博日荧光定量PCR仪FQD-96C操作手册
一、设备简介
博日荧光定量PCR仪FQD-96C是一款96孔位实时荧光定量PCR检测设备，广泛应用于分子生物学研究、临床诊断、食品安全检测、环境监测等领域。该仪器集高灵敏度、多通道检测和智能化分析于一体，能够实时监控核酸扩增过程并输出标准化报告。其设计兼顾了实验效率、结果准确性与操作便利性，是科研和临床检测的理想工具。
二、安装与开机准备
1. 安装环境要求
温度控制在18℃至30℃，湿度≤70%。
避免阳光直射、灰尘和强电磁干扰。
放置于稳固的台面上，确保通风良好。
2. 开机检查
确认电源线及接口连接牢固。
打开电源开关，设备自动自检。
自检结束后进入主界面，提示可操作。
3. 实验耗材准备
专用96孔PCR反应板或八联管。
高透明光学封板膜。
校准过的移液器与无核酸酶污染吸头。
三、样品准备与装载
1. 反应体系配置
严格按照试剂盒说明操作。
每孔反应体积一般在10-50µL之间。
建议设置阴性对照与阳性对照，确保结果可靠性。
2. 加样操作注意事项
加样时避免产生气泡。
加样完成后轻轻离心，确保液体集中孔底。
贴膜要平整，避免渗漏。
3. 样品放置
打开仪器反应舱，将PCR板放入托盘。
确认放置方向正确后关闭舱盖。
四、程序设置与运行
1. 建立温控程序
进入“新建实验”，设置预变性、退火、延伸温度及时间。
根据实验设计设定循环次数，一般为35-45次。
2. 通道选择
仪器支持FAM、HEX、ROX、Cy5等多通道。
根据试剂荧光染料选择相应检测通道。
3. 保存模板
可保存实验参数模板，以便后续重复使用。
4. 启动运行
点击“开始实验”，系统实时记录扩增信号。
实验过程中可随时查看扩增曲线。
五、数据采集与分析
1. 扩增曲线
软件自动绘制扩增曲线。
Ct值由系统计算，反映起始模板浓度。
2. 熔解曲线
检测产物特异性。
单一峰值代表特异性好，多峰说明存在非特异性扩增。
3. 定量模式
绝对定量：通过标准曲线计算拷贝数。
相对定量：通过ΔCt方法分析目标基因与内参基因表达差异。
4. 多重检测
不同靶标通过多通道区分。
软件自动分离信号，避免串色干扰。
六、结果输出与打印
1. 数据导出
支持导出Excel、CSV、PDF等格式。
可在外部计算机进行统计分析。
2. 报告打印
提供扩增曲线图、熔解曲线图、Ct值表格、定量结果表。
报告包含日期、实验编号、样本信息。
3. 数据安全
软件具有权限管理功能，确保数据可追溯性。
七、常见问题及解决方案
1. 无扩增曲线
可能原因：模板降解、引物失效、体系配置错误。
解决方案：检查模板质量，优化反应体系。
2. Ct值偏高
可能原因：模板浓度低或存在抑制物。
解决方案：提高模板输入量，优化纯化方法。
3. 孔间差异大
可能原因：加样不均匀或气泡影响。
解决方案：保证移液准确，加样后离心去除气泡。
4. 打印不完整
可能原因：模板设置或打印机驱动问题。
解决方案：检查软件设置，更新驱动程序。
八、维护与保养
1. 日常维护
实验结束后关闭电源，擦拭外壳。
保持仪器周围清洁干燥。
2. 光学系统
避免灰尘污染光学通道。
不可用酒精等溶剂擦拭光学元件，应使用专用清洁布。
3. 温控系统
定期校准，确保孔间温差在规定范围内。
遇温控异常时联系技术支持。
4. 软件更新
定期升级软件与固件，获取最新功能与修复。
九、安全注意事项
操作时佩戴手套和防护眼镜。
严格遵守生物安全操作规范。
不得私自拆解设备内部结构。
遇紧急情况应立即断电并联系售后。
十、操作流程简要总结
开机 → 自检 → 主界面。
配置反应体系 → 加样 → 封板膜。
放置样品 → 设置温控程序与通道。
启动实验 → 实时监控曲线。
分析结果 → 导出数据或打印报告。
实验结束 → 关机 → 维护保养。
十一、结语
博日荧光定量PCR仪FQD-96C是一款功能全面的分子检测平台，具备操作简便、检测灵敏、结果可靠的特点。用户在严格遵守操作手册的前提下，能够充分发挥仪器性能，获得高质量实验数据。通过规范化操作与定期维护，既能保障实验安全，也能延长设备寿命，为科研与临床应用提供长期可靠的技术支持。
