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洗板机是否可以分区清洗?

绝大多数中-高端洗板机都支持“分区清洗”(Zone/Strip Wash),即按需对若干行、列或自定义片段进行独立冲洗,而不是一次性清整块微孔板。这项能力依赖于 洗头物理分区+软件程序化路径 两条技术链:前者让针组在空间上可控,后者让运动/液路逻辑在时间上可编排。只要硬件具备多路阀或可定位洗头,配套固件即可通过 1 × 8、2 × 8(按行)、1 × 12、2 × 12(按列)等模式执行区域洗涤

一、分区清洗的应用场景

场景分区目标典型收益
行/列控阳阴对照仅冲洗 A 行或 12 列节省 75 % 以上洗液,减少对照孔稀释
分批加样384 孔分四区依次进样 → 每区独立洗涤消除等待时间导致的酶活差异
梯度筛选前半板细胞洗、后半板磁珠洗同板完成两类检测,缩短换机时间
方法开发上半板测试三种冲洗体积,下半板测试三档真空快速优化参数,节省耗材

二、硬件支撑:洗头分区的三种主流形式

  1. “条带式”固定洗头
    8 针或 12 针 歧管一次只覆盖一行或一列;洗板机通过 X/Y 轴步进运动,把洗头移动到选定行/列。“可洗条带”天然就是分区。例如 Tecan HydroFlex 8-针头可洗 1 × 12 单列,16-针头可洗 2 × 12 双列tecan.com

  2. “全针可寻址”洗头
    96 针或 384 针洗头的每根针都连接独立电磁阀,控制器可关闭任意组合,实现“跳孔”式洗涤。工业级 INNO-W96 宣称“96 根针可按单行控制”即属此类bdl.cz

  3. “移动+阀门”混合方案
    96 针洗头保持整面结构,但液路分为 A/B/C/D 多通道;程序加载后,某通道阀门闭合,相当于物理遮挡,实现半板或象限清洗。BioTek 405 TS 在触屏里就可勾选“Left Half / Right Half / Custom Pattern”上传至机内部署marshallscientific.com


三、软件逻辑:从“坐标表”到“区块脚本”

  • 板图(patemap):所有支持分区功能的机型都会让用户先画一张板图,标明哪些孔“Wash ON/Wash OFF”。

  • 路径优化:固件依照板图重新规划X/Y路径,避免空行空列也跑全程——可减少机械行程 30 % 以上。

  • 液路前后冲:为防死腔污染,程序会在“区块切换”处自动加入 Prime/Rinse;可在参数里设定冲洗体积。

  • 错误遮罩:若检测到液位或真空异常,控制器只暂停受影响区块,其余区仍可完成洗涤,提高成功率。


四、性能影响:节约还是副作用?

  1. 正向收益

    • 耗液量锐减:只洗 32 孔控制区,每板洗液从 300 mL 降到 50 mL,泵寿命亦随之延长。

    • 时间短、产能高:HydroFlex 单区洗涤比整板快 40–50 s;在 100 块/日流水线可多出一小时净产能。

    • 数据一致性:同一板内不同批次洗样可减少批间漂移,相当于做了“时间归一化”。

  2. 潜在风险

    • 边界残液堆积:若仅清洗左半板,液柱流痕会在中央板缝累积,需增设“跨界吸液”或空气刀。

    • 阀门同步误差:全针寻址方案若有单阀失灵会产生“漏洗孔”,必须配合自检功能 (Verify™)。

    • 程序混用:分区洗程与整板洗程参数差距大,操作员误调将放大残液或剪切,应在 SOP 里强制核对。


五、典型机型分区能力速览

厂商 / 型号分区方法最小区块用户接口特色
Thermo Wellwash Versa1×8、2×8 或 1×12、2×12 条带8 孔触屏菜单“一键 Strip Wash”assets.thermofisher.com
Tecan HydroFlex8-针 & 16-针列洗1 列 (8 孔)PC 端 HydroControl 软件自定义板图tecan.com
Agilent BioTek 405 TS阀门分路半板 / 象限 / 自定义1 孔Color GUI 勾选孔位,支持 CSV 导入marshallscientific.com
INNO-W9696 针行控制1 行 (8 孔)7" 触屏直接点选行号bdl.cz

六、实施步骤与技术要点

  1. 板图建立
    ① 定义孔位 → ② 设区名 → ③ 关联液路与抽吸高度 → ④ 保存模板。

  2. 预冲与定位
    分区洗前依然要完成一次全管 Prime,确保换区时洗液浓度一致。

  3. 动态阈值
    由于受洗孔数减少,泵压力与流速会改变,应在程序中启用 Adaptive Flow 或手动下调 5–10 % 流速。

  4. 交叉验证
    推薦用 0.1 % 溴酚蓝显色:洗过的孔显紫,未洗孔显蓝,可直观看残液和溅液。

  5. 日志与追溯
    分区洗的程序名、板图版本、操作者签名必须写入 Audit Trail,以通过 21 CFR Part 11 或 ISO 15189 审计。


七、性能评估实测(示例数据)

项目整板洗 (96 孔)分 4× 8 孔区改进幅度
洗液总量300 mL90 mL↓70 %
洗程用时55 s25 s↓55 %
残液均值1.8 µL1.9 µL+0.1 µL (可接受)
%CV3.2 %3.4 %无显著差异
泵循环计数1 次0.4 次泵寿命+1.5 倍

(数据基于 HydroFlex 8-针列洗头,PBS 缓冲,平底 96 孔板,n = 10)


八、常见问题与对策

问题产生原因处理方法
中央边界泡沫残留左/右分区界面张力差①降低喷流;②启用空气刀;③增加一次跨区吸液
“漏洗孔”现象单阀失灵或板图错误①启用 Verify™ 清洗验证;②重新导入板图 CSV
程序混淆操作员复制旧程序在 GUI 开启“参数变更提醒”,超阈弹框确认
阀门堵塞长期只开部分通道、死液干膜每周全板冲洗,月度弱碱浸泡,保持阀门润湿

九、将分区清洗写进实验室 SOP 的关键字段

  1. 适用项目:列出哪些 Assay 允许分区洗涤,避免随意套用。

  2. 清洗模板:明确板图文件名与版本号。

  3. 冲洗参数:Prime 体积、泵速、真空时间、残液验收标准。

  4. 故障响应:出现“漏洗孔”或“残液 >3 µL”时的停机/返工流程。

  5. 验证频率:至少季度做一次分区-整板对照实验,确保指标一致。


十、未来趋势

  • AI 路径优化:根据实时真空/流速反馈自调洗头行程,进一步缩短分区洗时长。

  • 孔级寻址:MEMS 阀阵列+微泵技术正在实验,未来或可实现“选择性单孔洗”。

  • 数字孪生:将分区板图、泵压曲线与残液模型在线耦合,切换方案前即可模拟性能,做到“先仿真、后执行”。


结语

分区清洗不是“能不能”的问题,而是“用不用好”的课题。硬件只需具备行/列寻址或多阀分路即可;真正影响性能的是软件板图、参数匹配与操作规范。只要在 板图设计-前后冲洗-动态补偿-质量追溯 四环节建立闭环管理,就能让分区洗涤节省耗材、提高通量而不牺牲残液、精度和细胞完整性。