赛默飞（Thermo Fisher Scientific）超微量分光光度计（如 NanoDrop 系列）是一种专为微量样品（如 DNA、RNA、蛋白质等）设计的分析仪器。其主要优点是无需比色皿、仅需 1–2 微升样品即可完成吸光度测量，操作快速、准确、便捷。
下面是**赛默飞超微量分光光度计（以 NanoDrop One 为代表）**的标准使用方法，适用于常规核酸/蛋白浓度测定及纯度评估：
一、准备工作
1. 开机与预热
按下电源键启动仪器，等待系统初始化完成。
仪器开机后通常不需要长时间预热，可直接进行操作。
2. 打开软件
NanoDrop 系列配备内置触控屏操作系统，也可连接至电脑操作。
在主界面中选择所需测量模式，例如：
Nucleic Acid（核酸）
Protein A280（蛋白质）
UV-Vis（全波长扫描）
Custom（自定义方法）
二、校准与空白测量
1. 空白（Blank）测量
用移液器吸取 1–2 µL 空白液体（如 TE 缓冲液、纯水、PBS 等），滴在测量平台中央。
轻轻关闭测量臂，点击 “Blank”。
仪器将测定空白吸光度值，并用于自动校正样品背景。
✅ 注意：空白液应与样品使用相同溶剂，以确保校准准确。
三、样品测量步骤
1. 上样操作
用移液器取 1–2 µL 样品溶液，滴在平台上（和空白相同位置）。
关闭测量臂，仪器将自动识别样品并开始测量。
2. 读取数据
屏幕将显示以下信息：
样品浓度（如 ng/µL）
纯度比值（如 A260/A280、A260/A230）
吸光度图谱（190–850 nm 范围）
3. 数据保存/导出
测量结果可存储在仪器本地、导出为 Excel 或 PDF 文件，或通过 USB/U盘/网络传输。
四、样品更换与平台清洁
1. 擦拭平台
每次测量后使用无绒擦拭纸（如 Kimwipe）和少量纯水或 70% 乙醇清洁检测平台。
确保平台无残留液体或污染。
⚠️ 切勿使用酸性、碱性或含氯清洁剂擦拭，以防损坏光学部件。
五、核酸与蛋白质分析注意事项
| 样品类型 | 推荐检测模式 | 测量指标 |
|---|---|---|
| DNA / RNA | Nucleic Acid | 浓度 (ng/µL)，A260/A280，A260/A230 |
| 蛋白质 | Protein A280 / BCA / Bradford | 浓度 (mg/mL)，A280 |
| 双波长分析 | Custom Ratio | 比值计算，如 A260/A230 |
纯度判定参考值：
A260/A280 ≈ 1.8（DNA），≈ 2.0（RNA）
A260/A230 一般 > 1.8，低于此值可能有盐或有机溶剂污染
六、常见问题与处理方法
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 浓度异常偏高 | 样品太浓或平台未清洁 | 稀释样品；重新校准并擦拭平台 |
| A260/A280 比值过低 | 蛋白质污染 | 纯化样品；重做提取 |
| 波形异常 | 缓冲液吸光或样品降解 | 检查缓冲液成分；更换样品 |
| 检测失败 | 样品体积不足或未覆盖测量点 | 使用足量样品并正确定位 |
七、日常维护与保养建议
定期清洁平台：每次测量前后用无绒纸擦拭。
避免平台干涸样品残留：样品干固后会影响透光，应尽快擦除。
每周自检：检查校准状态，执行标准核酸或蛋白测量验证准确性。
软件更新：连接网络或 USB 更新软件版本，确保兼容性和稳定性。
八、总结
赛默飞的超微量分光光度计（如 NanoDrop One、NanoDrop Lite 等）以高效、快速、样本量小的优势，在分子生物学、基因组学和蛋白质研究中占据重要地位。正确掌握其操作流程、空白校准和数据判读技巧，是获取高质量分析数据的关键。
如您需要针对某个分析模式（如纯化质控、BCA 蛋白测定）进一步了解详细流程，我可以继续为您提供补充内容。
