洗板机洗板前需要做哪些准备？
一、引言与意义
在微孔板实验流程中，洗板机承担着“清除未结合物质、避免交叉污染、降低背景噪声”的关键角色。一次成功的洗涤，不仅需要仪器本身的功能正常、程序设置得当，更离不开实验人员在洗板前进行的充分准备工作。若忽略前期准备，容易出现洗板不彻底、交叉污染、假阳性/假阴性等问题，最终导致实验数据失真。为了保证实验结果的可靠性与可重复性，本文从实验室环境、设备状态、试剂准备、安全与人员培训等多个维度，详细阐述洗板机洗板前需要做的准备工作，帮助实验人员形成系统化的操作流程。
二、实验室环境与制度准备
实验室清洁与动线规划
将洗板机放置在干净、平整的台面上，保持周边无杂物堆积。
确保室内温湿度控制在 20–25℃、相对湿度 40%–60% 范围内，避免过高湿度导致管路潮湿或过低湿度引发静电。
实验室内应有明确的“洗板区”“加样区”“读板区”分区，避免试剂与废液交叉干扰。
定期对地面、台面进行紫外灯或稀释消毒剂擦拭，减少微生物污染风险。
实验室制度与 SOP 编写
制定并张贴《洗板机使用与维护SOP》，从开机自检到关机冲洗都要有明确流程。
确定“谁可以操作洗板机”“每日或每周的维护频率”“故障上报流程”等管理制度。
保持《设备使用登记表》《维护记录表》完备，便于追溯和质控。
电力与网络环境检查
洗板机通常需要稳定的交流电源，检查电压波动情况，使用专用插座并接入稳压器或 UPS，防止突然断电导致程序中断或数据丢失。
若洗板机具备网络功能（如远程监控、程序更新），确保局域网环境安全、IP 设置正确并可访问厂家升级服务器。
三、设备硬件与软件检查
外观与机体检查
检查机体是否平整稳固：通过水平仪或目测确认洗板机四脚支撑牢固，整机无晃动，振动平台与底座无松动螺丝。
查看机壳与面板：确认不存在裂缝、严重划痕或漏液迹象，面板按钮无损坏。
喷针/吸针组件检查
取下喷针/吸针组件，检查针头是否有堵塞、弯折或表面沉积物。若发现污染或弯曲，用超声波清洗或专用通针工具彻底清理，恢复针头流畅。
观察喷针周围 O 形圈或密封圈是否老化、裂纹或脱落，必要时更换新的密封圈，保证无泄漏。
泵与气动系统检测
检查真空泵/负压泵工作状态：开机空载运行几秒，听有没有异常异响或振动，查看管路接头连接是否紧固，无漏气或漏液。
检查气压或空气压缩系统：若洗板机带有吹气功能，验证压缩空气或外接气源气压是否稳定在说明书推荐范围内（一般为 0.2–0.4 MPa）。
仔细观察液泵（蠕动泵或隔膜泵）运转时是否输出均匀流量，有无滴漏现象。
平台与升降系统校准
测试吸针/喷针升降行程：在手动模式下控制针头上下移动，观察行程是否平稳，无卡顿或偏移。
校准平台水平：用水平仪或托盘水，放置一块干燥孔板，确认吸针插入孔时位置准确，避免偏离孔壁或与孔底碰撞。
软件与程序自检
在洗板机自带触摸屏或 PC 软件界面上，进入“系统自检”或“诊断”模式，运行仪器自检程序，检查液位传感、温度传感（若有）、按键和显示屏是否响应正常。
确认软件版本与厂商推荐的最新版本一致，避免由于版本不匹配导致兼容性或程序稳定性问题。若需要升级，先备份原有系统数据，再按厂家指引操作。
校对洗板参数设置模板：读取日常使用的清洗方法模板，确保程序中“吸液深度”“喷液体积”“循环次数”“振荡时间”等参数正确无误。
四、试剂与耗材准备
洗涤缓冲液
根据实验需求配制适当浓度的PBS或Tris缓冲液，若需要加入表面活性剂（如Tween-20）减少蛋白附着，浓度一般控制在0.05%–0.1%。
配制时应使用超纯水或至少18.2 MΩ·cm水，避免一般自来水中离子沉淀导致管路堵塞。
配制完成后先将缓冲液静置10–20分钟，充分消泡，再倒入洗液储液瓶。若有必要，可在4℃下过夜沉淀杂质，再于使用前回温至室温，避免温差太大导致气泡。
消毒剂与清洁剂
根据SOP，准备70%医用酒精或0.5%–1%次氯酸钠溶液，用于仪器外部擦拭及管路深度清洗。
准备专业清洗液或通针水（如ProteoClean、PipeCleaner），用于周期性深度疏通喷针/吸针内部。
准备超声波清洗机与相应清洗槽，可在每周或每月维护时对喷针组件进行超声清洗，以去除微量蛋白聚集物或沉淀。
耗材与配件
确保洗液储液瓶、废液桶、导管接口、膜过滤器（可选）、O型圈、针套等所需配件完备并处于良好状态。
如洗板机需要使用一次性过滤器，检查过滤器孔径（一般为0.22 μm）是否合适，避免微生物污染管路；若过滤器一次性使用，应有足够库存。
注意准备备用喷针/吸针组件，若在清洗前发现损坏或堵塞，能够立即更换，避免实验中断。
孔板与试剂板材选择
选用品质良好的一次性聚苯乙烯（PS）或聚丙烯（PP）微孔板，避免使用表面粗糙或处理层不稳定的低端板材。
根据实验要求，选择平底板/圆底板/U型底板或黑色/白色/透明板，确保孔深、孔径与洗板机吸针/喷针匹配。
開箱前檢查孔板包裝的完整性，避免受潮或污染。使用时佩戴一次性手套，避免指纹或皮脂残留。
五、安全与个人防护
个人防护装备（PPE）佩戴
操作洗板机前，必须佩戴实验服、一次性手套与防护眼镜。若使用含次氯酸钠等强氧化性清洗剂，还需配备耐化学品手套与面罩，避免溅液伤及皮肤或眼睛。
化学安全
配制含Tween-20、次氯酸钠等清洗溶液时，要在通风橱或通风柜内操作，防止气味或气溶胶对呼吸道造成刺激。
将废液收集在专用废液桶中，分类存放并及时处理，不可随意倒入下水道；对含有强氧化剂的废液，需先进行中和（如用Na₂S₂O₃中和次氯酸钠）。
生物安全
若实验涉及病原体或活细胞，洗板机残留可能存在生物危害。清洗前先将管路内残留物活化灭菌（如加入含0.5%次氯酸钠孵育10分钟），再进行常规冲洗，避免操作人员受到暴露风险。
定期对洗板机内部管路进行高温高压灭菌，或使用专用的化学灭菌剂消毒，确保微生物无法在管路内滋生。
电气安全
在对设备进行深度清洁或更换线路部件前，务必先断开电源并关闭气源，防止意外触电或气体泄漏。
检查电源线与插座的绝缘层是否完好，无破损或裸露导线，避免因管路漏液引发短路。
六、程序与参数设置
选用合适的清洗程序模板
根据实验类型（ELISA 样本洗涤、细胞培养洗涤、荧光检测预洗等），选择或新建适合的清洗程序，明确包括“喷液体积”“吸液深度”“循环次数”“浸泡时间”“振荡时长”“吹气时间”等关键参数。
若实验需要温控洗板（如某些热敏反应），需先确认洗板机具备板温控制模块，并设置好目标温度和启停温差。
校对吸液深度与喷液高度
在程序设置中，吸液深度一般设为距离孔底 0.2–0.5 mm；若孔板为 U 型底或 V 型底，可适当增大吸液深度，避免 остаточные液体粘附。
喷液高度需保证既能覆盖孔壁顶部，又不会引起飞溅，一般建议距离孔板顶盖 3–5 mm。可通过“手动模式”先进行测试，再在程序中进行参数微调。
振荡与浸泡的组合
若目标被清洗物质较难解离（如高亲和力抗体结合、黏稠蛋白样本），需在洗板程序中加入“先喷液→短暂浸泡 15–30 秒→振荡 5–10 秒→再喷液”的步骤组合，以提高解附效率。
若实验对时间敏感，可适当减少每次浸泡长度，但需确保至少 2–3 秒的基本浸泡时间，以便洗液与孔壁充分接触。
吹气与压力调整
若洗板机支持吹气或空气辅助抽液，可在最后一次吸液后加入 2–3 秒吹气步骤，将残余微量液滴吹离孔底，提高洗净率。
根据气源压力等级（一般 0.2–0.4 MPa）调整吹气时间，过短可能吹不干净，过长则可能吹起泡沫或损伤液膜。
程序预演与虚拟测试
在真正开始洗板前，可先在“空板”或废旧孔板上运行一次完整程序，对每一步骤的流量、声音和针头运动轨迹进行观察，确认无异常后再对正式样本执行。
对于标准化要求更高的实验（如注册试剂盒 QC、GMP 生产线检验），建议将程序的“关键步骤”导出成文档，每次洗板前进行核对、签字，并纳入质量管理体系审计范围。
七、人员培训与分工明确
操作员培训
新手培训内容包括：仪器结构与功能介绍、日常维护要点、常见故障排除、SOP 步骤演示、应急处理流程等。
培训后进行实操考核，确认能独立完成从“开机→检查→程序设置→装板→加洗涤液→运行→关机冲洗→记录”整个流程。
分工与权限管理
合理划分“操作员”“维护工程师”“质控主管”“设备管理员”等角色。只有经过授权的人员才能对设备进行高级设置、更改程序或升级固件。
建立“谁洗板，谁负责”原则，每次运行必须有操作员签名确认；洗板后若发现问题，可快速定位到当班人员并及时整改。
培训内容更新与复训
随着仪器固件升级、实验项目变化、SOP 优化等情况，需定期（每半年或每次重大更新后）组织复训。及时将新功能、新风险点纳入培训内容。
记录培训考核结果，并将培训计划纳入质量管理体系，确保知识传承与持续改进。
八、文档与记录准备
设备检查清单
制作一份《洗板机开机前检查表》，包括：外观检查、针头状态、泵与气源测试、软件版本校对、程序模板核对、洗液准备情况等条目，操作员需在表格上签字确认。
试剂与耗材领用记录
对每一次洗液配制、消毒剂使用、耗材更换都要在《仓库领用簿》或电子系统中记录，明确批号、配制日期、操作人员姓名；确保可追溯。
维护与故障维修记录
每次对喷针、泵、气路或电路进行维护或更换时，填写《设备维护日志》，内容包括：维护项目、操作人、维护时间、使用配件、试运行结果等。
若发生设备故障或洗板失败，要及时填写《设备故障报告》，并附上问题现象、初步诊断、修复方案和验证结果，便于长期质量跟踪。
实验记录与数据档案
洗板本身不生成实验数据，但要在样本处理日志中注明“洗板时间”“洗板程序”“使用洗液”等信息，将该记录与最终读板数据关联，以便后续偏差调查。
对于需要 GMP/GLP/ISO 监管的实验项目，应将这些记录纳入电子或纸质质量管理档案，保留不少于规定期限（如不少于两年或更长）。
九、常见注意事项与易错点提示
洗液温度与消泡
冲洗用的缓冲液若过凉（<10℃），流动性差且易产生气泡，影响喷头出液一致性。建议使用室温（20–25℃）洗液，并在加液前静置去泡。
加入 Tween-20 等表面活性剂后，更容易产生小气泡，必须充分混匀并静置 15–20 分钟消泡。
废液排放顺畅
确保废液桶容量足够，以免洗瓶过满回流至管路。废液管路要保持倾斜，杜绝反水。
定期清理废液桶与导管，以防生物膜滋生或盐析沉淀，导致废液倒流。
孔板型号与针头匹配
不同品牌孔板（如聚苯乙烯、聚丙烯、玻璃底）厚度略有差异，若吸针/喷针位置参数不调整，极易导致“偏离孔中心”“穿孔”或“洗不干净”。
在更换孔板型号后，务必重新测试程序的吸液深度参数，以找到最佳平衡点。
软件参数误操作风险
操作中若不小心覆盖了原有的“标准洗板模板”，可能导致整个实验程序出错。建议对重要模板设置“只读”权限，或定期备份程序文件到外部存储。
在运行前查看程序界面，确保所选程序名称与说明一致，避免混淆不同实验要求所需的循环次数与吸液速度。
管路积液与细菌滋生
洗板机长时间不用，如管路内存留少量洗液，易滋生细菌，产生生物膜，影响后续清洗效果。定期（如每周）用 70% 酒精或含氯消毒剂进行快速冲洗，保持管路干净。
十、总结与持续改进
洗板机作为自动化微孔板实验中的重要环节，其性能不仅取决于硬件本身，更离不开实验前的充分准备与规范操作。本文从实验室环境、设备硬件与软件检查、试剂与耗材准备、安全与个人防护、参数设置、人员培训、记录与文档以及常见注意事项多个角度，详细阐述了洗板机洗板前必须完成的准备工作。实践中，若实验人员能将上述各项工作形成书面化、规范化流程，不仅能大幅降低洗板失败率，还能提高实验室整体效率与数据可信度。
在今后工作中，可结合实验室自身情况，持续优化并完善以下几方面内容：
定期评估与反馈：通过月度或季度质量评审，统计洗板故障率与背景偏高样本比例，将数据反馈给维护团队进行改进。
新技术应用：关注具有自动吹气检测、残液光学识别等新功能的洗板机，不断提升清洗效率。
培训与文化建设：除了技能培训，还要培养实验人员“细节决定成败”的理念，让每个人都能意识到“洗板前的准备”对最终数据质量的重要性。
