赛默飞 Applied Biosystems™ StepOnePlus™ 实时荧光定量PCR系统 是一款高性能、用户友好的实时荧光定量PCR（qPCR）设备，适用于基因表达定量、基因分型、突变检测和病原体检测等应用。作为一款灵活的中小通量系统，StepOnePlus™ qPCR仪能够在科研和临床实验室中提供高灵敏度和精确的核酸定量检测，是广泛应用于基础研究、临床诊断和分子生物学实验的理想选择。

一、主要特点

1. 4通道荧光检测

StepOnePlus™ 系统配备了 4个独立的荧光检测通道，支持多重PCR检测，可以同时检测多达4个基因靶标。该系统兼容SYBR Green、TaqMan探针等多种荧光染料，能够灵活适应不同的实验需求。

2. 高灵敏度与精确性

StepOnePlus™ 系统具有极高的灵敏度，能够精确定量低拷贝数的DNA或RNA样品。系统的光学检测器能够捕捉微弱的荧光信号，并在低丰度样品中提供高特异性和高精度的检测结果。

3. 用户友好的操作界面

StepOnePlus™ 系统配备了直观的 StepOne™ 软件，界面简洁易用，适合初学者和有经验的科研人员。用户可以轻松完成实验设置、实时监控PCR扩增曲线，并快速进行数据分析。软件支持自动Ct值计算、标准曲线生成、熔解曲线分析等功能。

4. 快速热循环

系统配备高效的热循环模块，能够快速完成PCR循环，大幅缩短每个反应的时间，适合需要快速获得结果的实验。其温控精度达到±0.1°C，确保了PCR反应的稳定性和一致性。

5. 灵活的样品格式

StepOnePlus™ 系统支持 96孔板，能够处理中等通量的样品需求。无论是日常基因表达定量分析，还是需要高通量检测的实验，系统都能灵活满足实验室的应用需求。

6. 熔解曲线分析

对于使用SYBR Green染料的实验，系统提供了 熔解曲线分析 功能，用于检测PCR扩增产物的特异性。通过熔解曲线分析，用户能够区分特异性扩增产物和非特异性扩增产物（如引物二聚体）。

7. 低成本且易于维护

StepOnePlus™ 系统设计简单，易于操作和维护。系统配备的耗材与赛默飞的其他PCR平台兼容，降低了实验成本，且在日常使用中设备稳定性高，减少了实验中的故障率。

二、应用领域

1. 基因表达定量

StepOnePlus™ 系统广泛应用于基因表达定量分析，通过实时检测mRNA水平，帮助研究人员分析基因在不同实验条件下的表达变化。系统高灵敏度的检测能力和4通道的多重检测功能使其成为基因表达研究中的重要工具。

2. 病原体检测

StepOnePlus™ 系统能够快速、准确地检测病原体DNA或RNA，适用于临床诊断中的病原体筛查和传染病检测。其高灵敏度和高特异性确保了在临床样品中的可靠检测，广泛用于公共卫生监测和临床实验室。

3. 基因分型与突变分析

系统支持基因分型和突变检测，能够通过荧光探针检测基因型差异和突变位点。它在遗传学研究、个体化医疗和药物基因组学中具有重要应用，帮助科研人员快速识别基因型差异和突变。

4. 食品安全检测

StepOnePlus™ 系统被广泛应用于食品安全检测，帮助检测食品中的转基因成分、致病菌和污染物。其快速高效的检测能力能够确保食品安全并满足法规要求。

三、实验步骤

1. 实验准备

• 模板制备：提取高质量的DNA或RNA（对于RNA样品，需先进行逆转录为cDNA）。

• 试剂准备：使用适合的qPCR试剂（如SYBR Green Master Mix或TaqMan探针试剂），确保试剂新鲜且保存妥当。

2. 反应体系设置

典型反应体系为 10-20 µL，包括以下成分：

• qPCR Master Mix（2x浓度）；

• 引物和探针；

• 模板DNA或cDNA；

• 无核酸酶水（补足总反应体积）。

3. PCR反应设置

• 初始变性：95°C，10分钟；

• PCR循环：

• 95°C，15秒（变性）；

• 60°C，1分钟（退火和延伸，同时采集荧光信号）；

• 循环次数：通常为40个循环。

4. 数据采集与分析

• StepOne™ 软件自动采集每个循环中的荧光信号，并生成实时扩增曲线。

• 软件会自动计算Ct值，并提供标准曲线或相对定量分析。

四、使用效果

赛默飞 StepOnePlus™ 实时荧光定量PCR系统凭借其高效性、操作简便和高度灵敏的性能，在科研和临床实验室中得到了广泛应用。用户反馈其检测精度高，特别适合基因表达分析、病原体筛查和基因突变检测等多种应用。系统的软件功能强大，能够自动生成实验报告，简化数据处理流程，极大提升了实验室的工作效率。

此外，StepOnePlus™ 系统的稳定性和可靠性得到了用户的高度评价。其设计易于维护，操作简便，即使是初学者也能轻松上手。整体而言，StepOnePlus™ 系统在提供高效定量PCR检测的同时，保证了实验结果的准确性和一致性，是科研和临床实验中的重要工具。

五、价格

赛默飞 Applied Biosystems™ StepOnePlus™ 实时荧光定量PCR系统属于中端价位的PCR设备，价格通常在 人民币20万元至40万元 之间，具体价格因配置和附加功能而有所不同。建议联系赛默飞的官方销售或授权经销商，获取最新报价和售后支持服务。

六、技术参数

七、总结

赛默飞 Applied Biosystems™ StepOnePlus™ 实时荧光定量PCR系统 是一款灵活且高效的 qPCR 平台，专为中小型实验室设计，适用于基因表达定量、突变检测、病原体检测和基因分型等多种应用。其4通道荧光检测、多重PCR支持、高灵敏度和快速热循环功能，使其成为科研和临床实验中不可或缺的工具。

无论是基础研究、临床诊断还是食品安全检测，StepOnePlus™ 系统都能够提供快速、准确的结果，帮助实验室简化实验流程并提高工作效率。