博日荧光定量 PCR 仪 FQD-96A 灭菌操作介绍
一、仪器概述
荧光定量 PCR 仪（Quantitative PCR, qPCR）是分子生物学实验室中常用的精密仪器，能够实现核酸扩增与荧光信号的实时检测。博日 FQD-96A 型荧光定量 PCR 仪采用 96 孔反应板设计，具备高灵敏度的光学检测系统、稳定的温控模块以及人性化的软件界面，被广泛用于基因检测、病原体诊断、转基因检测和药物研发等多个领域。
作为一种高灵敏检测平台，FQD-96A 对环境条件、样品纯度和仪器洁净度要求极高。若仪器未能保持无污染状态，将直接影响扩增曲线和 Ct 值的准确性，甚至导致假阳性结果。因此，科学、规范的灭菌操作是保障实验数据可靠性的必要环节。
二、灭菌的重要性
1. 防止交叉污染
在 PCR 反应中，微量的残留 DNA 或 RNA 均可能被扩增，从而导致结果错误。定期灭菌可消除残留物，降低交叉污染风险。
2. 保护反应体系稳定性
灭菌操作能够减少细菌、真菌或其他微生物在仪器表面的滋生，保持实验环境的清洁与稳定。
3. 延长设备使用寿命
定期清洁和灭菌不仅保证实验结果，还能避免灰尘、液体残留或微生物腐蚀对光学系统、温控模块等关键部件的损伤。
4. 符合实验室管理规范
大多数分子生物学实验室都对 PCR 仪器的灭菌频率和方法有严格要求，规范操作有助于通过质量认证或审查。
三、常见污染类型与风险
核酸污染：PCR 产物或样品残留在反应模块、加热盖或操作台面。
微生物污染：空气中的细菌或真菌在仪器表面附着，影响实验环境洁净度。
灰尘与颗粒物：可能进入光学系统，干扰荧光检测信号。
溶液残留：样品溢出或操作不慎导致液体污染模块表面，影响温度传递。
四、日常灭菌方法
1. 使用前准备
穿戴实验室防护用品，包括手套、口罩和实验服。
确认仪器处于关闭状态，待温度降至室温后再进行清洁。
2. 表面擦拭
使用 75% 无水乙醇蘸湿的无尘布，擦拭仪器外壳和操作面板。
避免使用含氯或强酸碱清洁剂，以免腐蚀外壳。
3. 反应模块清洁
在模块表面残留样品时，应用无尘纸巾吸附后，用少量无水乙醇轻轻擦拭。
切勿直接倒入清洁剂，防止液体渗入电路。
4. 加热盖灭菌
先确认加热盖已冷却，再用乙醇棉球或无尘布擦拭。
定期检查加热盖是否有凝固残留物，必要时进行局部深度清洁。
5. 光学窗口清洁
使用光学镜头纸轻轻擦拭透光区域，避免划伤。
切勿使用粗糙布料或手指直接触碰。
五、定期深度灭菌流程
除了日常操作，还需每隔 1–2 个月进行深度灭菌，具体步骤如下：
仪器断电
确保完全关闭电源，并拔下电源插头，防止液体进入时造成短路。紫外灭菌
将仪器放置在带有紫外消毒灯的生物安全柜或洁净间内。
开启 UV 灯照射 30–60 分钟，利用紫外线分解残留核酸。
模块表面去污
使用专用 DNA/RNA 去污剂，按照说明书稀释后擦拭反应模块。
作用 10 分钟后，再用无水乙醇擦拭以去除残留。
内部通风口清理
使用实验室专用小型吸尘器清理灰尘。
避免使用压缩空气，以防颗粒进入光学通道。
环境同步消毒
在仪器周围区域喷洒 75% 乙醇或过氧化氢消毒液，保持空气和台面清洁。
六、灭菌注意事项
禁止在仪器运行过程中进行清洁和灭菌。
清洁剂必须使用挥发性快、腐蚀性低的实验室专用产品。
灭菌后应保持至少 10–15 分钟的自然风干，待溶液完全蒸发再开机使用。
不可将清洁剂直接倒在模块或光学组件上，应以擦拭方式操作。
灭菌过程中注意人身安全，避免长时间暴露于紫外线下。
七、常见问题与解决方案
1. 灭菌后仍有假阳性
可能原因：紫外线照射不足，或模块缝隙中残留 DNA。
解决方法：延长 UV 灭菌时间，结合去污剂擦拭。
2. 灭菌后模块表面出现痕迹
可能原因：使用了不当清洁剂。
解决方法：严格使用乙醇或专用去污剂，避免腐蚀性液体。
3. 光学检测异常
可能原因：清洁过程中灰尘或液体进入光路。
解决方法：用镜头纸重新清洁光学窗口，并联系厂家进行光学校准。
4. 仪器外壳变色
可能原因：长时间使用高浓度消毒剂。
解决方法：降低清洁剂浓度，使用无水乙醇为主。
八、建立标准化灭菌管理体系
为确保灭菌效果，应制定标准化流程：
制定灭菌计划：明确日常擦拭、每周 UV 灭菌、每月深度去污等周期。
人员培训：确保所有操作人员掌握灭菌步骤与注意事项。
记录管理：建立灭菌日志，记录每次清洁时间、方法及执行人员。
质量监控：定期检测仪器背景值和污染情况，验证灭菌效果。
应急措施：若出现严重污染，应立即停止使用并进行彻底清洁。
九、总结
博日 FQD-96A 荧光定量 PCR 仪作为高灵敏检测设备，对环境和仪器洁净度要求极高。科学的灭菌操作不仅能防止核酸残留和交叉污染，还能延长设备寿命，保障实验结果的可靠性。
通过日常擦拭、紫外灭菌、深度去污与标准化管理，实验人员能够有效维持仪器的清洁状态。严格执行灭菌流程、定期检查与记录，是现代分子生物学实验室管理中不可或缺的重要环节。
