一、引言：一瓶CO₂，支撑整个微环境的稳定性

Thermo 3131 CO₂培养箱维持5.0% ±0.2%的腔体气体浓度，是细胞培养成功的关键。而这一稳定浓度的实现，依赖于：

• 精准控制系统（红外/TC传感器）；

• 实时反馈回路；

• 持续供应压力稳定的二氧化碳气源。

✅ CO₂钢瓶作为供气系统的“心脏”，每次更换都需标准流程操作，以防污染、冲击、接头泄漏或浓度异常。

二、Heracell 3131所用CO₂气体系统组成简述

✅ 所有部件均应符合ISO气体安全标准与培养箱兼容性。

三、更换CO₂钢瓶前的准备工作

 1. 所需材料与工具：

• 满瓶 CO₂（食品级或医用级，纯度≥99.995%）；

• 配套双表减压阀（表1测瓶压，表2测出口压）；

• 高压扳手（固定减压阀）；

• 洁净毛巾（擦拭接口）；

• 润滑剂（仅限用于密封圈）；

• 检漏液（如肥皂水）；

• 防护眼镜与防滑手套。

 2. 检查项：

✅ 若培养关键阶段建议先切换至备用瓶，保障不中断。

四、更换CO₂钢瓶的标准操作步骤

 全流程共9步，建议打印张贴于气瓶间墙壁

✅ 整个更换过程应在5–10分钟内完成，避免腔体浓度波动过大。

五、更换后设备如何快速恢复CO₂浓度？

✅ 建议更换钢瓶前将培养箱设定CO₂浓度略微提高（如从5.0%提至5.2%），减少补气延迟。

六、常见错误操作与安全提醒

七、更换钢瓶后的记录与追溯制度建议

 推荐记录表字段：

✅ 所有记录建议存档6年以上，供GMP/GLP/CNAS审计核查。

八、实验室制度推荐：让CO₂更换操作可控、可查、可追溯

九、真实案例解析：合规操作与违规失误的对比启示

✅ 案例A：规范更换，气体不中断

• 培养箱内正在进行疫苗细胞扩增；

• 更换前提前切换至备用瓶；

• 操作全程用表单记录，气浓度平稳；

• 审计时获得“关键控制点良好”评价。

⚠️ 案例B：接头未检测泄漏

• 更换后未做泄漏检测；

• CO₂流失造成浓度下降；

• 第三天发现细胞凋亡、培养液pH下降；

• 追责至个人未履行SOP第6条“接口检测”。

十、结语：一瓶二氧化碳，背后是实验质量与安全管理的双重责任

更换CO₂钢瓶虽是日常工作之一，但其过程集高压操作、气路连接、环境控制、系统响应与人员安全于一体，稍有疏漏即可能导致实验中断甚至人员伤害。

✅ 建议总结：

• 更换操作必须遵守标准流程，每一步均有科学与安全依据；

• 接头检测与气瓶来源必须可追溯、可验证；

• 所有更换行为应有记录+签字+审核；

• 建立制度性“换瓶预警”与“培训评估”机制，提升全员安全意识。