赛默飞分光光度计详尽介绍
一、引言
分光光度计是一种基于光学原理,通过测定物质对特定波长光的吸收或透射能力,从而对样品的成分、浓度和反应状态进行分析的仪器。该设备广泛用于化学分析、生物研究、药物开发、环境监测、食品安全等多个领域。
赛默飞(Thermo Scientific)作为分析仪器领域的重要厂商,其分光光度计产品线涵盖从基础型教育仪器到高端科研分析平台。凭借稳定的光学系统、灵活的软件功能和高度模块化设计,赛默飞分光光度计适应了多种实验场景的多样化需求。
二、工作原理概述
赛默飞分光光度计的核心原理基于 朗伯-比尔定律:
A = εcl
其中,A 为吸光度,ε 是物质的摩尔吸光系数,c 是物质浓度,l 是光程长度。仪器通过将可控波长的单色光照射到样品中,根据透过光或反射光的强度变化,计算样品的吸光值,并间接推导出样品浓度或其他物理化学性质。
三、分类与产品结构
根据不同应用需求,赛默飞分光光度计可分为以下几类:
1. 紫外-可见分光光度计(UV-Vis)
适用于190–1100 nm 波长范围的分析,涵盖紫外与可见光区域,广泛用于核酸、蛋白、化学物质的吸光分析。
代表产品包括:
Evolution 201 / 220
GENESYS 50 / 140 / 150 / 180
2. 可见分光光度计(Vis)
波长范围为325–1100 nm,专注于可见光区域,适用于基础教学或对紫外波段不敏感的样品分析。
代表型号:
GENESYS 10S Vis
3. 超微量分光光度计(Microvolume)
专为微量样本(如DNA/RNA溶液)分析设计,无需比色皿即可完成高精度测量,样本体积低至0.5–2 µL。
代表型号:
NanoDrop One / OneC / Eight
NanoDrop Lite Plus
4. 双光束分光光度计
采用双光路结构,一条用于样品,一条为参考,自动进行基线校正,提高光学稳定性。
应用于科研、制药分析等对数据稳定性要求较高的领域。
四、结构组成与技术参数
赛默飞分光光度计由以下关键组件构成:
1. 光源系统
氘灯:提供190–360 nm 的紫外区光源
钨灯:提供360–1100 nm 的可见区光源
自动切换实现全波段覆盖
使用寿命长、稳定性高
2. 单色器系统
3. 样品架与比色皿
支持标准1 cm比色皿
可拓展自动样品架、温控模块、微量附件
微量样本可通过平台直接测定(NanoDrop)
4. 检测器系统
硅光电二极管或CCD检测器
灵敏度高,响应快
支持全谱扫描与快速读取
5. 控制与显示界面
嵌入式触控屏或外接PC控制
多语言支持
图谱、结果与方法一体化显示
五、功能模块详解
1. 吸光度与透射率测量
支持单波长、多波长模式
自动进行空白校正
吸光度范围 -3.0 A 至 +3.0 A
透射率范围 0% 至 200%
2. 光谱扫描
扫描速度可调
波长区间可自定义
支持吸收峰标注、导出和比对
3. 动力学分析
实时记录样品随时间变化的吸光值
可用于酶动力学研究、光降解反应分析等
4. 标准曲线分析
可设定多个浓度点
支持线性、二次、指数、对数等拟合方式
自动计算未知样品浓度
5. 多组分分析
适合检测具有重叠吸收峰的混合样品
应用于多组分药物分析、环境污染物识别
6. 光谱比值计算
A260/A280 等比值用于核酸纯度分析
适合微量生物样品快速筛选
7. 温控检测(部分型号)
支持温度控制模块(如Peltier装置)
应用于热变性实验、稳定性分析
六、软件平台与数据管理
赛默飞配套的软件系统支持实验流程自动化管理:
1. INSIGHT 软件(Windows平台)
实验方法模板保存与调用
实验数据分组、图谱叠加比较
支持吸光度、浓度、动力学多模式切换
图形化界面便于教学与科研人员使用
2. 数据导出与连接
支持 USB、LAN、LIMS 等接口
数据可导出为 CSV、PDF、XML、TXT
可与打印机连接实现报告直接输出
3. 安全与权限管理
多用户账户设置
支持21 CFR Part 11 合规管理
审计追踪与电子签名功能
七、典型应用领域
1. 医药与生物科学
药品原料含量测定
核酸/蛋白定量与纯度评估
药品稳定性试验
临床样本浓度筛查
2. 环境与水质监测
地表水、工业废水分析
COD、BOD、重金属离子间接测量
紫外透光率评估污染程度
3. 食品与饮料行业
食品添加剂、着色剂浓度测定
酒类、果汁中成分监测
农残衍生物分析
4. 材料与化工分析
染料、涂料吸收性能评估
聚合物溶液定量分析
光学材料透过率与遮光性测试
5. 教学与基础科研
吸光原理教学
波长扫描演示实验
酶活性测定实验教学
八、仪器使用与维护建议
为保障分光光度计长期运行稳定、数据准确,建议遵循如下操作规范:
每日使用前进行基线校准
比色皿清洗干净、无气泡、无指纹
紫外检测时注意避免溶剂对光源腐蚀
关闭电源前退出全部实验操作界面
光源使用一定时长后应及时更换(如氘灯约1000小时)
定期进行杂散光、波长准确度等性能验证
保持仪器放置环境干燥、无震动
九、发展趋势与展望
随着实验室数字化和多组分分析的不断普及,分光光度计正呈现以下发展趋势:
智能化:自动识别样品性质、建议检测模式
模块化:可根据实验需求快速切换检测附件
便携化:小型手持设备适用于现场环境检测
多功能集成:与荧光、比色、红外技术融合,增强样品解析能力
数据云端管理:实现实时数据传输、远程操作与共享
十、总结
赛默飞分光光度计凭借其稳定的性能、丰富的型号选择和灵活的软件控制系统,在现代实验室的定量分析、光谱扫描与复杂样品评估中占据重要地位。从基础教育到工业生产,从基础研究到法规合规实验室,其广泛的适配性使得该类仪器成为多个行业不可或缺的分析平台。通过科学使用与维护,用户可在长期实验中持续获得可靠、可重复的分析结果。