宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P使用说明
一、设备概述
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中通量实时荧光定量PCR系统，可同时进行48个样品的扩增和检测。该设备结合精确的温控系统与高灵敏度光学检测系统，能够实时监测荧光信号变化，从而实现核酸定量检测、基因表达分析、突变筛查和基因分型等多种功能。其结构紧凑、操作简便、功能全面，特别适合中小型实验室、临床检验科室及科研院所使用。
二、技术特点
通量适中：48通量满足日常检测与科研实验需要，既保证效率，又节省耗材。
控温精准：升降温速率快，温度均一性好，确保扩增结果一致性。
光学检测灵敏：支持多通道荧光信号采集，兼容多种染料和探针。
软件智能：界面直观，功能丰富，支持扩增曲线、熔解曲线、Ct值分析和自动报告生成。
操作便捷：模块化设计，实验流程简化，适合初学者快速掌握。
三、实验准备
1. 环境条件
实验室温度保持在18–30℃，湿度30%–80%。
实验台稳固、防震，远离强磁场和电磁干扰源。
环境洁净，无尘或气溶胶污染。
2. 仪器检查
确认电源线和通信线连接牢固。
检查样品仓是否清洁，无液体残留。
打开电源，观察系统自检是否正常。
3. 耗材准备
48孔反应管或配套反应板。
光学透明封膜或专用盖子。
无RNA酶、DNA酶污染的枪头与离心管。
4. 试剂与样品
PCR预混液、引物、探针或荧光染料。
模板DNA或RNA（RNA需反转录为cDNA）。
阴性对照和阳性对照。
四、反应体系配置
1. 体系组成（以20µL为例）
预混液：10µL
上游引物：0.5µL
下游引物：0.5µL
探针/染料：0.5–1µL
模板：2–5µL
ddH₂O补足至20µL
2. 配置要点
在洁净区操作，防止污染。
每次加样需更换枪头。
配置完成后使用离心机短暂离心，去除气泡。
五、操作流程
1. 开机与软件启动
打开SLAN-48P电源。
在电脑上启动配套软件，确认仪器连接正常。
2. 新建实验
点击“新建实验”，输入实验名称和保存路径。
在界面中设置实验参数。
3. 程序设置
初始变性：95℃，2–3分钟。
循环阶段：
变性：95℃，10–15秒；
退火：55–65℃，20–30秒；
延伸：72℃，20–30秒。
循环次数：35–45次。
荧光采集点：通常选择在退火或延伸阶段。
4. 样品布局
在软件的48孔板界面中，输入样品编号。
标注阴性对照、阳性对照。
为不同实验组分配不同颜色。
5. 装载样品
将反应管放入样品仓，方向正确。
关闭并锁紧舱盖。
6. 启动运行
点击“开始运行”。
软件实时显示扩增曲线和实验进度。
六、软件功能
1. 实时曲线显示
扩增曲线随循环进程动态生成。
状态栏显示循环次数与剩余时间。
2. Ct值计算
软件自动识别阈值线并计算Ct值。
用户可手动调整阈值位置。
3. 标准曲线绘制
输入标准模板浓度，软件自动绘制曲线。
显示相关系数R²和扩增效率。
4. 熔解曲线分析
判断扩增产物特异性。
单峰说明特异性良好，多峰表示可能存在非特异性扩增。
5. 数据导出
支持Excel、PDF、Word、图像等格式。
报告包含曲线图、Ct值表和实验参数。
七、实验结果分析
1. 扩增曲线
阳性对照应在合理Ct值范围内，呈S型曲线。
阴性对照应无明显信号。
2. Ct值解读
Ct值与模板浓度成反比。
小于35为常见有效信号，大于40可能为背景噪音。
3. 标准曲线与效率
R²≥0.98为理想。
PCR效率在90%–110%之间为合格。
4. 熔解曲线
单峰表示特异性产物。
杂峰提示需优化引物或实验条件。
八、常见问题与处理
Ct值过高或无扩增
检查模板浓度、纯度。
确认引物与试剂有效性。
熔解曲线杂峰
可能为非特异性扩增。
解决方法：提高退火温度或优化引物。
重复性差
确认加样一致，避免气泡。
检查封膜是否严密。
信号异常
检查光学窗口是否污染，及时清洁。
确认样品仓温控正常。
九、维护与保养
1. 日常清理
实验结束后清理样品仓。
用无水乙醇擦拭光学窗口。
2. 定期检测
定期校准温控系统与光学系统。
检查电源与散热系统。
3. 存放与停机
长期不用时切断电源，覆盖防尘布。
存放环境干燥通风，避免潮湿。
十、应用拓展
临床应用
病毒检测（新冠、流感、乙肝等）。
遗传病基因筛查与携带者检测。
肿瘤基因突变检测。
科研应用
基因表达定量分析。
突变筛查、SNP分型。
药物作用机制研究。
食品与环境
食源性致病菌检测。
转基因成分检测。
环境核酸监测。
十一、总结
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P凭借精准的控温系统、灵敏的光学检测、直观的软件平台和便捷的操作流程，为中小型实验室提供了高效的分子检测解决方案。通过严格遵循使用说明，用户能够快速上手并获得可靠结果。同时，结合日常维护与合理保养，SLAN-48P将长期保持稳定性能，为临床诊断、科研研究及食品安全检测提供有力支持。
