洗板机可使用哪些清洗液？——种类解析与应用指导

一、引言：洗板质量的关键在于清洗液的科学选择

在ELISA、免疫分析、细胞实验等多种微孔板实验流程中，洗板机负责清除未结合的生物分子和反应残余物，是保证实验数据可靠性和重复性的核心环节。而洗板效果的优劣不仅取决于设备性能，更在于所使用清洗液的种类和质量。

市面上洗板机所用清洗液种类繁多，功能各异，许多实验人员在选择时常感困惑：到底应该选哪一种？不同实验是否需要不同的清洗液？清洗液能否自配？有哪些使用误区？本篇文章将系统解答这些问题，帮助您实现高效、稳定、安全的洗板操作。

二、洗板机专用清洗液的分类与作用机制

洗板机所用清洗液按照其主要成分和功能，大致可分为以下几类：

1. 缓冲型清洗液（PBS或Tris基）

成分特点：

• 主要为磷酸盐缓冲液（PBS）或三羟甲基氨基甲烷（Tris）；

• 通常添加NaCl或KCl调节离子强度；

• pH值控制在7.2–7.6之间。

主要用途：

• ELISA常规清洗；

• 蛋白结合试验后孔壁冲洗；

• 防止蛋白变性或结构破坏。

优势：

• 成分温和，不破坏抗原抗体结合；

• 与绝大多数酶标试剂盒兼容。

2. 表面活性剂型清洗液（含Tween-20）

成分特点：

• 在缓冲液基础上加入0.05%~0.1%的Tween-20（聚山梨酯）；

• 可降低表面张力，增强孔壁清洗效果。

主要用途：

• 去除非特异性吸附物；

• 清洗高背景ELISA实验的孔板；

• 洗净多余抗体、底物或杂质蛋白。

特点优势：

• 显著减少非特异结合；

• 提高信噪比，降低背景值。

3. 强洗型清洗液（含碱或弱腐蚀成分）

常见成分：

• 稀释的氢氧化钠、乙醇胺、或弱碱性皂化剂；

• 部分产品添加EDTA去除钙镁离子。

适用场景：

• 高粘性样本（如脂肪、血浆）；

• 特殊蛋白沉积后洗板；

• 排除蛋白沉积堵针的情况。

使用建议：

• 不适合用于含酶试剂（如HRP）的实验；

• 应用后务必使用去离子水冲洗干净。

4. 酶抑制型或低酶抑制型清洗液

特点说明：

• 不含有机溶剂和重金属离子；

• 保持HRP或AP等标记酶活性；

• 清洗后不影响显色反应的进行。

主要应用：

• 酶联免疫分析（特别是化学发光）；

• 需要高灵敏度检测时使用。

5. 消毒/防腐型清洗液

成分结构：

• 加入少量苯扎氯铵、叠氮钠（NaN₃）等防腐剂；

• 可长时间保持储液罐中液体不被污染。

应用建议：

• 用于长期不更换洗液的系统；

• 注意叠氮钠可能与金属反应产生有毒气体，需谨慎处理。

三、清洗液的配制与使用规范

1. 商用成品清洗液

• 优势：成分稳定、批次一致性好；

• 用法：开瓶即用或按比例稀释（常见为10×浓缩液）；

• 代表品牌：Sigma-Aldrich、Thermo、BioTek、Tecan、Rayto。

2. 实验室自配清洗液（PBS + Tween）

常用配方示例：

• NaCl：8.0 g

• KCl：0.2 g

• Na₂HPO₄：1.44 g

• KH₂PO₄：0.24 g

• Tween-20：0.5 mL（0.05%）

• 水定容至1000 mL，pH调至7.4

注意事项：

• 每周新配，避免细菌滋生；

• 若需长期保存，建议过滤除菌后冷藏保存；

• 自配液用于关键检测时应通过性能验证。

四、不同实验类型对清洗液的选择要求

五、清洗液使用中的常见误区与风险规避

1. 使用水代替清洗液

虽然去离子水表面上可清洗孔内液体，但不具备缓冲和非特异结合去除功能，会导致实验背景升高和重复性下降。

2. 清洗液长期未更换

多次使用同一瓶清洗液，会因污染、pH变化、离子浓度不稳而影响效果，甚至造成微生物滋生。

3. 清洗液残留影响读板

未充分排出清洗液，尤其含Tween者，可能干扰显色或发光信号，应配合空吸程序与晾干步骤。

4. 未检查洗板机兼容性

部分老型号洗板机不适合含泡沫剂的清洗液，如泡沫阻碍传感器判断，可能误报警或吸空。

六、洗板机与清洗液兼容性的技术匹配建议