
Thermo赛默飞CO2培养箱i160标准操作流程(SOP)?
一、目的(Purpose)
本操作规程旨在规范Thermo i160 CO₂培养箱的启用、设定、使用、维护与异常处理流程,确保设备运行稳定,维持培养环境精准可控,保障细胞培养实验的安全性与可重复性。
二、适用范围(Scope)
本SOP适用于Thermo Scientific Heracell VIOS i160系列二氧化碳培养箱的所有使用人员,覆盖以下使用情境:
启动与关机
温度、CO₂浓度与湿度设定
实验样品放置与取出
设备日常保养与故障处理
消毒循环操作
三、职责(Responsibility)
实验室负责人:负责监督设备使用、维护记录完整性与培训新用户;
使用人员:依据SOP进行操作、维护及填写使用日志;
设备管理员:负责周期性校准、硬件检查、故障申报及配件更换。
四、操作准备(Pre-Operation)
确认供电:确认设备电源线连接稳定,电压220V,频率50/60Hz;
气体连接:CO₂钢瓶压力稳定,减压阀设定在0.5–1.0 bar之间,软管无泄漏;
水盘准备:水盘中注入≥1L无菌蒸馏水,确保湿度调节功能正常;
内部清洁:腔体无污染残留,搁板、水盘与风扇已消毒干燥;
环境检查:培养箱四周保持10 cm以上间距,避免热积聚;
记录仪开启:如配有温湿度记录仪,开启并校准后启动。
五、启动流程(Power-On Procedure)
打开电源总开关,待控制面板亮起;
触控屏幕唤醒界面,选择“启动”;
系统自检:
检查加热系统状态;
传感器状态;
CO₂浓度读取是否初始为常压值(约0.04%);
确认无报警信息后进入主界面。
六、基本参数设定(Setpoint Configuration)
1. 温度设定
默认设定为 37.0°C;
在主菜单点击“温度” → 输入目标值(范围:室温+5°C 至 55°C);
观察“实时温度”是否逐渐接近设定值;
系统启动加热夹套与门加热功能,确保温场均一。
2. CO₂浓度设定
标准设定为 5.0%(配合NaHCO₃缓冲体系);
点击“气体” → 设定目标浓度 → 系统自动调节气阀;
CO₂传感器基于NDIR红外检测技术持续采样;
浓度波动不超过±0.2%为正常。
3. 湿度管理
默认为自然蒸发饱和控制(约90%相对湿度);
每周更换水盘水源,避免微生物滋生;
不建议手动加湿或使用香精型添加剂。
七、实验操作步骤(Sample Handling)
1. 放置样品
开门前先佩戴口罩、手套;
用75%乙醇喷洒培养瓶或培养板外表;
快速将样品放入中部搁板,避免堆叠;
关门后等待30分钟以恢复设定环境;
观察恢复曲线(Temp/CO₂)确保值已稳定。
2. 取出样品
操作前先在屏幕查看当前环境值是否稳定;
开门时动作迅速,减少温湿气体损失;
若有多个样品需处理,建议提前标记顺序,减少开门次数;
取出后立刻关闭门体并记录时间。
八、消毒模式(Steri-Run Cycle)
Thermo i160配备高温灭菌功能(180°C)用于彻底灭活细菌、真菌与支原体。
启动流程:
移除所有样品与水盘;
关闭CO₂供气系统;
在主界面点击“消毒” → 选择“Steri-Cycle 180°C” → 确认;
消毒周期约11小时(含升温、灭菌、冷却);
结束后设备自动重启,显示“冷却完成”提示;
重新安装水盘、重新接入CO₂气源,按常规启动流程运行。
九、维护保养(Maintenance)
频率 | 项目 | 操作说明 |
---|---|---|
每周 | 更换水盘水、清洁腔体 | 使用无菌蒸馏水,擦拭不锈钢表面 |
每月 | 检查CO₂管线及阀门 | 确认无裂痕、无漏气、连接稳固 |
每季度 | 校准CO₂传感器(如启用) | 使用5.0%标准气体进行单点校准 |
每半年 | 清洁HEPA过滤器与风道系统 | 使用软毛刷清理,避免灰尘堵塞风道 |
每年 | 更换HEPA/空气过滤器 | 厂商或授权服务商执行 |
十、故障处理与报警代码(Troubleshooting)
报警代码 | 含义 | 处理建议 |
---|---|---|
E01 | 温度超限 | 检查加热系统、门是否关闭完整 |
E05 | CO₂传感器无响应 | 重启系统、检查气体连接 |
E09 | 门未关闭或传感器失灵 | 重新合拢门体、重启设备 |
W02 | 湿度不足 | 检查水盘水位、清洁水盘 |
E20 | 消毒模式未完成或中断 | 重新执行完整Stericycle程序 |
十一、数据记录与追溯(Logging)
所有设定修改、异常、运行曲线均记录于内部系统;
可通过USB或以太网导出数据报告;
建议每日填写《CO₂培养箱运行记录表》,内容包含:
日期与时间;
实时温度、CO₂浓度;
是否更换水;
是否出现异常;
使用人签字。
十二、安全注意事项(Safety)
严禁使用未经授权气体源或更改系统设置;
严禁在未清除水盘的状态下进行高温消毒;
电源或气体接口维修必须由专业人员操作;
灭菌结束前勿强行打开门锁,以防高温烫伤;
若观察到有异响、异味或触电感,应立即切断电源并上报管理人员。
十三、附录
标准校准气体推荐:5.0% CO₂, 95% N₂ 认证气体;
培养基推荐环境:37°C, 5.0% CO₂, ≥90% RH;
清洁剂选择:中性无残留型,如7X或Diluted Contrad;
技术支持热线与Thermo售后授权服务站联系方式附后。
十四、结语
通过上述操作流程,Thermo i160 CO₂培养箱能在保障细胞生理稳定性的同时,为科研人员提供一个精准、洁净、易控的实验环境。只有在科学设定、规范使用、周期性维护的基础上,才能发挥设备应有性能,确保科研质量与成果稳定性。标准化SOP不仅是设备管理规范的重要组成,也是研究 reproducibility 的前提保障。
