Thermo赛默飞 Countess™ 3 FL细胞计数仪与光立方 GFP 应用
Thermo赛默飞 Countess™ 3 FL细胞计数仪与光立方 GFP 应用
赛默飞 Countess™ 3 FL 是一款集亮场成像与荧光检测于一体的自动化细胞计数仪，通过荧光通道的增强支持，如 GFP（绿色荧光蛋白）分析，为科学研究者提供了快速、精准的荧光标记细胞检测方案。结合光立方（Cube）技术，这款仪器能够在复杂实验条件下检测 GFP 表达，从而更好地支持细胞转染、基因表达、免疫研究等领域的实验需求。
一、Countess™ 3 FL与光立方 GFP的功能特点
Countess™ 3 FL 使用荧光通道（红色和绿色）检测 GFP 蛋白表达，实现细胞活性、转染效率、荧光强度等多维度数据的采集与分析。
1. 光立方 GFP的精准荧光检测
GFP（绿色荧光蛋白）是一种常用的荧光标记物，用于评估基因转染效率或标记特定细胞。
Countess™ 3 FL 使用光立方 GFP 专用滤光模块，实现特定波长（绿色荧光波长）的高灵敏度检测。
能够区分 GFP 阳性细胞和非标记细胞，准确评估 GFP 表达的细胞比例和荧光强度。
2. 多样本检测的高效性
快速检测：10秒内完成 GFP 荧光标记的细胞计数与分析。
支持多样本检测：在同一实验中分析不同样本的 GFP 阳性率。
3. 双荧光通道协作
Countess™ 3 FL 配备双荧光通道，可同时分析 GFP（绿色荧光）与其他荧光标记物（如 PI 或 Hoechst）：
绿色通道：检测 GFP 表达。
红色通道：可用于检测死细胞（如 PI 染料）或其他红色荧光标记。
二、技术规格（针对 GFP 检测）
| 参数 | 详情 |
|---|---|
| 荧光通道 | 双通道（绿色通道适用于 GFP，红色通道适用于 PI/DAPI） |
| 检测范围 | 1 × 10³ 到 1 × 10⁸ 细胞/mL |
| 适配样本类型 | 悬浮细胞、贴壁细胞、转染细胞 |
| 荧光滤光模块 | GFP 滤光模块（匹配 GFP 波长 488 nm 激发，510 nm 发射） |
| 检测时间 | 10-30秒 |
| 数据导出 | 支持 CSV 和图像文件导出 |
三、Countess™ 3 FL与GFP的实验应用
1. GFP转染效率评估
应用场景：
GFP 通常用作报告基因，帮助研究者评估基因转染或基因编辑效率。
GFP 标记细胞在实验过程中能够实时观测基因表达的动态变化。
操作步骤：
将 GFP 转染的细胞与荧光染料（如 PI）混合，制备细胞悬液。
加载样本至 Countess™ 3 FL 仪器，选择绿色荧光通道检测 GFP 表达。
生成 GFP 阳性率及荧光分布图，评估转染效率。
2. GFP细胞分选与混合细胞检测
应用场景：
检测异质性细胞群中 GFP 阳性细胞比例。
分析 GFP 阳性细胞与非阳性细胞的比例变化，适用于细胞增殖、凋亡实验。
操作步骤：
预先标记 GFP 细胞后，将样本加载到 Countess™ 3 FL 仪器。
仪器自动生成荧光强度和阳性细胞分布数据，提供 GFP 表达的完整分析结果。
3. GFP标记的细胞活性检测
应用场景：
结合 GFP 和 PI（碘化丙啶）染料同时检测细胞死活状态和 GFP 表达。
操作步骤：
使用 PI 染料标记死细胞，与 GFP 阳性细胞同时检测。
选择双荧光模式，分别读取绿色和红色通道信号。
得到死活细胞比例和 GFP 阳性率。
4. GFP在药物筛选中的应用
应用场景：
荧光强度变化反映 GFP 表达水平，用于研究药物对基因表达或细胞行为的影响。
操作步骤：
将转染 GFP 的细胞暴露于药物，孵育一定时间后采集样本。
通过 Countess™ 3 FL 检测 GFP 阳性率及荧光信号强度，评估药物对细胞状态的影响。
四、Countess™ 3 FL GFP检测的优势
高灵敏度检测
光立方 GFP 模块专为 GFP 表达优化，能够高灵敏度地捕捉绿色荧光信号，轻松检测低表达的 GFP 阳性细胞。
精准的细胞计数
Countess™ 3 FL 能够区分 GFP 阳性细胞与细胞碎片、聚集体，确保结果的高精确性。
快速实验周转
GFP 检测仅需10-30秒，适合高通量样本分析。
多参数分析
同时获取细胞数量、死活比例、荧光阳性率等多维数据，实验数据更丰富。
便捷的数据管理
支持导出数据至USB设备，用于进一步的统计和图表分析。
五、Countess™ 3 FL GFP检测的操作简化流程
制备样本：
将 GFP 标记细胞与染料混匀，加载到专用计数板中。
选择检测模式：
打开仪器，选择荧光模式中的“绿色通道”或“双荧光通道”。
自动检测：
仪器自动捕捉图像并分析 GFP 阳性细胞数量及荧光强度。
数据查看与导出：
实验结果显示在屏幕上，包括阳性率、荧光分布等，用户可一键导出数据。
六、Countess™ 3 FL与传统细胞计数的对比
| 功能 | Countess™ 3 FL | 传统细胞计数法 |
|---|---|---|
| GFP检测能力 | 支持 GFP 高灵敏度荧光检测 | 不支持 |
| 检测效率 | 10-30秒完成 | 通常需要10分钟或以上 |
| 数据精度 | 自动过滤碎片、聚集细胞，结果更精准 | 易受人为误差影响 |
| 适配实验场景 | GFP 转染效率、活性检测、药物筛选 | 仅适用于基础细胞计数 |
| 数据输出 | 支持 USB 导出（CSV、图像格式） | 需要手动记录 |
七、总结
赛默飞 Invitrogen Countess™ 3 FL 细胞计数仪结合光立方 GFP 检测模块，为荧光标记细胞分析提供了高效、精准的解决方案。无论是 GFP 转染效率评估、混合细胞群检测，还是药物筛选中的 GFP 表达监控，Countess™ 3 FL 都能显著提升实验效率和数据准确性。
推荐用户：
从事基因转染、细胞工程、药物筛选的科研人员。
希望快速分析 GFP 或多荧光标记细胞的实验室。
核心亮点：
快速荧光检测（10秒内）。
双荧光通道灵活扩展。
数据精准且导出便捷。
选择 Countess™ 3 FL，与 GFP 实验无缝衔接，让您的细胞研究更加高效！
