审核签字。
四、建立洗板质控记录与追溯系统
4.1 日常记录模板
《洗板操作记录表》包含如下内容：
日期与时间
洗板任务编号
操作员签名
使用设备编号
程序名称与参数快照
洗液信息：种类、批号、配制人
异常情况记录
4.2 电子记录系统对接
若使用电子实验记录系统（ELN）、LIMS，可配置接口自动拉取洗板程序日志
所有数据应遵循21 CFR Part 11标准，具备电子签名与不可篡改审计轨迹
五、内控验证与外部评审支持
5.1 实验室内部质控计划
每季度统计洗板异常次数，追踪趋势
每半年做一次“假设条件盲测”，验证参数是否稳定
5.2 外部审计符合性要求
ISO 15189 要求洗板程序明确、记录完备、人员培训有据可查
GLP 审计时会检查仪器是否定期校准、参数是否经批准变更
医疗器械/药品注册时，质控数据是注册检验的组成部分之一
六、洗板机质控的持续改进机制
异常数据趋势分析：通过质控报告形成热图，识别问题多发时间/人员/流程环节
SOP 动态修订：质控发现系统性问题后，立即修订操作规程并组织再培训
年度质控总结会议：质控员、技术主管、操作员共同回顾洗板质量执行情况
流程数字化升级：引入扫码追踪、流程自动记录模块，降低人为疏忽率
七、结语
洗板机虽非核心反应设备，但其对实验成败的影响却常常被低估。唯有将洗板过程纳入与试剂配置、样本处理同等重要的质量控制系统，通过事前设定、事中监控、事后追踪三位一体的控制结构，才能构建真正稳定、高效、合规的实验平台。
从流程细节到文档规范，从人员素养到数字工具，洗板质控已不再只是“观察有没有残液”那么简单，而是一套支撑科研与产业化精准运转的“微系统工程”。一台洗板机，连接的是数据的可靠性、质量体系的完整性，甚至科研成果的公信力。
