一、实验中断的常见原因与初步判断

在恢复之前，首先要明确中断的具体原因，只有对症处理，才能避免重复发生类似问题。常见中断原因包括：

1. 电源故障或断电
   若实验楼突然停电，CO₂培养箱将停止运行。若培养箱未接UPS电源，断电时间过长可能导致箱内温度、湿度和气体浓度迅速下降。

2. CO₂气源中断或泄漏
   气瓶耗尽、减压阀堵塞或连接管松动，都会使CO₂浓度失衡，影响细胞代谢环境。

3. 开门时间过长或频繁开门
   导致内部环境波动过大，尤其湿度和CO₂浓度难以维持，造成实验异常。

4. 传感器故障
   比如红外CO₂传感器失灵、温控探头漂移，会让系统误判参数，导致调节异常。

5. 系统内部报警/软件设定异常
   包括温度偏差报警、HEPA过滤器堵塞、风扇停转等。

恢复前应首先查看面板显示、报警日志、历史数据记录等，初步锁定问题范围。

二、中断后的恢复前准备工作

在实际重启实验前，必须进行一系列准备，确保后续恢复不会引发新的问题。

1. 断电恢复后安全检查

• 检查电源接口是否稳定，是否已连接UPS或具备断电报警系统；

• 查看是否有保险丝熔断、跳闸现象；

• 确认培养箱电源开关恢复后自动启动或需手动启动。

2. CO₂气源确认

• 检查气瓶压力是否在推荐范围（一般为2–4 bar）；

• 检查气管是否有脱落或破损现象；

• 使用肥皂水或专用气体泄漏检测仪检查接口有无泄漏。

3. 培养箱内部检查

• 打开培养箱门，检查水盘水量是否足够；

• 观察内壁是否结露、污染或存在霉斑；

• 检查风扇、电热丝是否正常运行，箱内是否有异响或异常气味。

三、设备参数的重新设定与校准

在设备恢复运行后，需对所有运行参数重新确认与设定，包括温度、湿度、CO₂浓度等。

1. 温度设定与校准

• 默认设定为37℃，可根据实验要求微调；

• 若使用外接温度计，可进行校准确认是否存在偏差；

• 若偏差大于±0.5℃，应考虑传感器重新校准或更换。

2. CO₂浓度设定

• 通常设定为5%，若有特殊细胞要求可设为10%或3%；

• 使用外部气体分析仪确认显示值与实际值的差距；

• 若偏差超过0.3%，建议执行“Auto-zero”或传感器重新标定。

3. 湿度调节

• 检查水盘中是否添加了无菌蒸馏水或超纯水；

• 若水量过低或已蒸干，需重新加水并加热至稳定；

• 监控湿度传感器反馈，保持相对湿度在90–95%。

四、内部环境稳定性监控与恢复周期

培养箱在恢复供电与参数设定后，并非立即适合放入细胞样本。内部环境的重新稳定通常需要一定时间。

1. 环境稳定所需时间

• 温度：大约需要1–2小时才能恢复至37℃并维持稳定；

• CO₂浓度：若气体流量设定合理，一般40–60分钟即可恢复；

• 湿度：取决于水盘加热速度，一般需要4小时左右。

2. 数据采集监控

• 利用i160的数据记录功能，观察环境恢复曲线；

• 若数据出现波动或平台期异常长，需检查气体控制单元是否有滞后或损耗。

五、样本重新处理与实验重启建议

一旦培养箱恢复至稳定状态，便可进行样本的处理和重新培养。

1. 受损样本的判断

• 若细胞已长时间暴露在不稳定环境中（低温、缺气、高湿），应显微镜检查形态；

• 可进行MTT或活性染色实验以判定细胞是否存活；

• 建议同时设立对照组，以避免后续数据偏差。

2. 再培养建议

• 对于损伤不严重的细胞，建议更换新鲜培养基并低密度复种；

• 对于关键实验样本，应启动新的批次以确保结果可靠性；

• 每次放样前，记录箱内稳定数据与实际时间，形成可追溯数据链。

六、长期风险规避与维护建议

为避免未来出现类似的实验中断情况，建议从以下几方面加强日常管理与风险防控：

1. 增加应急电源配置

• 配置UPS电源，支持至少2小时供电，缓冲短时停电；

• 若条件允许，可联接实验室备用发电系统。

2. 定期传感器校准

• 每3–6个月对CO₂传感器和温度探头进行校准；

• 建议委托原厂或第三方具资质单位进行专业检测。

3. 合理开门频率

• 每次开门不超过30秒，操作结束后立即关闭；

• 可安装玻璃观察窗，避免不必要开门。

4. 水盘管理

• 每周检查一次水量和清洁度；

• 使用无菌水，防止细菌或霉菌污染，必要时添加铜片抑菌。

5. 报警系统设置

• 合理设定温度、CO₂上限与下限报警；

• 配合短信或邮件提醒系统，第一时间知晓异常。

七、总结与结语

实验中断是科研中不可避免的风险之一，如何有效、科学地恢复CO₂培养箱的工作状态，直接影响实验数据的有效性和连续性。Thermo i160 CO₂培养箱虽然具备智能化控制与报警机制，但操作人员的日常维护与突发应对能力同样重要。

通过本指南的细致解析，相信使用者可在突发状况后，有条不紊地完成从故障识别、参数复位、环境稳定到样本重启的全过程管理，最大限度减少实验损失。

如能结合实验室SOP制度建设，建立完整的设备维护与应急响应机制，将进一步提升实验环境的稳定性与科研效率。