机在板式检测（如ELISA、CLIA、TRF）中扮演关键角色，特别是在清洗步骤中的吸液阶段，其效率和彻底性直接影响：

• 洗液残留量大小

• 孔间差异性（CV%）

• 洗净度与信号背景比

• 整体清洗时间与节奏控制

在不同实验条件（孔板类型、样品粘稠度、震荡程序等）下，合理设定吸液时间对于保证清洗效果、延长设备寿命及优化实验流程都具有非常重要的意义。

二、什么是“吸液时间”？

吸液时间是指在一次清洗循环中，洗板机吸头针尖开始抽取孔内液体至结束为止的持续时间。常用单位为秒（s）或毫秒（ms）。

通常包括三个阶段：

1. 吸液启动延迟（Delay）：吸针刚接触液面后的静置延时；

2. 吸液持续时间（Aspiration Time）：泵维持负压实际抽液的过程；

3. 收尾停留（Hold）：抽干后保持负压时间，避免残留液回流；

多数洗板机将这三者综合设置为一个总的“吸液时长”参数。

三、吸液时间的默认设置与范围

不同品牌、不同型号的洗板机，其出厂或默认吸液时间略有差异：

注：吸液时间过短会导致残留液体；过长则会延误整个流程甚至损害泵寿命。

四、吸液时间调节的主要控制方式

1. 通过仪器面板设置

大多数独立洗板机内置液晶触屏/按键菜单，在“程序设定”项中找到：

• 吸液时间（Aspiration Time）

• 吸液速度（Flow Rate）

• 吸液高度（Depth）

根据实际需求修改秒数并保存程序即可。

2. 通过PC软件控制

高端洗板机配套软件（如BioTek LHC、Tecan HydroControl）支持：

• 吸液时间精调（如0.1秒级）；

• 复杂子程序管理（多吸头同步/异步吸液）；

• 脚本编辑：如设定“吸1秒→暂停0.5秒→重复一次”；

3. 通过自动化平台接口控制

在自动化液体处理系统中（如Hamilton、Tecan Freedom EVO平台），吸液时间常由中央调度系统统一控制，通过洗板机API接口写入指令：

此方式适用于流程调度/机器人平台。

五、影响吸液时间设置的关键因素

1. 孔板类型

2. 液体性质

• 高蛋白或高盐样品：粘度大，需延长吸液时间；

• 含泡沫/表面活性剂液体：易产生回流，应增加吸液时间或设置停留；

• 温度较低液体：黏滞性提升，也需适当延长抽吸时间；

3. 吸液速度与压力

• 高速抽吸需较短时间，但可能形成涡流或拉泡；

• 若泵或真空系统老化，实际抽吸效率降低，需手动延长时间补偿。

4. 吸液高度

• 吸头若距孔底过近，会在液未完全抽干前已停止抽吸；

• 设置过高又可能抽取不完全，残留偏大；

• 合理吸头高度结合吸液时间，是残留控制的关键。

六、吸液时间调节对实验性能的影响

七、特殊程序中的吸液时间策略

1. ELISA常规检测

• 吸液时间设定：0.8–1.2秒；

• 配合中等吸液速度与1 mm吸头悬空距离；

• 可在最后一轮清洗后延长吸液时间以提升干净度；

2. CLIA磁颗粒清洗

• 强烈建议设定为**≥1.5秒**；

• 保证磁场固定条件下液面下降缓慢、不扰动磁珠；

• 吸头避免触碰板底/磁环；

3. 时间分辨荧光（TRF）检测

• 吸液设置以最小残留为目标，可采用“双吸液程序”：第一次0.8秒，第二次0.5秒；

• 最后一吸可加入延时（Hold）0.3秒，以去除尾液；

4. 高通量自动平台

• 吸液时间常设为0.7–0.9秒，以节拍均衡为优先；

• 可同步设置多个吸头，以平均负载和降低误差；

八、吸液时间设定流程（实操范例）

目标：将96孔板洗净残留控制在≤1 μL/孔，CV≤10%

1. 初始设定吸液时间为0.8秒

2. 运行1块96孔板，使用重量法测残留体积

3. 若残留 >1.2 μL/孔 → 增加吸液时间至1.2秒

4. 若残留差异大 → 检查吸头水平校准，适当调吸头深度

5. 最终设定稳定后，保存程序为模板供后续批量使用

九、常见误区与错误操作

十、吸液时间优化的实际应用价值

• 提升清洗效率：减少无效停留时间；

• 提高洗净效果：通过残留减少降低背景干扰；

• 增强实验重复性：不同板、不同批次洗净一致；

• 延长设备寿命：避免泵过抽或干抽；

• 适配多样实验需求：不同孔板、样品、液体可匹配定制流程；

十一、结语：如何科学设置吸液时间？

核心建议如下：

十二、附表：吸液时间优化检查表